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31.
刘德康李蕾陈霞唐超李建民 《现代生物医学进展》2012,12(11):2005-2009
目的:研究Ppp5c及TTC16基因的TPR(tetratricopeptide repeat)结构域短片段和Hsp70及Hsp90家族蛋白的相互做用,及其过表达对细胞周期的影响。方法:通过生物信息学的分析及PCR的方法,克隆Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域以及HSPA1A、HSP90AA1的全长基因,并连入酵母双杂交载体,通过ClonTech的酵母双杂交实验体系研究蛋白和蛋白之间的相互作用。把Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域克隆入真核表达载体,构架稳定表达Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域的MCF-7细胞系,并通过流式细胞实验观察细胞周期。结果:Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域能与HSPA1A或HSP90AA1发生相互作用。Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域在MCF-7中的过表达能严重影响细胞周期,引起细胞凋亡和S期阻滞。结论:本实验初步揭示了不同蛋白的TPR结构域在与Hsp70及Hsp90蛋白的相互作用性质的异同点以及其过表达对细胞周期的影响,为全面理解TPR结构域的功能、Ppp5c以及TTC16蛋白在细胞内的功能奠定了前期实验基础。 相似文献
32.
目的:阐明NDRG2(N-Myc downstream-regulated gene 2)在乳腺癌细胞中对CD24的调控及其对乳腺癌细胞粘附能力的影响。方法:RT-PCR和Western blot方法检测乳腺癌细胞MCF-7及Bcap-37中NDRG2和CD24的表达;通过腺病毒上调MCF-7细胞中NDRG2的表达,或利用siRNA下调Bcap-37细胞中NDRG2的表达,检测CD24基因和蛋白的变化。粘附实验检测改变NDRG2表达水平后对MCF-7及Bcap-37细胞粘附能力的影响。结果:MCF-7细胞中NDRG2基因和蛋白的表达水平低于Bcap-37细胞,而CD24的表达水平高于Bcap-37细胞;在MCF-7细胞中通过腺病毒载体上调NDRG2可以抑制CD24的表达并抑制其粘附能力,而在Bcap-37细胞中利用siRNA下调NDRG2的表达可以提高CD24的水平及细胞的粘附能力;结论:NDRG2通过影响CD24参与调控乳腺癌细胞的粘附能力。 相似文献
33.
甘蓝型油菜中一类AP2/ERF转录因子的克隆和生物信息学分析 总被引:2,自引:0,他引:2
AP2/ERF转录因子家族是植物中广泛存在的一类转录因子,AP2/ERF这类转录因子主要参与植物的细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因的表达调控。由于拟南芥和油菜同属于芸薹属,具有相似的基因信息,利用油菜UniGene数据库,以拟南芥ERF转录因子保守序列为探针,通过电子克隆从一个UniGene Cluster中分离得到三个同类的AP2/ERF转录因子,从cDNA序列、氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性分析、序列比对、进化树、功能域、二级结构、三级结构、无序化特性进行了预测和较为全面的分析。结果显示油菜来源的BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3属于AP2/ERF转录因子的B-2亚族,是亲水性蛋白,在蛋白质的三级结构上与AtERF1相似。蛋白质无序化分析发现,油菜BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3无序化程度小于拟南芥AtERF1。设计引物通过PCR和RT-PCR方法分别从甘蓝型双低油菜沪油15幼苗的DNA和cDNA中扩增了上述基因,初步分析BnaERF2没有内含子,BnaERF1和BnaERF3有内含子。另外,通过EST丰度分析显示,该类转录因子的表达最高峰在种子中,其次为花,在芽、茎和分生组织中没有检测出表达的存在。 相似文献
34.
记述了中国腺水螨科Lebertiidae腺水螨属Lebertia腺水螨亚属Pilolebertia两新种拟刷毛腺水螨Lebertia(Pilole-bertia)pseudociliata sp.nov.和蓖齿毛腺水螨Lebertia( Pilolebertia)pectinata sp.nov.前者体壁具细致刻纹,E1具2毛状表皮突,P-Ⅱ腹毛长以及EpⅣ侧缘弧形等特征将之与其他种明显区分开;后者体壁具细致刻纹和具缘毛的P-Ⅱ腹毛可以将之与其他种类明显区分.文中对其腺毛和眼毛的体位特征做了详细描述. 相似文献
35.
玉米种质资源抗弯孢菌叶斑病特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
针对近年弯孢菌叶斑病日益严重的发生趋势,对1698份玉米种质(自交系、群体、杂交种以及特殊材料)进行了抗弯孢菌叶斑病鉴定。结果表明,中国玉米种质抗性较引进种质抗性好;不同省份所供种质抗性存在差异,北京、四川、广西种质总体抗性较好;在新选育的自交系中,鉴定出12份高抗材料;在当前培育的杂交种中,有22份高抗或抗弯孢菌叶斑病;玉米对弯孢菌叶斑病抗性在相同核基因、不同细胞质种质间无差异;玉米抗大斑病基因对抗弯孢菌叶斑病无效。 相似文献
36.
用B超活体取卵技术(TVFA)对莫累灰和婆罗门杂交肉取卵,探讨年龄和FSH诱导对青年牛,经产牛及老年牛卵泡和卵母细胞发育的影响。结果显示:青年牛(12月龄)和经产牛(7-8岁)平均卵泡数(≥2mm)及>10mm卵泡数明显高于老年牛(≥14岁)(P<0.01)。青年牛和经产牛平均卵母细胞数及平均COC数高于老年牛(P<0.05)。1和2级卵母细胞比例青年牛高于或等于经产牛高于老年牛,3和4级卵母细胞比例老年牛高于经产牛高于或等于青年牛(P<0.05)。青年牛和经产牛2级卵母细胞占优势,而老年牛3级卵母细胞居多。不同剂量外源性FSH诱导后,经产牛和老年牛平均卵泡数在各剂量组之间没有显著差异(P>0.05);但≥6mm卵泡数及2级卵母细胞比例明显增加,而2-5mm卵泡数相应减少及裸卵和老化卵比例降低(P<0.05)。在10次取卵过程中,青年牛和经产牛发情当天平均卵母细胞数均以后各次的数量低(P<0.05)。研究表明:利用TVFA可从肉牛获取卵母细胞,卵泡及卵母细胞发育受年龄的影响,这可能与生理状况有关;而适量FSH秀导可以促进牛卵泡发育,提高卵母细胞质量。 相似文献
37.
38.
清洁能源行动—环保新举措 总被引:3,自引:1,他引:2
清洁能源行动作为环境保护策略的重要一环,涉及到污染物的“全程”控制和预防,具有现实性和可行性。 相似文献
39.
以意大利生菜(Lactuca sativa L.var.ramosa Hort.)为试材,农杆菌LBA4404叶盘法转化子叶,通过植物组织培养技术,筛选获得再生体系最佳选择压为Kan 50 mg/L,最佳抑菌剂为Carb 400 mg/L,生菜子叶抗性愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂条件为6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.15 mg/L或6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L,其中在6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基上诱生的抗性愈伤组织后续生芽效果较好。根据GenBank序列,优化设计合成适合植物表达的肠道病毒71型(Human enterovirus 71,EV71)C4亚型P1和3CD基因,运用基因重组技术,同时克隆入植物表达载体pCAMBIA2301,构建共表达植物表达载体pCAMBIA2301-P1-3CD。以农杆菌介导的叶盘法转化意大利生菜子叶,对叶片PCR阳性的抗性株进行蛋白质表达检测,Western-blot实验表明,两株抗性株叶片中表达出具有生物学活性的EV71抗原蛋白质,证明了利用生菜表达EV71抗原的可行性,为利用植物生物反应器生产抗EV71口服疫苗提供了理论和实验依据。 相似文献
40.