苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基cry3A在鳞翅目特异菌株中的表达及杀虫特性

将对鞘翅目昆虫有特异毒性的苏云金芽孢杆菌cry3A基因电转化到只对鳞翅目昆虫有毒性的苏云金芽孢杆菌野生型菌株YBT803-1中,获得转化了BMBY-001。SDS-PAGE分析及镜检结果表明,cry3A基因可在该菌株中高效表达,但出发菌株中原有的cry1Ab、cry1Ac及cry2的表达则受到不同程度的影响。生物测定结果显示,转化子BMBY-001对柳蓝叶甲(鞘翅目)具有较高毒力,LC50为0.413μL／mL(浸叶法),对小菜蛾(鳞翅目)的毒力比野生受体菌YBT803-1有所降低,LC50值为3.319μL／mL。     

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因cry3A在鳞翅目特异菌株中的？…

将对鞘翅目昆虫有特异毒性的苏云芽孢杆菌ｃｒｙ３Ａ基因电转化到只对鳞翅目昆虫有毒性的苏云金芽孢杆菌野隆型菌株ＹＢＴ８０３－１中,获得转了ＢＭＢＹ－００１。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析及镜检结果表明,ｃｒｙ３Ａ基因可在该菌株中高效表达,但出发菌株中原有的ｃｙｒ１Ａｂ、ｃｒｙ１Ａｃ及ｃｒｙ２的表达则受到不同程度的影响。生物测定结果显示,转子ＢＭＢＹ－００１对柳蓝叶甲（鞘翅目）具有较高毒力,ＬＣ５０为０．４１３μ     

利用烟草表达人凝血IX因子 (hFIX)的研究

血友病B是凝血IX因子（hFIX）缺乏所导致的一种出血性疾病,通过输血和hFIX浓缩剂进行治疗疗效显著,但存在治疗费用高和安全隐患,因而获得安全、廉价的人凝血IX因子对血友病B治疗具有重要意义。植物系统表达外源蛋白在生产成本和安全性方面具有优势。为此,本研究构建含人凝血IX因子基因（hFIX,2.8kb）植物双元表达载体p35s-2300：：gus：：noster,用农杆菌介导法转化烟草 "百日红",通过PCR和Southern blot分析证实获得4株独立转基因植株, hFIX在转基因烟草基因组中的拷贝数为1-4个;RT-PCR和ELISA检测结果表明,hFIX在转录和翻译水平已成功表达,hFIX在转基因烟草叶片中的表达量为2.5~8.8ng/g·FW,并具有免疫活性。本研究为利用植物系统表达hFIX的后续研究作了必要准备,也为利用植物系统表达其他药用蛋白研究提供了一些理论和实验参考。     

硫丹对斑马鱼的毒性效应

硫丹是一种有机氯杀虫剂,广泛应用于谷物、蔬菜、水果、茶叶等害虫的防治.然而,在杀灭害虫、提高农业产量的同时,硫丹对水生生物的生存构成威胁.为了丰富水生生物毒理学资料,评价硫丹对水生生物健康生长的风险,本文采用传统毒理学方法,在室内静态环境条件下,研究了硫丹对斑马鱼(Dardo rerio)的毒性效应.结果显示24 h、48 h、72 h、96 h半数致死浓度(LG50)分别为4.24 μg/L、2.49 μg/L、1.77μg/L、1.62 μg/L.在亚慢性实验条件下,硫丹对肝和脑组织中的超氧化物歧化酶及乙酰胆碱酯酶有显著影响.硫丹对斑马鱼超氧化物歧化酶活性具有促进效应,在0.17～0.74μg/L范围内对乙酰胆碱酯酶具有抑制效应.     

Newleaf-YTM转基因马铃薯PCR检测鉴定方法的建立

建立了商业化种植的NewLeaf-Y^tm转基因马铃薯的筛选检测和鉴定的PCR方法。该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果,同时扩增FMV35启动子基因225bp片段和PVY-CP基因161bp片段,PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40s,55℃60s,72℃60s,35次循环;之后72℃延伸5 min。本实验中的F-PRIMER(pvy01-5)/r-primer(PVY01-3)引物是针对商业化种植的NewLeaf-y^tm转基因马铃薯PV-CP抗病毒基因而设计的,具有很强的特异性,可以达到对NewLeaf-Y^tm转基因马铃薯鉴定的目的。     

家蚕超长链脂肪酸延长酶基因Bmelo424的克隆及功能分析

超长链脂肪酸延长酶家族基因影响生物体的多种生理功能。文中克隆了家蚕的一个该家族成员Bmelo424基因,其ORF为558 bp。该基因的蛋白序列预测有4个跨膜结构域,并有6个丝氨酸磷酸化位点、8个苏氨酸磷酸化位点和4个酪氨酸磷酸化位点,其亚细胞定位于内质网中,二级结构分析结果显示其α-螺旋和β-折叠股分别占26.7%和20%。荧光定量PCR结果显示Bmelo424基因在家蚕各组织均有表达,尤其在头部表达量最高。通过在酿酒酵母中异源表达Bmelo424基因的方法研究其对脂肪酸延伸的作用,GC-MS结果表明,携带pYES2-Bmelo424重组质粒的酿酒酵母的C16:1n-7脂肪酸含量有显著提高,而C16:0、C18:0和C18:1n-9的含量下降。温度胁迫结果显示,Bmelo424基因能够提高酿酒酵母的低温适应能力,但却降低其高温适应能力。这为探究家蚕Bmelo424基因的功能提供了参考。     

日本血吸虫童虫体表超微结构动态观察

本文报告日本血吸虫皮肤型、肺型、肝门型童虫的体被用扫描电镜观察其超微结构的变化,其目的在于寻求日本血吸虫童虫的体被在实验动物体内变化的规律,提供血吸虫病在免疫学上和预防化学药物上的研究参考。其图版Ⅰ—Ⅲ的1—4为日本血吸虫尾蚴,5—7为0．5小时龄皮肤型童虫,8—13为10日龄肺型童虫,14—22为15日龄肝门型雄性童虫。     

怎样判别组成雌蕊的心皮数目

在多年的植物学教学实践过程中 ,发现学生在书写植物花程式时 ,感到最困难 ,最容易出错的地方就是对组成雌蕊的基本单位——心皮数目的判别上。为此 ,笔者经过不断探索 ,总结出一套较为有效的判别组成雌蕊的心皮数目的方法。具体作法如下 :1　确定雌蕊的类型在 1朵花中 ,依据雌蕊的数目及组成每个雌蕊的心皮数目的多少 ,将雌蕊分为单雌蕊、离生单雌蕊和复雌蕊等 3种类型。1)在具体观察 1朵花时 ,如花中有两个或两个以上雌蕊时 ,该雌蕊类型为离生单雌蕊 ;如花中只有 1个雌蕊时 ,则要判断该雌蕊是属于单雌蕊还是复雌蕊。2 )如在 1朵花中只有 1…     

一株保存的波瓦生病毒全基因组序列测定及分析

目的：对保存的WJBC株波瓦生病毒进行全基因组序列测定和分析,阐明其与已报道毒株之间的关系。方法：将波瓦生病毒基因组编码区分11段进行RT－PCR扩增,扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化并连接pGEM－Teasy载体后转化大肠杆菌DH5ct感受态细胞,挑取阳性克隆鉴定后进行测序,用DNAstar软件将测序结果拼接得到全基因组序列。下载波瓦生病毒全基因组核苷酸序列,利用MEGA5．0软件构建系统进化发生树。结果与结论：WJBC株波瓦生病毒全基因组共11839nt,编码3415个氨基酸残基,病毒基因组5’端和3’端分别有111、483nt的非编码区;进化树结果显示,WJBC株波瓦生病毒与LB株波瓦生病毒的亲缘性最高,可能为同一病毒株．．