农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料,用带有质粒pGBIL04（Pactin-Bt-Tnos）的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织,共培养3天后,在含PPT的培养基上连续筛选培养3代,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体,结果还发现将共培养温度降到22℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。 Abstract:Excellent inbred-lines of maize,340 and 4112,which were used largely in hybridized combination were transformed with Agrobacterium tumefaciens.The immature embryos and their original calli were infected by A.tumefaciens LBA4404 containing plasmid pGBIL04.After 3 days of co-cultivation,the immature embryos and calli were continuously selected on the medium containing phosphinothricin (PPT) for 3 generations,then plants were regenerated.It was proved by PCR analysis that the target Bt gene had been integrated into the genome of regenerated plants.The results showed that fresh original calli from the immature embryos after pre-culture were suitable acceptors.The results also showed that it could increase the frequency of selection by properly lowering the co-culture temperature to 22℃.     

温度胁迫下杂交水稻花粉形成期间穗叶膜脂脂肪酸含量和细胞透性的变化

针对杂交水稻花粉形成时期，温度胁迫常造成花粉发育不良，影响开花结实，空机粒增多造成减产的生产实际，进行了本项研究，以期对温度胁迫水稻的机理有所认识。水稻（Oryzasativa）杂交稻汕优桂99的种子（来自湘潭市种子公司），经漂洗、浸种、消毒及催芽后，于5月15日播种在高25cm、直径30cm，盛满水稻上的陶瓷钵中。每钵留苗10株，施基肥NH4NO3和K2HPO4各1g，6月1日又追施（NH4）2SO4和K2HPO4各1g，置于网室中生长。花粉形成时期取幼穗和稳下1～3叶片，用湿滤纸包裹后放在工℃（低温）、39C（高温）和32C（室温，对照）下处理2d…     

日本血吸虫循环抗原成分的分析

血吸虫宿主体内存在着多种成分组成的抗原谱。既往研究较多的,在电泳中出现于阳极端的多糖抗原只是其中之一,它定位于血吸虫成虫肠上皮细胞,Deelder等证明受染小鼠尿液中的三种循环抗原均为虫源性,其中两种为不耐热和不溶于三氯醋酸的未知成分。目前许多学者用三氯醋酸提取的循环抗原免疫动物,仅能查出循环抗原中的一种,这可能是过去检查循环抗原方法敏感性不高所致。究竟宿主体内有几种循环抗原及其组分,各自的理化特性和免疫源性如何?作者在Nash(1974),Houba(1976),杨士静(1981)等对多糖抗原研究的基础上,对活虫、活卵进入宿主血循环的…     

叶际微生物诱发气孔免疫的机制及其应用前景北大核心CSCD

植物叶际微生物通过自身代谢活动影响植物功能的正常运行。而植物则可感应叶际微生物的存在,在诱发气孔免疫关闭以抵御病原菌入侵的同时,也降低了植物蒸腾作用,提高了其水分利用效率。对气孔免疫相关理论的研究有利于开发新型生物抗蒸腾剂,并对开发节水农业新技术具有重要意义。该文综述了叶际微生物与植物间的互作关系、气孔免疫及其免疫机制等方面的研究进展,并探讨了相关机制在节水农业方面的应用前景和重点研究方向。     

硒肥在地方特色生物资源中的应用研究进展

硒是人类健康所必需的微量元素,现有硒肥利用的报道主要集中于对传统的粮食和经济作物开展人工施加硒肥。对地方特色水果、蔬菜、药食同源植物为代表的地方特色生物资源施用硒肥进行富硒化利用研究报道较少。为逐渐满足缺硒和低硒地区居民补硒的需求,科学开展优势特色生物资源利用,本文综述了这方面的研究进展,并展望了未来特色生物资源人工补硒的前景和发展方向。     

原子荧光和电感耦合等离子体质谱法在硒形态分析中的应用

硒是人体必需的微量元素之一,具有抗肿瘤、防衰老、防辐射和增强机体免疫力等多种功能。近年来,随着人们生活水平的不断提高,各种各样的富硒产品及富硒保健品走进了我们的生活,硒的形态测定越来越受到人们广泛的关注。本文对目前主要检测硒形态的两种方法—原子荧光法(AFS)和电感耦合等离子质体谱法(ICP-MS)在食品、水果蔬菜、富硒保健品、生物样品等方面的应用进行了综述。     

高效液相色谱-串联质谱检测基因组DNA甲基化方法的建立

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)检测基因组DNA甲基化水平的方法。方法:以5-mdC和dG为标准品,采用全自动高效液相色谱系统进行分离,串联电喷雾质谱检测,选择多反应监测模式(MRM)测定标准品,绘制标准工作曲线。结果:在MRM模式下选取5-mdC(m/z 241.9→126.3)和dG(m/z 268.1→152.3)分别作为定量检测的母子离子对,各化合物能实现良好的基线分离;5-mdC和dG碰撞能均为15 eV,去簇电压分别为40和45 V,最低定量限分别为1.65和2.47 fmol;标准品的响应值比为90%~110%;5-mdC含量的天内相对标准偏差和天间相对标准偏差均小于8%。结论:HPLC-ESI-MS/MS是能应用于检测基因组DNA甲基化的一种高通量、高准确率、高分辨率、高灵敏度且重复性好的方法。     

RAGE与阿尔茨海默病关系的研究进展

阿尔茨海默病属于神经系统退行性疾病,该类疾病给社会和家庭带来了沉重的负担,且目前尚无一疗效突破性药物,已经成为一个严重的社会问题和经济问题。Aβ是阿尔茨海默病的重要发病机制之一,通过多种途径介导神经损伤,其中与细胞表面的结合位点结合而引发的病理损害成为当今的前沿认识。一方面,它们可以使Aβ聚集,造成细胞膜的直接损伤;另一方面,它们可以以受体的形式,参与细胞内的信号传导;另外,还可以激活细胞内吞作用,通过溶酶体途径造成细胞损伤。关于与Aβ结合的细胞表面结合位点,晚期糖基化终末产物受体备受瞩目。它是一种多功能受体,属于细胞表面免疫球蛋白家族成员,在神经元、小胶质细胞以及血管内皮细胞上都有表达,Aβ是它的配体之一。研究已证实,它与Aβ相互作用,通过激活细胞内不同的信号通路,对阿尔茨海默病的发生发展发挥重要作用。随着对它的不断深入研究,有望在防治退行性疾病方面产生新的治疗策略与措施。     

转基因细胞片复合PLGA支架修复兔软骨缺损的研究

细胞片技术是应用组织工程方法使培养细胞从培养表面分离而形成含有细胞外基质的一层完整片状结构,弥补了传统组织工程技术的不足,是获取种子细胞以及对种子细胞进行转移的一项新技术。为探讨体外生长分化因子-5(GDF5)基因转染修饰的BMSCs细胞片与GDF5转基因BMSCs负载的PLGA支架形成的共聚物修复兔甲状软骨缺损的效果,实验通过腺病毒转染GDF5基因至四代兔BMSCs,温度敏感性培养皿制备GDF5转基因细胞片并与负载有转染GDF5基因BMSCs的PLGA支架复合,移植至同种兔甲状软骨缺损处,分别于术后4、8周行大体观察和组织学检测其修复效果。实验分3组:(A)转基因细胞片包裹负载有转基因BMSCs的PLGA支架组;(B)负载有转基因BMSCs的PLGA支架组;(C)负载BMSCs的PLGA支架组。结果显示,体外成功收获了完整的GDF5转基因细胞片,Real time PCR检测到GDF5 mRNA的表达,行大体组织的II型胶原免疫组化和阿利新蓝染色显示:A组和B组均表达II型胶原和糖胺聚糖(GAG),但A组表达高于B组,有统计学意义(P0.05)。由此可得,转基因细胞片包裹负载转基因BMSCs PLGA支架较传统转基因BMSCs负载PLGA支架方法具有更加优越的成软骨能力,能更有效地促进软骨缺损的修复。