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转基因鱼工作的开展被用于水产科学基础与应用研究的各个领域。应用方面的一顶重要研究利用转生长激素基因来提高鱼的增长速度。需要解决两个问题:一是转基因鱼所使用的基因元件;二是外源基因的高整和率与高表达,已有许多报道认为:不同种动物的生长激素不一定相互促进生长。我们通过显微注射,将鲤鱼金属硫蛋白启动子(cMT)与大巴哈鱼生长激素基因(sGH)的融合基因(cMT-sGH)导入鲤鱼半日细胞后期的早期胚胎,构建了全鱼基因鲤鱼。通过斑点杂交、Southern blot结合PCR-Southern blot,对外源sGH的整和进行了精确的检测和分析。实验选取性成熟鲤鱼,收集卵子和精子,湿法受精获得受精卵。经过转基因注射,孵化后的鱼苗放入水族。待鱼平游,提取总DNA进行检测。以PstI酶切质粒pcMTsGH(Fig.4)分离3.4KbsGH片段,用随机引物标记,作为杂交探针。同时,设计并合成sGH基因的PCR特异引物。Fig.1的斑点杂交结果与Fig.2的PCR-Southern结果相比较(Table1),说明斑眯杂交存在着高的假阳性。而PCR-Southen将PCR的快速、方便与Southern的准确性相结合,排除了PCR本身可能的非特异,大大提高了检测效率,同时也检验了引物的设计是否成功。Table1的结果表明:我们所构建的基因鱼达到了37.7%的高整和率,且稳定性好。高整和率的原因与所使用的基因元件有很大关系。Fig.3基因组的Southern行为-PstI和BglII酶切的杂交信号条带多、共迁移,说明基因的整和方式为多拷贝,可能伴有碱基修饰。这可能是表达率降低的重要原因。 相似文献
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888.
油樟油细胞和粘液细胞的发育解剖学研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用薄切片法对油樟茎叶油细胞和粘液细胞发育的研究结果表明,油细胞最早发生于第二叶原基以及茎端皮层和髓的基本分生组织中。未出现油细胞以前,在上述器官的基本分生组织和原分生组织中,难以区分油细胞的原始细胞与周围细胞,当油细胞原始细胞呈现出体积较大,液泡化程度较低,细胞核大而明显的特征才明显可辨,以后经过液泡融合,油细胞成熟和油细胞的细胞质解体阶段而成为一贮油的囊,而且油囊连接在杯形构造上,粘液细胞的早期发育过程与油细胞的相同,而在细胞液泡化的后期,靠近大液泡的细胞质中产生粘液物质。并扩散到大液泡中,粘液物质不断产生,变浓,占据整个细胞腔,细胞质解体后而成为完全成熟的粘液细胞,因此可见,油细胞和粘液细胞是同源的,也可能粘液细胞是由油细胞转化而来的。 相似文献
889.
影响陕西种源香椿硬枝插条培养生产芽菜因素的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
试验结果表明,陕西种源香椿硬枝插条在温室进行芽菜培育休眠芽萌发的最低温度指标为16.8℃,有效积温39.6℃。培养液;(NH4)2SO40.6g/L (NH4)H2PO40.45g/L KH2PO41.1g/L CaSO40.6g/L MgSO40.5g/L,其效果较其它溶液为好。 相似文献
890.
应用五行针治疗颈肩腰腿痛症210例观察 总被引:1,自引:1,他引:0
本文利用体内磁场的作用,采用五行针的磁性及真空吸附原理治疗颈椎增生、肩周炎、坐骨神经痛共210例。共治愈97例,占46.20%,;显效60例,占28.56%;好转48例,22.85%;无效5例,占2.38%。其疗效满意,疗效简便、无痛苦,无任何副作用,值得推广应用。 相似文献