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71.
72.
特异小干扰RNA敲除PLK1基因的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
为研究特异小干扰RNA(siRNA)作用于大肠癌细胞株SW480中PLK1 (Polo-like kinase 1)基因表达的mRNA对该细胞分裂生长的影响,设计了对应于PLK1基因表达mRNA不同位点的10种特异siRNA,经化学合成后,用脂质体转染SW480细胞,实时定量PCR检测PLK1基因的表达,观察不同的siRNA作用强度,并计数细胞了解相应细胞的生长情况,western-blot观察PLK1表达蛋白的变化和流式细胞计数分析细胞周期改变。发现10种siRNA均可敲除PLK1基因表达的20 %以上,其中P1、P4和P9 3组敲除mRNA达80 %以上,这3种siRNA及其混合物对PLK1基因mRNA的作用具有相应浓度效应,在25 nmol/L时达到最佳作用效果,而且相同浓度的混合物作用效果更好(超过95%),PLK1表达蛋白质明显降低,细胞周期在G2期受到阻碍。72 h后的各种siRNA浓度下细胞生长变化与PLK1基因的mRNA水平变化相一致。结果表明化学合成的特异siRNA对SW480细胞中PLK1基因表达具有消除作用,混合物作用更强,在细胞水平上抑制了SW480细胞的分裂生长。 相似文献
73.
细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,bR)是一种光驱受体蛋白,每个活性单元由3个单体组成,每个单体由一分子视蛋白和一分子的视黄醛发色团共价结合而成,其功能为从胞内向胞外定向传输质子,利用形成的质子浓度梯度将光能转化为化学能.光照后视黄醛发色团构型发生all-trans向13-cis转变,蛋白的构象也随之发生了一系列具有稳定中间态的变化并驱动质子的定向传递.为探讨bR视黄醛键合区保守性氨基酸色氨酸86 (Tryptop-han86,w86)对其光循环中间态和质子泵功能的影响,本研究采用定点突变技术将W86突变为侧链大小不同的F86和A86,通过原位紫外-可见光吸收光谱、闪光光解光谱、pH滴定、固体核磁共振等技术手段,探究W86F和W86A突变对bR光循环及质子泵功能影响差异性的分子机制.结果 表明,W86F和W86A突变均造成了bR暗适应状态下视黄醛顺反异构平衡向顺式构型占优的方向移动,且W86F突变可造成反式构型的完全消失.此外,无论是W86F还是W86A突变都造成了蛋白光循环中间态的减弱且衰减延长,以及质子泵功能减弱,但影响机制各有所不同,这可能与这两个突变对视黄醛多烯链上电子云的分布以及周围残基造成的扰动程度不同有关. 相似文献
74.
高粱丝黑穗病菌种内分化的RAPD分析 总被引:6,自引:0,他引:6
应用随机引物对来自不同地理来源、不同寄主和经寄主致病力测定的高粱丝黑穗病菌2、3号生理小种的10个菌株的DNA进行分析,所产生的RAPD结果表明,丝黑穗病菌S.reilianum具有丰富的种内遗传多样性,存在明显的分化现象。经聚类分析可将供试菌株大致分成两组,辽宁清原H2和黑龙江绥化H9菌株为一组。辽宁沈阳(H3)、阜新(H1)、营口(H10),山西榆次(H4),吉林四平(H5),黑龙江哈尔滨(H6),河北张家口(H8)等高粱丝黑穗病菌株以及辽宁沈阳的玉米丝黑穗病菌株(H7)为另一组,并且同一组内的DNA多态性亦有差异。高粱丝黑穗病菌2号生理小种和3号小种间在分子水平上存在差异明显。 相似文献
75.
西方蜜蜂不同类型杂交子代形态指标的测定及杂种优势分析 总被引:1,自引:0,他引:1
“浙农大 1号”意蜂Apismelliferaligustica (Ea)与喀尼鄂拉蜂A .melliferacarnica (K)、卡尔巴阡蜂A .melliferacarpatica (C)、高加索蜂A .melliferacaucasica(G)、乌克兰蜂A .melliferaacervorum(W)、东北黑蜂A .melliferaspp .(D)分别进行正反杂交试验 ,测定其杂交 1代的吻长、背板 3 +4长、蜡镜面积、跗节指数、右后足胫节长、花粉筐面积、翅钩数、肘脉指数、翅膀面积等 9项形态指标。分析与经济性状密切相关的吻长、背板 3 +4长、蜡镜面积、花粉筐面积、翅膀面积等形态指标的杂种优势率 ,发现吻长、背板 3 +4长、蜡镜面积、花粉筐面积、翅膀面积的较佳杂交组合分别是D(♂ )×Ea(♀ )、Ea(♂ )×C(♀ )、K(♂ )×Ea(♀ )、Ea(♂ )×K(♀ )和Ea(♂ )×K(♀ ) ,其杂种优势率分别为 1 47%,4 79%,2 6 5 7%,1 0 88%和4 97%,并对这些杂交组合在养蜂生产上的利用价值做了初步分析 相似文献
76.
77.
猪血红蛋白的酶解及氨基酸含量的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
猪血是一种营养价值高而价格低廉的蛋白质资源.猪血中含有丰富的蛋白质,其中血红蛋白占主要部分.因此,对血红蛋白及其水解产物的研究受到了国内外众多学者的关注.为选出适合于水解猪血红蛋白的蛋白酶,笔者采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶对猪血进行单酶和复合酶水解试验,确定碱性蛋白酶为水解猪血的适用酶.通过质谱仪测定,碱性蛋白酶酶解产物分子量集中在800~2400道尔顿,而800~1260道尔顿区间占主要部分;经全自动氨基酸分析仪测出其产物含有17种氨基酸,其中含8种必需氨基酸,必需氨基酸占总氨基酸量的50.93%,说明碱性蛋白酶酶解产物是制作食品和饲料添加剂的理想资源. 相似文献
78.
流域尺度水土保持生物措施减沙效益研究 总被引:7,自引:3,他引:7
1 引 言黄土高原位于黄河中游 ,流经黄土高原的 9大支流进入河口镇至花园口的中游河段 ,总径流量为 187× 10 8m3 ,输沙量占黄河流域总沙量的 90 % .建国以来以修建梯田坝地、造林种草、建谷坊、调整种植结构为主的水土保持工程、生物治理长年不懈 ,其目的在于减水减沙 ,改善流域生态环境 .但是 ,除部分中小尺度流域进入生态、经济效益良性循环的轨道外 ,大部分地区生态环境仍然十分脆弱 ,部分地区有恶化之势 .因此 ,定量评价水土保持工程、生物措施的治理效益是广为关注的研究课题 ,虽相关的研究成果不少 ,但是绝大部分工作是评价水土… 相似文献
79.
芥蓝下胚轴离体培养及高频率植株的再生 总被引:7,自引:1,他引:6
三个芥蓝品种下胚轴离体植株再生的条件的研究结果表明:下胚轴切口处可直接诱导出芽,诱导“早花尖叶芥蓝”、“中花尖叶芥蓝”和“迟花尖叶芥蓝”直接出芽的最佳激素组合分别为2.0mgL-1BA,0.3mgL-1NAA+2.0mgL-1BA,0.5mgL-1NAA+2.0mgL-1BA,其相应的芽发生频率分别为84.6%,86.7%,93.3%。诱导芽发生的最适蔗糖浓度是1%。培养基中加入4.0mgL-1AgNO3和500mgL-1MES可显著提高芽再生频率。再生芽在MS附加0.1mgL-1NAA的培养基上诱导生根形成完整植株。离体再生苗与种子萌发实生苗田间生长外形差别不大,但长势稍慢。 相似文献
80.