褐飞虱和桃蚜粗提液中酚氧化酶原激活系统的激活特点

采用研磨法制备褐飞虱Nilaparvata lugens (Stål)和桃蚜Myzus persicae (Sulzer)粗提液,用于研究几种化学因子对粗提液中酚氧化酶原激活系统(proPO-AS)的激活特点。结果表明, 在0.1～100 mmol/L的Ca²⁺浓度范围内,虱液和蚜液的酚氧化酶(PO)活性随Ca²⁺浓度升高而增强,并在30 mmol/L处PO活性达到最高,在此限之上PO活性反而下降。当昆布多糖浓度从10^-4 mg/mL升至10 mg/mL时,虱液和蚜液的PO活性也随之升高,但再提高昆布多糖浓度却未见PO活性的峰顶出现。在6种葡聚糖对PO的激活作用中,昆布多糖和酵母聚糖能显著增强PO活性,但curdlan对虱液和蚜液的PO无明显激活作用,而甘露聚糖、右旋糖苷和纤维素则降低PO活性。这些结果显示β-1,3-葡聚糖能有效激活proPO-AS。Ca²⁺和丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF加样顺序的不同也会影响PO活性。     

层析辅助体外复性含有多对二硫键的融合蛋白质

为建立一种基于阴离子交换介质辅助的含多对二硫键的抗凝溶栓双功能水蛭素12肽-瑞替普酶融合蛋白质 (HV12p-rPA) 的复性方法,采用Q Sepharose XL作为层析复性介质,通过正交实验考察蛋白质上样量、流速、脲梯度、洗脱液中精氨酸浓度、脲浓度、pH、还原型及氧化型谷胱甘肽等因素对复性过程的影响,探索最佳层析复性条件。结果表明：脲梯度、上样量及精氨酸浓度是影响复性的3个主要因素。脲梯度是复性成功的关键,上样量增大时复性蛋白质比活降低,精氨酸辅助HV12p-rPA复性的最佳浓度为1 mol/L。创建了脲、pH双梯度下的阴离子交换层析辅助HV12p-rPA的复性方法,复性后蛋白质的溶栓比活达到46 520 IU/mg,抗凝比活达到9 980 ATU/mg,与稀释复性方法相比,该方法能使复性蛋白质的溶栓比活提高14~15倍,抗凝比活提高7~8倍。     

天津市三级医院医疗设备管理现状调查

目的 比较天津市三级甲等医院和三级乙等医院医疗设备管理质量考核结果,为医院提高医疗设备管理质量提出建议。方法 采用现场调查法,并对考核结果应用Fisher确切概率法进行对比统计分析。结果 在管理制度实施、人员技术培训以及科室抢救设备定期安全检查记录的考核中,三级甲等医院与三级乙等医院达标率差别有统计学意义(P<0.05),前者高于后者;在另外几项的考核中,三级甲等医院与三级乙等医院达标率差别无统计学意义（P《0.05）。结论 各医院要针对自身存在的问题,采取相应措施,提高医疗设备管理质量水平。     

不同CO_2浓度条件下灰飞虱体内RSV的定量检测

灰飞虱的群体带毒率及体内条纹病毒(rice stripe virus,RSV)的准确检测是预测水稻条纹叶枯病在CO2浓度升高背景下能否大发生的重要参考依据之一。本研究应用quali-fiedRT-PCR(qRT-PCR)测定不同CO2浓度条件下灰飞虱体内的RSV含量。结果表明:在试验的3个CO2浓度梯度(370、470和570μl.L-1)下,470μl.L-1的CO2浓度最适合RSV在灰飞虱体内的增殖,此方法与现已普遍应用的酶联免疫检测法(enzyme-linkedi mmu-nosorbnent assay,ELISA)和斑点免疫结合检测法(dotimmunobinding assay,DIBA)相比,具有快速、灵敏和特异性强的优点,且不需制备抗血清,适于普及应用。     

蝎毒耐热蛋白对MPTP诱导的帕金森病小鼠脑内小胶质细胞的影响

目的：进一步探讨蝎毒耐热蛋白（SVHRP）改善MPTP（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP）小鼠伴有空间学习记忆障碍的机制。方法：给予C57BL／6小鼠颈部皮下注射MPTP（20mg／kg）,连续8d,同时设立SVHRP治疗纽,观察小胶质细胞免疫反应活性的改变。结果：与盐水对照组相比,MPTP小鼠脑区OX-42免疫反应阳性小胶质细胞免疫反应活性明显增强。模型给药组与模型组相比OX-42免疫反应阳性小胶质细胞免疫反应活性明显降低。结论：SVHRP可以抑制MPTP诱发的小鼠脑内小胶质细胞的激活以减轻脑内神经炎症。     

猕猴神经系统器官蛋白水解酶种类和性质研究

实验以太行山猕猴为材料,用活性电脉（Ｇ－ＰＡＧＥ）方法分析研究了神经系统中蛋白水解酶的种类、活性及ｐＨ依赖性,结果表明：（１）神经系统各部分均具有３１、３０、２９ｋｕ三种酸性蛋白水解酶;（２）９４ｋｕ的中性蛋不解酶普遍存在于神经系统各器官中;（３）在中性和碱性条件下,坐骨神经中蛋白水解酶活性较强,其余部分生微弱。     

透脓托毒饮配合西医手术疗法对肛周坏死性筋膜炎患者预后的影响

目的:探究透脓托毒饮配合西医手术疗法对肛周坏死性筋膜炎(Perianal necrotizing fasciitis,PNF)患者预后的影响。方法:选择西安市中医医院肛肠科于2013年10月-2018年10月收治的肛周坏死性筋膜炎患者60例,根据其入院顺序经随机数字表法分为两组,每组各30例。其中,对照组行PNF清创术,研究组在对照组基础上辅助透脓托毒饮进行治疗,对比两组的治疗总有效率、外周血炎症因子水平、住院时间、创面愈合时间、疼痛积分、腐肉脱落时间、复发率和死亡率。结果:治疗后,研究组的总有效率显著高于对照组(93.3%vs. 73.3%,P0.05);两组血清肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6, IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平均较治疗前显著降低,且研究组以上指标均明显低于对照组(P0.05)。研究组的住院时间、创面愈合时间、疼痛积分、腐肉脱落时间均显著短于(低于)对照组(P0.05)。随访3个月,两组的术后复发率和死亡率比较均无显著差异(P0.05)。结论:透脓托毒饮配合清创术治疗PNF的效果显著优于单用清创术,其可有效改善患者的临床症状和预后,可能与其显著降低血清炎症因子水平有关。     

小麦RCA的cDNA片断克隆和反义表达载体的构建

目的:试图分离和克隆小麦Rubisco活化酶cDNA片断并构建反义表达载体。方法:采用RT-PCR技术克隆cDNA片断,对序列用Blast等软件进行分析,并将该片断反向连接于植物表达载体pROK2的CaMV35S启动子下游,构建反义表达载体。结果:获得了小麦Rubisco活化酶(RCA)的cDNA片断(GenBank注册号:DQ984669);小麦RCA的cDNA片断推导的氨基酸序列与其它植物的RCA氨基酸序列高度同源。序列比较表明,用本实验所得的cDNA序列推导出的氨基酸序列与GenBank登录的大麦(AAA63163)、南极银须草(AAP83928)、水稻(AAX95414)、玉米(AAC97932)、拟南芥(NP 850321)和烟草(CAA78703)等的RCA序列的同源性分别为97%、95%、88%、83%、82%和82%;分析表明,该序列为新的小麦RCAα的cDNA序列;通过选择和引入合适的酶切位点进行载体构建,构建了小麦RCA的cDNA反义表达载体pR-AntiRCA。结论:构建成了小麦RCA的cDNA反义表达载体。     

人CD147的克隆表达及其对成纤维细胞基质金属蛋白酶表达的影响

CD147可以促进基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,与肿瘤的生长和浸润有关。为了研究CD147在大肠癌中的作用,利用RT-PCR从一健康人克隆了cd147基因,测序发现该基因存在两个碱基突变,其中C634T造成了CD147跨膜区212位氨基酸由L突变为F。分别构建CD147的原核(pGEX-5x-147)和真核(pEGFP-147)表达系统,在宿主菌BL21和CCL229细胞中均获得了稳定表达。Western印迹显示原核表达产物比真核CD147分子量小,说明原核CD147缺乏糖基化。荧光显微镜显示真核CD147表达定位于CCL229细胞膜,表明突变L212F不影响CD147的膜定位。用明胶电泳检测表达的CD147对MMPs表达的影响,结果显示原核产物不能诱导MMPs表达上调,而真核产物能够明显诱导MMPs表达上调,说明糖基化对于CD147活性是必需的,真核系统能够表达具有生物功能的CD147,并且突变L212F不会影响蛋白质的活性。     

高冰草中高分子量麦谷蛋白亚基的编码基因

通过SDS-PAGE法分析了高冰草(Agropyron elongatum(Host)Nevski)种子麦谷蛋白亚基,发现高冰草的麦谷蛋白亚基种类比普通小麦更加丰富.通过基因组PCR法用高分子量麦谷蛋白亚基基因的特异引物从高冰草核基因组中分离出了7条麦谷蛋白亚基的全编码序列,分别命名为AgeloGl～AgeloG7.其中的5条已进行全序列测定,对AgeloGl和AgeloG4进行了末端测序.尽管其中的4条基因的编码序列(AgeloG4,AgeloG5,AgeloG6和AgeloG7)小于1.8kb,但是对从克隆到的序列推导出的氨基酸序列与已经发表的小麦高分子量麦谷蛋白亚基序列进行对比分析发现,这些亚基与来自小麦的高分子量麦谷蛋白亚基具有很高的同源性.并且对信号肽、N-、C-末端的氨基酸序列分析显示,这7条序列编码的亚基皆为y-型亚基.用5条全部测序的编码序列与普通小麦的A、B、D、粗山羊草的D、圆柱山羊草的C、伞穗山羊草的U、黑麦的R染色体的编码高分子量麦谷蛋白的序列进行了聚类分析.表明,AgeloG2与小麦lDy,AgeloG3与小麦1By,AgeloG5、AgeloG6和AgeloG7与小麦1Ay在起源和进化上有较高的相似性.