拟南芥细胞异三聚体G蛋白的分离纯化

以拟南芥哥伦比亚Columbia(Col-0)野生型悬浮培养细胞为材料,采用超声波破碎、匀浆、离心、40%~60%饱和度硫酸铵分步沉淀、Sephadex G-25脱盐、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换、Sephadex G-200凝胶过滤,最后经过Sepharose CL-6B得到纯化的目的蛋白,蛋白收率为0.097%。纯化的蛋白质经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定显示为一条带,经Western blotting证实为G蛋白。把经Native-PAGE鉴定的蛋白质的条带回收,进行SDS-PAGE显示有3条带。一条是Gα亚基,其分子量为60kDa左右;另外2条带分子量为45kDa和35kDa,可能是β、γ亚基,初步证实拟南芥中存在异三聚体G蛋白。G蛋白提取方法的建立为在基因突变型拟南芥中G蛋白功能的研究奠定基础。     

拟南芥谷胱甘肽S-转移酶Zeta类进化酶的获得及其特性分析

拟南芥谷胱甘肽S-转移酶Zeta类(AtGSTZ)是一种与细胞代谢和环境净化密切相关的多功能酶.应用易错PCR和多轮DNA洗牌技术构建了AtGSTZ随机突变文库;再利用pH指示剂颜色改变法对突变文库进行筛选,获得了9个二氯乙酸脱氯活性提高的突变子.其中,NN23含25个氨基酸突变,比活力提高120%,NN20含24个氨基酸突变,比活力提高102%,EC1含2个氨基酸突变,比活力提高47%,其他6个为单点突变,比活力分别提高9%～60%.酶学分析显示,所有进化酶对底物二氯乙酸的催化效率和对谷胱甘肽的亲和力以及个别进化酶的复性能力都得到不同程度的提高,但热稳定性均没有明显改善.同时,对一系列与AtGSTZ空间折叠及催化活性相关位点进行了讨论.     

蓝浆果花冠形态特征及其与果实横径相关性的分析

对兔眼蓝浆果（Vaccinium ashei Reade）、北方高丛蓝浆果（V.corymbosum L．）和南方高丛蓝浆果（V.corymbosum hybrids）3个品种群及南方高丛蓝浆果实生系的花冠长度、花冠宽度、花冠长宽比和花冠口径大小等特征进行了测定和比较,并研究了花冠形态特征参数与果实横径的相关性。研究结果表明,蓝浆果不同品种群间和同一品种群内不同品种间的花冠形态特征参数差异较大;依据花冠形态特征参数,可将供试的兔眼蓝浆果和南方高丛蓝浆果各品种及南方高丛蓝浆果各实生系初步划分为4种类型,将供试的北方高丛蓝浆果各品种划分为3种类型。此外,只有南方高丛蓝浆果各品种及其实生系的果实横径与花冠宽度相关性显著（P〈0．05）,相关系数分别为0．639和0．324。     

外源报告基因EGFP在盐藻中实现瞬时表达

探索杜氏盐藻 (Dunaliellasalina)的转基因方法和筛选方法 .利用烟草花叶病毒启动子 (CaMV35S)、衣藻叶绿体atpA启动子与来源于水母的加强型绿色荧光蛋白报告基因 (EGFP)构建表达载体pART7GFP和pUCGFP ,转化盐藻 .EGFP在CaMV 35S启动下表达出绿色荧光蛋白 ,在荧光显微镜下看到发绿色荧光的转基因盐藻 .根据荧光数目进行统计 ,转化效率高于 5 % .衣藻来源的启动子atpA在盐藻中未能启动EGFP的表达 .用直径 1μm的金粉颗粒和 0 6 μm的金粉进行基因枪法转化 ,1μm的金粉颗粒成功将外源基因导入盐藻 ,用 0 6 μm的金粉配合多种技术参数也没有将外源基因导入盐藻 .EGFP可以用作盐藻遗传转化的报告基因使单细胞真核生物盐藻可以利用流式细胞术 (FACS)等技术进行筛选 ,从而避开平板筛选转基因盐藻的限制 ,并使转基因盐藻实现无抗生素筛选成为可能     

广州地区肺炎克雷伯菌对常用抗生素耐药性调查

目的：了解广州地区肺炎克雷伯菌的耐药情况。指导临床合理用药。方法：对广州地区12家医院1998年-2001年从临床分离的869株肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法,严格按照美国NCCLS制定的标准进行药敏试验,结果：四年来非ESBＬ的肺炎克雷伯菌对β－内酰胺类抗生素耐药率有逐步上升趋势,产ＥＳＢＬ菌株阳性率分别是43.1%,42.7%,31.6%和36.5%,耐药率最低仍是亚胺培南。结论：本地区肺炎克雷伯菌产ESBL阳性率较高,应重视ESBL的检测和药物敏感性试验。     

Smad7和Ki-67在新疆维吾尔族宫颈鳞癌中的表达及相关性研究

目的:分析新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌组织中Smad7和Ki-67表达及相关性。方法:采用免疫组化SP法检测宫颈炎组织88例(汉族42例,维吾尔族46例)以及宫颈鳞癌组织120例(汉族50例,维吾尔族70例)中Smad7、Ki-67蛋白的表达。结果:Smad7、Ki-67蛋白在宫颈鳞癌中的阳性表达率(78.3%、76.7%)均分别显著高于宫颈炎组织(15.9%、23.9%),差异有统计学意义(P0.05);维吾尔族妇女宫颈鳞癌中Smad7的阳性表达率(87.1%)显著高于汉族(66%)(P0.05)。维吾尔族宫颈鳞癌患者中Smad7、Ki-67的阳性表达率呈显著正相关性(x2=1.93,r=0.138,P0.05)。结论:宫颈鳞癌组织中Smad7、Ki-67蛋白的阳性表达率显著高于宫颈炎组织,宫颈鳞癌中Smad7蛋白的表达存在民族差异,Smad7、Ki-67等多种蛋白的联合检测可能会间接提高新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌诊断的准确度和精确度。     

L-阿拉伯糖对B型和Q型烟粉虱刺探的影响——膜饲喂评价技术的优化

本文以观察人工饲料膜上刺孔直径及数量评价L-阿拉伯糖对B型和Q型烟粉虱刺探及取食行为为例,用人工饲喂的方法,从饲料的最佳蔗糖浓度、L-阿拉伯糖最佳添加浓度、实验最佳实验时间3个方面对膜喂饲评价技术进行优化,为刺吸式昆虫取食行为的基础研究提供简单可行的方法。结果表明:15%蔗糖最适合烟粉虱的饲喂实验,5%L-阿拉伯糖是合适的添加浓度,12 h是检查效果的最佳时间;取食添加5%L-阿拉伯糖的饲料后,B型烟粉虱在人工饲料囊上的刺探所形成的的大孔、中孔及小孔的数量均显著低于对照,而Q型烟粉虱刺探所形成的的大孔、中孔及小孔数量均显著高于对照。即L-阿拉伯糖抑制了B型烟粉虱的刺探和取食行为,却提高了Q型烟粉虱的刺探和取食行为,因此,5%L-阿拉伯糖对两种生物型烟粉虱可能存在不同作用机制。以15%蔗糖的液体人工饲料膜上的刺孔直径及数量来评价生物活性物质对烟粉虱取食行为影响效果的方法是可行的。     

滨海盐地碱蓬不同生长阶段叶片C、N、P化学计量特征

盐地碱蓬(Suaeda salsa)是滨海湿地典型植被之一, 研究其化学计量特征变化对于了解滨海湿地植被健康状况具有重要意义。该文比较了盐地碱蓬生长期、成熟期和衰退期内叶片C、N、P营养元素的化学计量特征, 并做了相关性分析。结果表明, 叶片C含量在不同生长阶段差异性显著, 生长期最低, 衰退期最高; 叶片N含量在衰退期较生长期和成熟期显著降低; 叶片P含量较为稳定, 在不同生长阶段无显著性差异。C:N、C:P在植物整个生长发育期内呈现逐渐增大的趋势, 而N:P表现出逐渐减小的趋势。相关性分析显示, 在盐地碱蓬3个不同的生长阶段, C:N和C:P与相应的N、P含量呈显著负相关, 随着N、P的变化以对数方程的形式减小; N含量与P含量之间呈显著正相关, 体现了植物体内两营养元素含量需求变化的相对一致性。同时发现, N元素已经成为滨海湿地盐地碱蓬生长发育过程中的主要限制性因子。     

非流体介质中多环芳烃污染的微生物固定化修复技术

非流体介质中多环芳烃(PAHs)污染的修复是目前环境工作者所面临的艰巨而紧迫的任务.由于非流体介质环境的特殊性,常规修复方法难以高效地发挥作用,传统微生物修复技术采用的游离微生物也存在许多弊端.而微生物固定化能大幅度地提高参加反应的微生物浓度,避免优势菌受土著菌的恶性竞争,增强微生物的耐环境冲击性.微生物固定化技术在一定程度上克服了传统工艺的不足,因而广泛应用于流体介质(废水等)和半流体介质(泥浆等)环境污染的修复.在概述固定化微生物技术的特点和分析国内外研究进展的基础上,指出将该技术应用于非流体介质中PAHs污染的原位修复领域的可行性,并论述了需要解决的关键科学问题,提出了利用微生物固定化技术修复非流体介质中PAHs污染的未来研究课题.     

枯林湾浮游桡足类生态研究

2000年7月至2001年7月的周年调查结果表明,粤东柘林湾浮游桡足类29属57种,其中,强额拟哲水蚤Para-ca;amis crassorpstris和短角长腹剑水蚤Ootjpma brevicomis为优势种,合计占浮游桡足类总个体数的66.7%.柘林湾是一个浮游桡足类相对丰富的海湾,年均总个体数达5.4×103ind.@m-3.浮游桡足类的种类数和总个体数均表现为湾外大于湾内的平面分布格局,周年变化基本上为单峰型,高峰期位于5～10月,最低谷位于冬季1月.