强啡肽对脊髓原生型与诱生型一氧化氮合成酶活性、分布和基因表达的影响及机制

蛛网膜下腔注射（ｉ．ｔ．）强啡肽Ａ１－１７（Ｄｙｎ）引起剂量依赖性后肢和尾部瘫痪及甩尾甩足抑制。脊髓背角（侧）ＮＭＤＡ受体和ＮＯＳ／ＮＯ功能活性下降可能与Ｄｙｎ镇痛作用有关,脊髓腹角（侧）ＮＭＤＡ受体－Ｃａ２＋－ＮＯＳ／ＮＯ通路过度激活及ｃ－ｆｏｓ高表达可能与Ｄｙｎ致脊髓损伤（ＳＣＩ）作用有关。在Ｄｙｎ致ＳＣＩ机制中,过量ＮＯ（细胞水平）具有神经毒性作用,脑源性ＮＯＳ主要在早期,诱生型ＮＯＳ主要在后期起作用,而内皮细胞源性ＮＯＳ和适量ＮＯ（血管水平）可能具有保护作用。在原代培养脊髓神经元中,高浓度Ｄｙｎ可通过ＮＭＤＡ受体和κ受体直接引起细胞内Ｃａ２＋超负荷,低浓度Ｄｙｎ只通过κ受体抑制高钾刺激性Ｃａ２＋内流     

穿刺芽孢杆菌菌剂研制及其对根结线虫的防治

穿刺芽孢杆菌(Bacillus penetrans),国外又称穿刺巴斯德氐柄菌(Pasteuria penetrans),是根结线虫(Meloidogyne spp.)等多种植物寄生线虫的专性寄生菌。作者在我国发现穿刺芽孢杆菌,为了开发利用这种细菌,研制出了每克含3.1×10~8个孢子的菌剂,并就该菌剂对根结线虫的防治效果进行了研究,现将结果报道如下。     

类风湿性关节炎风寒湿痹与风湿热痹动物模型的病理研究

在大鼠胶原诱导性关节炎（ＣＩＡ）的诱导阶段,给予风寒湿、风湿热刺激（实验Ⅰ）或同时给予葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）外涂（实验Ⅱ）,第３１天取踝关节标本作组织切片观察,结果显示,滑膜细胞增生与关节炎症积分呈显著正相关;单纯风湿热显著加重雌性鼠关节软骨侵袭程度,且有加重滑膜内炎症细胞浸润及血管增生的趋势;风寒湿与ＳＥＢ外涂协同作用有加重雄性鼠的炎症细胞侵润及血管增生趋势。上述结果支持雌性鼠风湿热ＣＩＡ及雄性鼠风寒湿ＣＩＡ加ＳＥＢ分别作为类风湿性关节炎中医风湿热痹及风寒湿痹模型     

六种多食性昆虫食性的比较观察

根据苏联的先进科学理论,每种动物有机体都有其一定的食物种类,但是生存条件可以影响到它的习惯,如食物不丰裕时,可以迫使植物食性的昆虫缩减或改变食料植物的范围。在后—种情况下,并可以大多数个体死亡的代价来换取了以其不常利用的植物为其营养,于是新的食物专门化便产生了。为了将这个先进理论应用到我国实际的     

miR-26a修饰的人牙周膜干细胞成骨分化能力的研究

目的:研究人牙周膜干细胞(hPDLSCs)在转染miR-26a后成骨分化的促进效果。方法:从因正畸拔除的无龋坏、无牙周疾病离体牙的牙根中部牙周膜组织中分离、胶原酶消化,进行人牙周膜干细胞的体外培养。使用脂质体2000进行miRNA转染,采用激光共聚焦观察转染效果;MTT方法检测转染后的细胞活力;成骨诱导后使用实时定量PCR技术检测miRNA修饰的hPDLSCs成骨分化相关基因的表达;采用BCIP/NBT、天狼星红、茜素红S分别对碱性磷酸酶、胶原以及钙化进行染色观察。结果:采用脂质体2000能够成功转染hPDLSCs,且转染效率较高;转染后的细胞活力有所下降,但仍在80%以上;转染后的细胞在经成骨诱导分化过程中骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)基因表达显著上调,同时碱性磷酸酶活性、胶原分泌以及钙化能力均得到显著提升。结论:miR-26a可以用于修饰hPDLSCs以提高其成骨分化能力。     

CCK39/UreB双基因融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

本研究报道了猪源性胆囊收缩素39肽(Cholecystokinin 39, CCK39)和猪肠道大肠菌群脲酶B亚基(UreaseB, UreB)融合的原核表达载体的构建, 以及兼有CCK39和UreB功能活性域的融合蛋白的表达。利用RT-PCR从猪十二指肠总RNA中克隆CCK39, 再通过PCR从猪肠道产脲酶大肠菌群质粒中克隆UreB, 之后将扩增所得的两基因先后定向插入原核表达载体pET43a(+)中, 构建双基因融合表达载体pET43a(+)/CCK39/UreB, 并转化至大肠杆菌(Escherichia coli) BL-21(DE3)中。重组质粒pET43a(+)/CCK39/UreB经PCR、双酶切鉴定和序列分析, 证实已成功构建双基因融合表达载体。重组表达菌经isopropylthio-b-D-galactoside (IPTG)诱导表达了分子量约为80 kD的融合蛋白, 与预期分子量相同, 主要以可溶蛋白的形式存在于细胞质中; 用Ni2+-NTA对可溶蛋白进行亲和纯化, 纯度大于95%; Western blotting分析结果显示重组融合蛋白可分别为CCK8和UreB抗血清识别, 具有良好的反应原性。本研究所表达的融合蛋白为研制抗CCK/Urease双效疫苗奠定了基础。     

PER1对人肝癌细胞BEL-7402辐射敏感性的影响

本文通过X射线照射SMMC-7721、BEL-7402和HepG2三种肝癌细胞后,以克隆形成试验检测其存活分数,结果显示在梯度剂量X射线0、2、4、6、8、10 Gy照射下SMMC-7721、BEL-7402、HepG2三种细胞克隆存活分数逐渐下降,其中SMMC-7721在三种肝癌细胞系中对辐射最敏感,BEL-7402辐射抗性在三种肝癌细胞系中最高。Western blot检测发现PER1在SMMC-7721中的表达水平明显显著高于BEL-7402和HepG2(P<0.05)。过表达PER1蛋白以后,BEL-7402接受5 Gy X射线照射后凋亡明显增多,同时,western blot和RT-qPCR试验结果发现,X射线照射过表达PER1的BEL-7402细胞,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低,凋亡执行蛋白Caspase-3断裂明显增多。研究结果表明PER1蛋白的高水平表达可以促进X射线诱导的凋亡,增强肝癌细胞的辐射敏感性。     

益生菌对维持性血液透析慢性肾脏病患者肠道菌群失调的影响

目的探究益生菌对维持性血液透析慢性肾脏病患者肠道菌群失调的影响,为此类患者的治疗提供参考。方法选取2017年4月到2019年4月我院收治的78例维持性血液透析慢性肾病患者,按照随机数字法分为观察组和对照组各39例。对照组患者给予常规治疗,观察组患者给予常规治疗联合益生菌。检测两组患者肠道菌群变化,同时检测血清炎性因子(IL6、TNFα、CRP)、肠道屏障功能(D乳酸、内毒素)及肾功能指标[肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)]水平。结果治疗后两组患者Scr、BUN水平均下降(均P<0.05),观察组与对照组比较有减少趋势,但差异无统计学意义(均P>0.05)。治疗后两组患者肠道双歧杆菌、乳杆菌数量均增加,大肠埃希菌、肠球菌数量均下降,且观察组患者改善情况优于对照组,差异有统计学意义(t=4.226、9.634、6.157、2.739,P<0.001、<0.001、<0.001、=0.008)。治疗后两组患者D乳酸、内毒素水平均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(t=2.856、3.125,P=0.007、0.003)。治疗后两组患者血清IL6、TNFα、CRP水平均下降,且观察组下降幅度更大,差异具有统计学意义(t=3.124、4.025、8.024,P=0.007、<0.001、<0.001)。结论益生菌对维持性血液透析慢性肾脏病患者肠道菌群失衡、肠道屏障功能和微炎症状态均具有改善作用,可为该类患者临床治疗提供一定参考。