褪黑素参与苯并(a)芘诱导的孕早期卵巢功能异常

该研究探讨了孕早期苯并芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]暴露对卵巢雌激素和孕激素的影响及其可能的机制。将SPF级健康成年雌雄昆明小鼠交配合笼,次晨查得阴栓则记为孕第1天(D1)。孕鼠随机分为对照组(n=60)和B(a)P组(n=60),每日称重后以0.1 m L/10 g动物体重分别灌胃给予玉米油和0.2 mg/(kg·d)浓度B(a)P。ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)方法检测孕D4小鼠血清雌激素(estrogen,E2)、孕激素(progesterone,P4)和褪黑素水平;q RT-PCR检测孕D1~D4小鼠卵巢组织雌孕激素合成限速酶17β-HSD1(17β-hydroxysteroid dehydrogenase 1)和P450SCC(cholesterol side-chain cleavage enzyme)m RNA水平;Western blot和免疫组化法分别检测卵巢组织褪黑素受体MT1(melatonin receptor 1)、MT2(melatonin receptor 2)蛋白质水平。研究结果发现,与对照组相比,B(a)P暴露导致孕早期小鼠血清中E2、P4明显降低;同时,卵巢雌孕激素合成限速酶17β-HSD1和P450SCC m RNA水平下调(P0.05)。B(a)P组小鼠血清中褪黑素水平明显增高(P0.01),而卵巢黄体细胞MT1、MT2蛋白质水平下降(P0.05)。综上所述,褪黑素及其受体可能参与了B(a)P诱导的孕早期卵巢功能异常。     

亚抑菌浓度头孢他啶对大肠埃希菌生物膜形成的影响与其耐药性相关性研究

目的:探讨亚抑菌浓度头孢他啶对大肠埃希菌生物膜形成的影响与细菌耐药性、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)产生及ESBLs基因分型的相关性,为临床生物膜感染的治疗和抗生素的合理使用提供理论依据。方法:大肠埃希菌最低抑菌浓度(MIC)检测采用琼脂平板倍比稀释法,超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)表型确证实验采用双纸片协同法,大肠埃希菌ESBLs基因检测采用PCR扩增,生物膜形成能力检测采用96孔板结晶紫染色法。结果:50株大肠埃希菌临床株对青霉素类、氟喹诺酮类、头孢哌酮及复方新诺明具有较高的耐药性,而对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦敏感性较高。所有菌株均对碳青霉烯类抗菌药物敏感。31株大肠埃希菌为ESBLs阳性菌株。CTX-M、TEM、OXA、SHV和VEB基因阳性率分别为93.5%、83.9%、19.4%、16.1%和3.2%。亚-MIC头孢他啶对9株(18.0%)大肠埃希菌生物膜形成具有抑制作用。亚-MIC头孢他啶对大肠埃希菌生物膜形成的影响与细菌耐药性和ESBLs均无相关性(P0.05)。结论:亚-MIC头孢他啶对大肠埃希菌生物膜形成的调控作用与细菌耐药性、产ESBLs及ESBLs基因分型均无相关性。     

冠心病强化标准化药物治疗最新进展

冠状动脉粥样硬化性心脏病的患病人数呈逐年上升趋势,目前治疗冠心病的方法主要包括改善生活方式,药物治疗,经皮冠状动脉介入治疗(PCI)和外科冠状动脉旁路移植手术治疗(CABG)。虽然介入治疗在治疗阻塞性冠心病取得了显著的进展,但因支架再狭窄,晚期血栓形成,及未知的机制,其死亡率未见明显下降。冠状动脉旁路移植手术虽可降低死亡率,但因其为侵入性操作及手术费用的较高成本,不能为大部分患者接受。近几年来进行了一些全球多中心的临床试验研究,以评估不同诊疗方案对冠心病的预后及远期疗效。目前一些研究表明强化标准化药物治疗(optimal medical therapy,OMT)可与再血管化治疗同效。本文将针对冠心病强化标准化药物治疗方面的实验研究进展进行简要综述。     

雌激素通过LRP16基因5′侧翼GC富含区上调其转录的分子机制

LRP16是一个明确的雌激素(E2)反应性靶基因,已往研究在LRP16基因上游调控区鉴定了一个E2反应性1/2ERE/GC富含的ERα作用位点（-676 bp到-214 bp;命名为A区）.为进一步鉴定雌激素上调LRP16基因表达的最大化反应区域,对LRP16基因上游调控区进行缺失突变,通过相对荧光素酶活性分析观察到LRP16基因的一段5′近端侧翼序列（-213 bp到-24 bp;命名为B区）具有明显的E2反应性.通过与A区比较,认为B区最大化的呈递了E2对LRP16基因的转激活效应.序列分析表明,B区缺乏经典的ERE元件,而包含多个富含GC序列.针对Sp1的siRNA实验结果提示,Sp1参与了E2对该区域的转激活.针对GC富含区进一步的缺失突变,及荧光素酶活性分析,识别了一段30 bp（-213 bp到-184 bp）的序列在B区呈递E2反应活性中发挥核心作用.超级凝胶电泳实验结果表明,Sp1蛋白与这段30 bp的DNA序列在体外存在直接结合作用.染色质免疫共沉淀实验结果证实,ERα、Sp1与B区存在E2依赖性相互作用.本文在LRP16的5′侧翼区识别了一段最大化呈递E2活性的DNA片段.机制研究表明,在E2存在条件下,ERα通过Sp1与该区域的直接作用上调LRP16基因的表达.     

一次性力竭运动对大鼠PHB1表达及线粒体功能的影响

目的：观察一次性力竭运动后大鼠脑、心、骨骼肌组织和线粒体中PHB1含量的变化及对大鼠线粒体功能的影响,探寻PHB1与线粒体功能和能量代谢的关系。方法：健康雄性SD大鼠40只,随机分为2组（n=20）：对照组和一次性力竭运动组,大鼠进行一次性急性跑台运动建立力竭运动模型。收集各组大鼠的心、脑和骨骼肌组织样品并提取线粒体,检测其呼吸功能和ROS的变化。用Western blot方法检测组织和线粒体中PHB1蛋白表达水平;用分光光度计检测各器官中ATP含量以及线粒体中复合体V活性（ATP合酶活性）。结果：①一次性力竭运动后脑、心肌、骨骼肌中ATP含量显著性降低;②一次性力竭运动后脑、心肌、骨骼肌线粒体中复合体V活性、RCR、ROS显著性降低,ST4均显著性升高,ST3无显著性差异。③一次性力竭运动后心、脑、骨骼肌线粒体中PHB1的表达显著性减少。④通过相关性分析得出：一次性力竭运动后心、脑、骨骼肌中ATP含量与心、脑、骨骼肌中复合体V活性呈正相关;心、脑、骨骼肌中ATP含量和心、脑骨骼肌中PHB1的表达呈正相关。结论：一次性力竭运动后,降低线粒体氧化磷酸化功能,使大鼠脑、骨骼肌线粒体内ROS生成增加,PHB1的表达、ATP含量和复合体V活性均下降。一次性力竭运动使得大鼠线粒体内PHB1表达降低,线粒体功能减弱,机体能量代谢降低。     

土壤真菌 Aspergillus fumigatus固体发酵产物的化学成分及抗氧化活性研究

为研究来源于哀牢山国家级自然保护区河谷的土壤真菌Aspergillus fumigatus固体发酵产物的化学成分及抗氧化活性研究,采用正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析和Sephadex LH-20分离纯化,借助核磁共振波谱等方法鉴定化合物结构,从中共得到13个化合物,分别鉴定为rubrofusarin B(1)、rubrofusarin A(2)、carbonarone A(3)、aspernigrin A(4)、flavasperone(5)、(22 E,24 R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(6)、(22 E,24 R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,9(11),22-三烯-3β-醇(7)、ourosperone A(8)、(22 E,24 R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(9)、stigmast-1,5-dien-3β-ol(10)、fonsecinones A(11)、asperpyrone C(12)、asperpyrones B(13)。其中,化合物1~5和7~13为从该菌种中首次分离。抗氧化活性结果显示,化合物8对DPPH(IC₅₀=3.453 mg/mL)、ABTS+(IC₅₀=0.155 mg/mL)、OH(IC₅₀=0.019 mg/mL)自由基都有一定的清除效果。     

FHL2通过相互作用抑制分化抑制蛋白家族成员的转录抑制活性

目的：探讨FHL2与Id（分化抑制蛋白）家族蛋白之间的相互作用及FHL2对Id蛋白功能的调控效应。方法：用GST-pulldown与免疫共沉淀（CoIP）方法检测FHL2与Id家族蛋白成员之间在体内外的相互作用;用共转染与报告基因驱动的萤光素酶方法检测FHL2对Id蛋白介导转录抑制效应的调控作用。结果：FHL2与Id家族的4个蛋白均存在直接的相互作用关系,表位分析结果显示FHL2蛋白中的第2个LIM结构域在FHL2/Id相互作用中是必需的,Id蛋白N端结构域在介导FHL2/Id相互作用中是必需的,FHL2/Id相互作用不依赖于Id蛋白中的螺旋-环-螺旋结构;通过相互作用,FHL2阻止了Id蛋白对碱性螺旋-环-螺旋转录因子E47转录活性的抑制作用。结论：FHL2是一个新识别的Id蛋白广谱的相互作用因子,通过对Id蛋白功能活性的抑制效应,FHL2可能参与Id介导的多种生物学效应以及肿瘤发生与进展。     

CDFI在儿童过敏性紫癜致急性双下肢静脉瓣膜功能不全中的应用

目的:探讨CDFI在儿童过敏性紫癜至下肢静脉瓣膜功能不全中的应用,以提高临床认识。方法:对经临床诊断过敏性紫癜引发下肢静脉瓣膜功能不全5例患儿图像资料给以回顾、归纳总结。结果:5例患儿下肢深静脉表现血液流速稍减慢,CDFI呈节阶段性红蓝相间血流,频谱多普勒呈节段性基线上下血流频谱。结论:CDFI为儿童急性过敏性紫癜致急性双下肢静脉瓣膜功能不全,提供了早期、无创和具有高敏感性、特异性的检查方法,对临床的诊治有重要价值。     

磷酸二酯酶5在小鼠卵巢内的表达

目的探讨cGMP特异性结合的磷酸二酯酶5（PDE5）在小鼠卵巢内的定位和表达情况。方法应用免疫组织化学对小鼠卵巢切片进行染色,检测PDE5在卵巢内不同部位的表达情况。利用Western blot检测PDE5在小鼠不同组织和细胞内的表达情况。结果PDE5在小鼠卵巢的黄体细胞（CL）和卵泡膜细胞（TC）上有强表达,卵母细胞（Oos）上以及大有腔卵泡的卵丘细胞（CCs）也有表达,而在小卵泡的颗粒细胞上没有表达。结论揭示了PDE5在小鼠卵巢内的表达情况,为进一步研究PDE5对卵巢功能的调节提供了生理学基础。