HP-20树脂分离与纯化荷叶黄酮的技术研究

荷叶黄酮是荷叶中的主要活性成分之一,主要为黄酮醇和黄酮苷类,成为现代健康产品研究开发的热点。试验以高含量的荷叶黄酮为样品,比较X-5、HP-20,NKA、AB-8及HPD-100几种大孔吸附树脂的吸附效果,结果显示HP-20分离效果最好,静态饱和吸附量可达68.90 mg/g树脂,解吸率达87.23%,动态饱和吸附7 mg/mL的荷叶黄酮的料液可达15 BV。系统优化了HP-20树脂柱分离纯化用70%的乙醇提取的荷叶醇提物,得到荷叶黄酮的分离纯化的技术参数。结果表明:上样浓度为200 mg/mL,流速为2 BV/h的洗脱速度时,40%的乙醇对荷叶黄酮的洗脱能力较强,经过一次分离黄酮含量可达62.06%,此梯度黄酮的得率可达81.40%,荷叶黄酮的总得率为98.17%,经过再分离,荷叶黄酮含量可提高到98.87%。     

RNA病毒翻译调控元件—内部核糖体进入位点(IRES)

真核生物大多数蛋白质合成采用了依赖帽子结构的翻译起始方式.但一组缺乏帽子构的RNA病毒的蛋白质合成起始是依赖其5′端非翻译区（untranslated region,UTR）翻译调控的顺式作用元件——内部核糖体进入位点（internal ribosome entry site, IRES）.它 们能够在一些反式作用因子的辅助下,招募核糖体小亚基到病毒mRNA的翻译起始位点.前,依赖IRES元件翻译起始的RNA病毒在哺乳动物,无脊椎动物及植物中均有发现.因此,对RNA病毒IRES元件的深入研究,不仅有助于阐明相关疾病的发生机理,而且为工业应用和疾病治疗提供借鉴意义.本文对RNA病毒IRES元件发现、分类、结构与功能等作了综述.     

基于Snake模型的医学图像分割

基于Snake模型的图像分割技术是近年来图像处理领域的研究热点之一。Snake模型承载上层先验知识并融合了图像的底层特征,针对医学图像的特殊性,能有效地应用于医学图像的分割中。本文对各种基于Snake模型的改进算法和进化模型进行了研究,并重点梳理了最新的研究成果,以利于把握基于Snake模型的医学图像分割方法的脉络和发展方向。     

额外的错配碱基提高T4 DNA连接酶等位特异性连接（英文）

连接是一种主要的DNA处理过程。由于较低的商业成本以及核酸底物识别的灵活性,T4DNA连接酶被广泛应用于生物分子工程,特别是特定核酸序列的等位特异性连接检测。本文评估了在T4 DNA连接酶介导的连接反应中,引入额外的错配碱基对所产生的影响。设计了超过150组DNA/DNA或DNA/RNA带有的额外错配碱基对的组合。结果发现,引入额外的错配碱基对后,T4 DNA连接酶在DNA/DNA连接中特异性可提高60倍以上,而在DNA/RNA连接中特异性只能提高2倍。在等位特异性连接中,有的错配碱基对可使T4 DNA连接酶的特异性提高600多倍。     

以P型职PRSV-VPg为模板多位点突变获得W型PRSV-VPg的研究

以P型PRSV-VPg(Papaya Ringspot Virus,VPg gene)基因为模板利用高保真酶通过两对引物(突变4个位点),PCR扩增获得一条276 bp和一条141 bp的两个小片段.以此为基础,利用长引物延伸和套叠PCR的方法,定点突变剩余5个位点,最后拼接获得W型PRSV-VPg基因.结果表明通过上述方案可以成功改造P型PRSV-VPg基因,获得与W型朋PRSV-VPg同源的目的基因,成功率为100%.该技术可以绕开传统的通过寻找毒源进行RT-PCR方法和人工合成方法获得病毒基因,其技术操作简单,且节约时间和成本,并在人工合成基因、多位点基因定点突变等方面具有很好的借鉴作用和应用价值.     

植物内生真菌在医药开发上的应用研究及展望

本文主要概述了植物内生真菌及其生理活性物质研究的最新进展,而今,它们在医药领域的应用越来越受到人们的关注,植物内生真菌是新的天然药物的重要源泉,在新药开发上具有广阔的发展前景。     

双歧杆菌抗体制备方法的探讨

本文对双歧杆菌抗体的制备方法进行了探讨,并建立了检测双歧杆菌抗体的ＥＬＩＳＡ方法。结果表明,采用完整菌体、粉碎菌体、脂磷壁酸粗提物,获得的抗体效价均很低。先用活的卡介苗对动物进行多克隆刺激,再用活的双歧杆菌加福氏不完全佐剂获得的双歧杆菌抗体效价达１：２５６０,该抗体对双歧杆菌属的菌种能起免疫反应,与所试的其它种属细菌无交叉反应。此外,将免疫过双歧杆菌的小鼠用福氏不完全佐剂和ＳＰ２／Ｏ骨髓瘤细胞诱生腹水,从腹水中测得双歧杆菌抗体效价为１：１０００。此过程类似于单克隆抗体的生产过程,可用于制备大量的双歧杆菌多克隆抗体。     

余甘子中抗坏血酸的差示分光光度测定法

本文采用差示分光光度法测定了余甘子果实中的抗坏血酸,方法简便、快速、重现性好、样品(?)试剂用量少,结果与药典的方法吻合。测定结果表明,四川省凉山地区的余甘子果实(?)抗坏血酸含量在0.88～2.4mg/g之间。     

6σ 质量管理方法在临床化学检测性能评价中的应用

目的:应用六西格玛(6σ)质量管理方法分析临床生化检验项目质量控制数据,评价其分析性能,设计生化检验项目的质量控制方法并指导其质量改进。方法:收集2010年度临床生化检验项目室内质量控制及室间质量评价的数据,按照美国临床实验室改进修正法案允许总误差(TEa)标准,采用公式值=[TEa%-偏倚(bias%)]/变异系数(CV%),计算检验项目的σ值,绘制标准化6σ性能决定图,评价检验项目分析性能,设计质量控制方案,计算检验项目的质量目标指(QGI),查找导致性能不佳的主要原因,提出优先改进方法。结果:临床生化检验项目中,常规生化和干式生化的检验项目达到6西格玛水平分别占66.6%和58.4%,达到5～6西格玛水平分别占4.8%和8.3%,达到4～5西格玛水平分别占4.8%和8.3%,4.达到3～4西格玛水平分别占4.8%和16.7%,在3西格玛水平以下分别占19%和8.3%,全部检验项目的平均σ值分别为9.33和6.95。在12个6σ值<6的检验项目中有50%要优先改进精密度,25%需要优先改进准确度,其余则两者都要改进。结论:6σ质量管理方法可以有效地应用于临床化学检测性能评价,设计个性化的质量控制方案可更有效地控制质量,有助于不断提高临床实验室生化检验项目质量水平。     

新奇的《中国古象群展》

在观众的心目中,大象是一种雄伟和圣洁的动物。只要提到它,人们就会想到生活在我国云南西双版纳密林中的亚洲象和生活在非洲稀树草原的非洲象。殊不知,在地质历史上多种多样的古象曾经遍布于大洋洲以外的所有大陆。象类自距今约５０００万年前在非洲北部发源后,相当成功地演化为一个兴旺发达的大家族。根据已发现的化石材料,科学家们推测,至少有４００多种形态各异的古象曾在地球上生存过。在我国,古象的足迹也几乎遍及全国。或许,有人不相信这是事实,但新近北京自然博物馆推出的大型化石骨架专题展览──《历史上的长鼻子──中国…