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有证据显示,microRNA( miRNA)可作为癌基因或抑癌基因发挥功能,参与细胞增殖和凋等 调控;PI3K/Akt通路的持续活化与肿瘤的发生、发展密切相关.在本研究中,我们通过microarray技术在HeLa细胞中检测经ly294002作用24 h阻断PI3K/Akt通路后microRNA的表达变化.Taqman 实时 PCR实验结果显示,has-miR-30d的表达在PI3K/Akt通路被阻断后明显上调.萤光素酶报告基因转染结合Taqman 实时 PCR显示,稳定转染miR- 30d过表达质粒的HeLa细胞系中miR-30d的表达量升高并且有活性.MTT及流式细胞术分析显示,过表达miR-30d的HeLa细胞其增殖受到抑制.这些结果说明,has-miR-30d可抑制HeLa细胞增殖,负性调节细胞生长,是一个潜在的抑癌基因. 相似文献
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高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)慢性持续性感染是诱发宫颈癌的主要病因.体外表达的HPV主要衣壳蛋白(L1)可自组装成病毒样颗粒(virus-like particle, VLP),免疫后可诱导产生型别特异性中和抗体,有效保护机体免受同型病毒的感染,因此可望预防病毒感染及感染相关的宫颈癌等病变.HPV 58是诱发我国妇女宫颈癌的主要高危型病毒之一,目前尚无针对HPV 58的疫苗问世.本研究联合采用多种策略对HPV 58 L1野生型基因进行改造,获得HPV 58 L1改造基因,命名为HPV 58mL1,用杆状病毒 昆虫细胞表达系统进行HPV 58 mL1的表达,CsCl密度梯度离心法纯化获得HPV 58 mL1重组蛋白,电镜分析结果显示,重组蛋白形成直径约55 nm的VLP.皮下免疫新西兰兔和豚鼠,ELISA检测显示,免疫动物产生高滴度针对HPV 58 mL1 VLP的抗血清,免疫斑点印迹检测显示,抗血清是针对VLP表面表位的.本研究表达了均一性好的HPV 58 mL1 VLP,并获得两个种属的HPV 58 mL1 VLP抗血清,为进一步研究有效预防HPV 58感染的疫苗打下基础. 相似文献
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白眉蝮蛇去整合素Adinbitor对Akt信号转导通路及对SSMC7721细胞增殖、迁移和凋亡的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
研究白眉蝮蛇去整合素adinbitor对蛋白激酶B(Akt)通路信号分子的影响及对SSMC7721细胞增殖、迁移及凋亡的影响.采用MTT法检测adinbitor对SSMC7721细胞增殖的作用;Hoechst33258试剂盒检测adinbitor对SSMC7721凋亡的影响; Transwell 检测adinbitor对SSMC7721细胞迁移的作用;Western印迹检测adinbitor对信号分子Akt及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、核因子κB(NF-κB)的抑制蛋白IκB-α及NF-κBp65的影响;分光光度法检测其对半胱天冬蛋白酶-3 (caspase -3)活性的影响.结果显示,adinbitor可显著抑制SSMC7721细胞的迁移和增殖(与对照组比较,P<005),促进凋亡. 在浓度梯度adinbitor作用下,Akt 表达量基本不变,但其磷酸化受到抑制.细胞浆内IκB α表达增加,细胞核内NF-κBp65表达减少,caspase-3活化倍数平均在2.24~3.85之间,以上作用均呈现剂量依赖性.结果说明,adinbitor可通过抑制Akt相关信号转导分子的作用而抑制SSMC7721细胞增殖和迁移,并促进其凋亡. 相似文献
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RyhB是一种大小为90个核苷酸的细菌非编码小RNA分子(small noncoding RNA, sRNA).当铁缺乏时,RyhB通过下调一系列与铁的储存和利用相关蛋白的表达水平以维持体内的铁平衡,而其本身的表达则受到负调控因子Fur(ferric uptake regulator)的调节.在体内,RyhB与Hfq蛋白和核糖核酸酶E (ribonuclease E, RNase E)形成核蛋白复合物sRNP来发挥活性.sRNP通过RyhB与靶基因的互补配对序列作用于靶基因的核糖体结合位点,阻断靶mRNA的翻译,并迅速引起靶mRNA的降解.此外,RyhB还可以通过影响致病菌的生物膜形成、趋化性、耐酸性等方面的能力对细菌的致病力进行调节.本文综述了RyhB的结构、功能及作用机制方面的研究进展,并对其存在的生理意义进行了探讨. 相似文献
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白花油麻藤的地理分布及适生区预测 总被引:1,自引:0,他引:1
白花油麻藤是豆科黧豆属大型木质藤本植物。运用Diva-Gis软件,结合海拔高度图层和植被图层绘制了白花油麻藤的地理分布图,分析了白花油麻藤的分布规律和生境特性;以Maxent模型作为物种适生性预测模型,温度和降水作为预测的环境因子,预测了白花油麻藤在中国的适生区。结果表明:白花油麻藤在中国27.5°N以南中低海拔10~1200m有分布,如山坡、路旁、沟谷、溪边及林下灌丛;喜温暖湿润气候,广东为白花油麻藤分布最为密集的地区。白花油麻藤的分布与植被类型和海拔有着密切的关系,分布区的植被类型为亚热带常绿阔叶林和热带季雨林,随着植被分布密度的降低和海拔的升高白花油麻藤的分布范围和分布密度呈逐渐缩小的趋势。白花油麻藤在中国的潜在分布区为粤、桂、闽、港、澳、滇、琼、赣、川、黔、藏、湘、浙等省区及交界处,其种质资源的保存及其利用应考虑其潜在分布区。 相似文献
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苦玄参苷类成分的积累动态研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用高效液相色谱技术,对不同生长期的苦玄参样品进行分析,以揭示苦玄参苷类成分的积累动态规律。在对苦玄参植株生长情况进行观察的基础上,收集不同生长期的苦玄参样品,通过高效液相色谱法仪测定其中有效成分的含量,并进行色谱图比较及数据分析。结果表明:苦玄参总苷、苷IA和IB的含量随着生长周期的变化基本上呈现一致性,苦玄参苷IA和IB的含量均在75d达到整个生理期的最高峰,随后缓慢下降,但在果期前期(即120d)两者含量再次出现次高峰,此时的生物量达到最大。由此可以确定苦玄参药材最佳采收期应在果期前期进行采收。 相似文献
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重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Pichia pastoris细胞株用于高密度发酵,构建了多种分泌表达载体,在Pichia pastoris中作表达,研究表达载体构建等因素对表达量的影响。发现采用酿酒酵母α性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高10%左右。而载体整合方式、整合拷贝数、5’非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响。筛选到的高表达株经高密度发酵,细胞湿重达460 g/L,发酵液上清的人血清白蛋白含量为1.0 g/L。 相似文献
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用重叠PCR技术将PTH(parathyroid hormone, 甲状旁腺激素)基因与TFN(transferrin N_terminal half_molecule, 转铁蛋白N端半分子)基因在体外融合,融合基因克隆至真核表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母GS115。转化子经甲醇诱导后,融合蛋白得到了表达并分泌到发酵上清液中。经 SP Sepharose F F阳离子交换层析、Phenyl Sepharose Fast Flow疏水层析纯化获得了纯度大于95%的PTH_TFN样品。Western blot分析及腺苷酸环化酶实验证明融合蛋白中的PTH具有与抗PTH抗体结合能力及刺激腺苷酸环化酶的活性,铁饱和实验证明融合蛋白中的TFN和单独的TFN具有相同铁结合能力。因而TFN可望作为PTH的天然运输载体。 相似文献