温泉宏基因组来源的D-来苏糖异构酶性质研究*

目的: 从高温温泉宏基因组中挖掘能够高效催化合成稀有糖的新耐高温D-来苏糖异构酶。方法: 从云南昌宁鸡飞温泉底泥中提取宏基因组DNA并进行高通量测序,经基因注释及序列比对鉴定D-来苏糖异构酶基因,构建大肠杆菌异源表达载体并诱导表达,通过亲和层析纯化重组蛋白并对其性质研究。结果: 从温泉底泥宏基因组测序结果中鉴定得到8个D-来苏糖异构酶基因,选择4个基因进行异源表达,其中JF-LI1和JF-LI4在大肠杆菌中成功表达并检测到酶活性。研究表明,JF-LI1和JF-LI4的最适温度分别为70℃和75℃。JF-LI4具有较宽的作用温度和良好的热稳定性,在30~100℃的温度范围内剩余40%以上的酶活力。JF-LI1和JF-LI4的最适pH分别为7.0和7.5,在中性偏酸性条件下具有较高的活力和较强的稳定性。重组JF-LI1和JF-LI4具有较宽的底物谱,除了对D-来苏糖活性最高外,对L-核糖、L-核酮糖、D-果糖和D-甘露糖均具有活性。重组JF-LI1和JF-LI4对L-核糖的催化效率分别为0.56 L/(mmol·s^-1)和0.61 L/(mmol·s^-1),是目前已知的D-来苏糖异构酶中最高的。结论: 从高温温泉宏基因组中获得8个新的D-来苏糖异构酶基因,对JF-LI1和JF-LI4进行异源表达和性质研究,具有pH稳定性好、热稳定性强以及底物特异性宽泛的特点,在制药、食品、化妆品等工业领域有重要的应用潜力。     

PRRSV NADC30-like SYBR Green Ⅰ qPCR检测方法的建立与应用

为建立高效快速的PRRSV NADC30-Like毒株荧光定量PCR(SYBR Green real-time PCR)检测方法,根据NADC30毒株Nsp2基因保守序列设计特异性引物,通过优化确定最佳反应条件,并进行灵敏度、特异性、重复性实验以及临床样品的检测。结果显示,标准品在10~7 copies/μL到10~2 copies/μL浓度范围内具有良好的线性关系,最低检测浓度为2.25×10~1 copies/μL;该方法与HP-PRRSV、PCV、PEDV、TGEV、PRV、CSFV、PoRV无交叉反应,批内和批间的变异系数(CV)小于1.9%,在临床样品的检测中较普通PCR有更高的检出率。建立了PRRSV NADC30-Like毒株荧光定量PCR检测方法,具有敏感性高、特异性强、稳定性好、准确度高和检测快速等优点,可用于PRRSV NADC30-Like感染的早期诊断、样品的快速检测与定量分析。     

基于地面LiDAR数据的塔里木河下游胡杨林结构参数反演

以塔里木河下游天然胡杨林为研究对象,利用Riegl VZ-1000型地面激光扫描仪(Terrestrial Laser Scanning, TLS)获取离河道不同距离的8个样方内513棵胡杨的三维点云数据,通过建立冠层高度模型、Hough变换等方法获取单木株数和结构参数,并与传统的每木检尺实测数据和无人机(Unmanned Aerial Vehicle, UAV)低空影像进行对比,验证激光雷达方法的测树精度;对TLS获取的胡杨树形参数进行相关性分析,并建立关系模型;探讨不同水胁迫条件(不同离河道距离,不同地下水埋深)对胡杨单木结构参数的影响;最后按不同径级划分胡杨的年龄,得出各龄级胡杨所占比例。结果表明:(1)TLS能够高精度获取不同密度和长势的胡杨单木株数和结构参数,单株准确分割比率为94%—100%,相对于UAV低空影像更为准确;(2)TLS获取的胡杨树高(Tree height,TH)、胸径(Diameter at breast height, DBH)、冠幅直径(Crown diameter,CD)和冠幅面积(Crown area,CA)与传统实测值拟合度R²     

以分枝杆菌为底盘细胞生物合成甾药中间体的<研究进展

甾体药物(steroid drugs)是一类具有重要生理和药理作用的药物。目前，甾药行业主要通过分枝杆菌(Mycobacteria)转化制备系列重要甾药中间体，再经过必要的化学修饰或酶法修饰获得高端甾体药物。较之前的“薯蓣皂素-双烯醇酮”体系具有原料廉价且来源丰富、生产成本低且反应路线短、收率高且环境友好等优点。基于基因组学和代谢组学进一步揭示分枝杆菌甾醇降解途径中关键酶系及其催化机理，使分枝杆菌作为底盘细胞成为可能。本文对不同物种类固醇转化酶的发现、分枝杆菌自源基因和异源基因过表达的改造以及分枝杆菌作为底盘细胞的优化和修饰等方面的研究进展进行了综述。     

细菌转录器内的蛋白—蛋白相互作用

本文介绍了大肠杆菌生理活动的分子生物学基础，重点阐述细菌在各种环境条件下基因的转录调节。转录调节蛋白被激活后，有的诱导产生不同的ＲＮＡ多聚酶的δ亚基，有的与ＲＮＡ多聚酶的Ｃ末端结合，有的与δ＾７０亚基的Ｃ末端结合，通过蛋白－蛋白间的相互作用，启动转录过程。     

“筋骨并重”思想指导下的推拿手法联合颈夹脊穴龙虎交战针法治疗神经根型颈椎病的临床研究

摘要 目的：探讨“筋骨并重”思想指导下的推拿手法联合颈夹脊穴龙虎交战针法治疗神经根型颈椎病（CSR）的治疗效果。方法：选取2020年1月到2021年5月期间在东莞市中医院针灸科接受诊治的CSR患者108例，参照随机数字表法分成对照组与观察组，各54例。对照组接受常规治疗、“筋骨并重”思想指导下的推拿手法治疗，观察组在对照组的基础上联合颈夹脊穴龙虎交战针法治疗，两组均治疗2周。对比两组疗效、中医证候总积分、视觉模拟评分法（VAS）、颈椎病临床评价量表（CASCS）评分、颈部生物学相关参数及血液流变学。结果：观察组的临床总有效率为94.44%（51/54），高于对照组的74.07%（40/54），差异有统计学意义（P<0.05）。两组治疗2周后中医证候总积分、VAS评分下降，且观察组较对照组低；CASCS评分升高，且观察组高于对照组（P<0.05）。两组治疗2周后左旋转、右旋转颈功能活动度和前屈、后伸颈部肌力升高，且观察组高于对照组（P<0.05）。两组治疗2周后全血黏度高切、纤维蛋白原、血浆黏度、全血黏度低切下降，且观察组低于对照组（P<0.05）。结论：“筋骨并重”思想指导下的推拿手法联合颈夹脊穴龙虎交战针法治疗CSR患者，可有效改善其临床症状，减轻疼痛，恢复颈部脊椎功能，改善血液流变学，疗效确切。     

"植物生长素的发现"探究——建构型教学设计

"探究-建构"型教学模式是一种与新课改相协调的教学模式,它是以科学知识的建构为理论指导,以探究为基础,建构为目标的教学过程.     

一日清单信息在临床工作中的管理与应用

针对以往住院患者医疗费用明细不公开造成的种种弊端，我院实行“一日清单”制度，既维护了患者的切身利益，又为医院创造了社会效益。     

刺激兔下丘脑近中线区对心功能的影响

1.刺激兔下丘脑近中线区可出现血压、左内压上升、瞳孔扩大以及一系列驱体运动等类似于发生防御反应的现象,间有心律失常出现。反复刺激之,可导致心输出量减少,心肌缺血等心功能损害。2.刺激下丘脑近中线区时出现的窦性心动过缓、窦房暂停等与迷走神经的作用有关。而过早搏动则与交感兴奋对心肌β受体的作用以及血压升高、心室负荷骤然增高的关系较为密切。3.反复刺激下丘脑近中线区所引起的心肌缺血、心输出量减少等。心功能损害主要与儿茶酚胺对心肌β受体的刺激有关。