RNA干扰技术及其在细胞周期研究中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNA i)是由双链RNA(doub le-stranded RNA,dsRNA)引发的转录后基因沉默(posttran-scridptional gene silenc ing,PTGS)。dsRNA经D icer酶降解成21-23nt的siRNA,并以其为模板,特定位点、特定间隔降解与之序列相应的mRNA。随着RNA i机制的深入研究与广泛应用,目前该技术已经普遍应用于细胞周期研究中,在阐明各种调控机制的同时也为基因治疗提供了新靶点。     

水稻矮缩病毒昆明分离物抗血清制备及免疫捕捉PCR检测

由水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)引起的水稻矮缩病害,最早由日本报道,随后在东南亚等国以及我国的福建、云南等南方稻区普遍发生,云南主要发生于中部及南部地区[1]。水稻在苗期至分蘖期感病后,植株矮缩,分蘖增多,叶片浓绿,僵直,出现白斑,生长后期病稻不能抽穗结实,在暴发流行年份可以引起水稻的严重减产。RDV在分类上属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)植物呼肠孤病毒属(Phytoreovirus)成员,病毒粒子为正十二面体球形结构,直径约为69.3nm,无刺突,无脂蛋白外膜包被,具有双层的蛋白衣壳[2]。病毒基因组由12条双链RNA片段组成,其中S8编…     

酸性成纤维细胞生长因子的生物学特性及临床应用展望

酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)是成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors,FGFs)家族成员之一。因aFGF特殊的结构赋予其在创伤修复、糖脂代谢、血管再生、骨骼修复和神经生长等方面的生物活性及卓越的临床应用价值。从aFGF结构特征、生物功能、临床应用进展及其新型递送系统4个方面对aFGF研究进行深入总结。     

基因编码3-氯酪氨酸改造荧光蛋白

蛋白质翻译后修饰产生的3-氯酪氨酸 (3-Cl-Tyr)与多种疾病相关,包括帕金森病、哮喘、动脉粥样硬化等． 在动脉粥样硬化患者中发现AopA1 192位酪氨酸有高水平的氯化, 显示此种修饰可能会促进病变．为了研究酪氨酸氯代对蛋白质功能的调控作用,我们发展了将3-Cl-Tyr定点特异插入到蛋白质中的方法． 因为3-Cl-Tyr酚羟基上的质子比酪氨酸(Tyr)更容易解离,具有更低的pKa,在绿色荧光蛋白GFP及其突变体,以及光转化荧光蛋白mEOS2荧光活性中心中分别用3-Cl-Tyr取代Tyr,使得GFP发色基团的pKa降低到4.7,并且具有与EGFP相似的量子产率,使mEOS2 发色基团的pKa降低到4.2.这样使得荧光蛋白的发色基团在酸性条件下仍然能以去质子化形式存在,在500 nm以上仍然具有较强吸收,避免了用400 nm左右激光激发及其对细胞及细胞器造成的光损伤．这种新型的荧光蛋白突变体将适用于溶酶体、吞噬酶体等酸性细胞器．     

吸烟对健康人群唾液微生物组的影响

【背景】吸烟是重要的公共健康问题,可能通过改变唾液微生物组影响口腔健康甚至全身健康。【目的】探究吸烟对中国健康人群唾液微生物组的影响,为研究吸烟在疾病发展中的作用提供线索。【方法】收集167位健康个体的唾液样本,利用HiSeq高通量测序技术对样品中16S rRNA基因V3-V4区进行测序,分析比较吸烟者和非吸烟者的唾液微生物组的多样性、群落结构和物种丰度,并预测功能组成,探究吸烟对唾液微生物组的影响。【结果】吸烟对唾液微生物组的α多样性影响较小,但是在微生物组组成上,吸烟组中奈瑟菌属、艾肯菌属、二氧化碳嗜纤维属等细菌明显减少,而普雷沃氏菌属、韦荣氏球菌属、放线菌属、奇异菌属和巨球型菌属等细菌明显增加。在功能上,PICRUSt的预测结果显示吸烟组富集不依赖氧气的代谢功能,非吸烟组富集需要氧气参与的代谢功能。【结论】吸烟可能会通过改变唾液微生物组,造成微生物组功能途径的变化,进而引发与吸烟相关的疾病。     

反硝化除磷戈登氏菌属的富集及其菌剂制备

【背景】投加微生物菌剂是强化生物处理效能的重要手段,反硝化是污水脱氮除磷的关键步骤,但目前对于反硝化微生物菌剂相关的研究报道较少。【目的】驯化高效反硝化聚磷菌菌剂,并对系统进行生物强化。【方法】采用两阶段法快速富集反硝化聚磷菌,筛选高效脱氮除磷功能菌株NC1-1并进行鉴定,以NC1-1为菌种来源制备干粉菌剂,研究菌剂强化A²SBR系统污水处理效果。【结果】历经36 d后反硝化聚磷菌富集成功,菌株NC1-1经鉴定属于戈登氏菌属,其脱氮除磷率分别为89.46%和91.68%。麦麸、玉米粉配比为85%:15%、NC1-1投菌量为20 mL、发酵液用量20 mL的条件下成功制得干粉菌剂,干粉菌剂最佳投加量为10%的A²SBR系统总磷（total phosphorus,TP）和NO₃^--N去除率比未投加菌剂的A²SBR系统提高12.06%和11.52%。【结论】菌剂NC1-1的投加使A²SBR系统的污染物去除效能进一步提高,研究结果为进一步研究反硝化聚磷菌菌剂提供了...     

厌氧真菌纤维降解酶及其应用潜力的研究进展

反刍动物的瘤胃是已知的纤维降解能力最强的天然发酵罐,其发酵粗纤维的能力很大程度上依赖于其中栖息的各类微生物的功能。厌氧真菌作为瘤胃内的一类低丰度菌群,最先定殖到宿主动物摄入的纤维质饲料上,并通过分泌大量高效的碳水化合物活性酶降解粗纤维。然而,由于缺乏足够的基因组信息和有效的厌氧真菌遗传操作系统,目前国内外对厌氧真菌分泌的纤维降解酶及其降解机制的研究进展有限。本文对厌氧真菌的分类及已发表的基因组信息进行概述,介绍了各类纤维降解酶及纤维小体的组成结构和催化机制特点,并对纤维降解酶在生物质能、饲料处理、纺织造纸及食品加工等方面的应用进行总结。研究厌氧真菌纤维降解酶的作用特性,将有助于完善其在瘤胃环境中有效竞争资源并降解粗纤维的知识体系,也将进一步了解其生物技术应用潜力,为工业生产中应用酶制剂提供新思路。     

快速连续测定乙肝病毒DNA酶解大片段的顺序

 用“剪切重组”术及内引物法测定了克隆在M_(13)mp_8载体中的HBVDNA 1.3Kb片段的完整顺序,简化了操作过程,为连续测定大段DNA的顺序提供了简单、快速、有效的途径。     

乙型肝炎病毒adr亚型NC-1毒株表面抗原基因的顺序测定与结构研究

用内引物法自pHBVNC-1质粒DNA经Sau3A1降解的1.3Kb片段中,快速、连续测定了HBV adr NC-1表面抗原基因全顺序,与其它三株adr亚型S基因比较,顺序同源性为99％,与adw及ayw亚型比较,同源性为94％。不同亚型间的错义突变比同一亚型不同毒株间的错义突变多。比较11株adr亚型、2抹adw亚型与2株ayw亚型的S基因全顺序,发现在第47,110,113,126,160位的密码子在r亚型中有同源性,在w亚型中也有同源性,所以是w/r亚型决定簇的候选部位。第46,68,134,159,168位的密码子在d亚型中有同源性,而在y亚型中也有同源性,所以是d/y亚型抗原决定簇的候选部位。     

艾司美拉唑治疗胃溃疡患者成本效果的影响因素分析

目的:分析艾司美拉唑治疗胃溃疡患者成本效果的影响因素。方法:回顾性分析2014年9月-2018年1月我院诊治的胃溃疡患者220例的临床病例资料,根据治疗药物的不同分为观察组120例与对照组100例,对照组给予奥美拉唑+克拉霉素+阿莫西林治疗,观察组给予艾司美拉唑+克拉霉素+阿莫西林,两组均持续治疗观察2周,对比两组治疗成本、治疗效果、不良反应的发生情况和成本效果,以及影响艾司美拉唑治疗胃溃疡患者成本效果的因素。结果:观察组与对照组患者完成治疗周期的成本费用分别为567.14±48.23元、551.49±45.61元,两组比较差异无统计学意义(P0.05)。观察组与对照组的治疗总有效率分别为95.83%(115/120)和82.00%(82/100),观察组显著高于对照组(P0.05)。观察组与对照组治疗期间的腹胀、便秘、恶心、口腔异味等不良反应发生率为8.33%(10/120)和11.00%(11/100),对比差异无统计学意义(P0.05)。观察组C/E与ΔC/E值均显著低于对照组(P0.05)。多因素logistic回归分析显示病程、溃疡直径、不良反应为影响艾司美拉唑治疗胃溃疡成本效果的主要因素(P0.05)。结论:艾司美拉唑治疗胃溃疡患者成本效果好,且不会增加不良反应的发生,病程、溃疡直径、不良反应为影响成本效果的主要因素。