CRISPR/Cas9介导的LATS1/2敲除抑制卵巢癌细胞ES-2增殖

Hippo信号通路在哺乳动物肝脏发育、动态平衡、再生和疾病中发挥非常重要的作用。大肿瘤抑制基因1/2（large tumor suppressor 1/2, LATS1/2）激酶是Hippo信号通路的关键激酶,可以磷酸化YES相关蛋白（yes-associated protein,YAP）,从而调节YAP的核质定位和降解。本文采用CRISPR/Cas9方法构建慢病毒介导的Last1/2基因敲除的载体,通过包装、感染和嘌呤霉素筛选,获得LATS1/2部分敲除的人卵巢癌ES-2和H08910细胞,免疫印迹方法检测LATS1/2表达明显减少。细胞增殖实验检测LATS1/2缺失明显抑制ES-2和HO8910细胞增殖。软琼脂克隆形成实验表明,LATS1/2缺失抑制卵巢癌ES-2细胞的克隆形成能力。细胞划痕和Transwell实验证明,LATS1/2缺失明显抑制卵巢癌ES-2细胞迁移。流式细胞检测发现,LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞凋亡并影响细胞周期。裸鼠成瘤实验表明,LATS1/2缺失明显抑制体内肿瘤组织增殖。分子机制研究表明, LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞中胶原I型α1（collagen type I α1,ColIα1）基因表达量增加,在卵巢癌ES-2细胞中同时敲除LATS1/2和COL1A1,可以促进细胞克隆形成。综上结果,人卵巢癌ES-2细胞中LATS1/2缺失能促进COL1A1表达增加, 从而抑制细胞增殖、转移和克隆形成,并影响细胞周期和促进细胞凋亡。     

顺铂和噪声联合作用对听觉器官的影响

研究了顺铂与噪声联合作用对耳蜗的毒性,发现联合作用后听阈偏移大于单独顺铂作用后阈移和单独噪声作用后阈移的总和。此外,联合作用后听觉脑干诱发电位振幅下降非常明显。结果表明,顺铂与噪声联合作用对内耳的毒性有协同作用。     

榆梨绵蚜一些型与卵的新发现和记述（同翅目：蚜总科：瘿绵蚜科）

对榆梨绵蚜Ｅｒｉｏｓｏｍａ ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｍ ｄｉｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｍ Ｚｈａｎｇ,１９８０的干母,无翅干雌,有翅干雌,无翅侨蚜,有翅性母,雌,雄性蚜放卵进行了描述,除有翅干雌外,其余各型与卵均为首镒记述。所有研究用标本均保存在中国科学院动物研究所昆虫标本馆内。     

油茶脱水素样蛋白的基因克隆与序列分析及其生理功能预测

以油茶EST文库为基础,采用5-′RACE技术,分离克隆了一个脱水素样基因的全长cDNA序列(GenBank接受号EU856537),同源分析表明其编码的208 aa的小分子蛋白(id号ACF72673)属于SK2型脱水素,命名为CoDHN2.CoDHN2的肽链内2个类K-片段间富含苏氨酸,有别于脱水素一般性结构特点,并且同油茶种子中另一类脱水素一样也具有一个十分保守的基序(EDDGQAGRRKK),这可能有利于脱水素的磷酸化和亚细胞定位;采用多种方法预测其二级结构,表明CoDHN2为内在性无规则蛋白,但其中远离C端的一个类K-片段可形成两亲性α-螺旋.CoDHN2含有较多的组氨酸残基以及良好的可溶性,推测它可结合金属离子从而减少活性氧的来源并清除活性氧,并在生理脱水时充当缓冲液.结合其它物种脱水素的研究进展,认为CoDHN2极有可能在油茶油脂合成高峰期同正在发育的脂体结合而保护脂体免受活性氧危害,这为油茶种子细胞的脂体发育研究提出了一个新的方向.     

超级杂交水稻TIR1类似基因cDNA的克隆与生物信息学分析

生长素受体TIR1通过形成SCFT。刚复合体与生长素直接结合,即为Aux／IAA在26S蛋白酶体降解过程中的关键蛋白质。在Blast检索和生物信息学分析的基础上设计特异引物,以超级杂交水稻（Oryza sativa）亲本株1S为材料,通过RT-PCR扩增并经T-A克隆后测序,获得一条长度为2219bp的序列,其开放阅读框长度为1764bp,编码含587个氨基酸残基的肽链。该序列经生物信息学分析发现,其与拟南芥TIR1相似性为77％,同样具有2个保守的结构域,即F—box和亮氨酸富集重复区域（LRR）,且都不具有跨膜结构域和信号肽。该cDNA序列命名为OsTIR1。     

柑橘全爪螨空间格局与抽样技术的研究

本应用空间分布型统计参数IwaoM-X模型中α,β及6个聚集指标分析了柑橘全爪螨的空间格局,并对抽样技术进行了探讨。结果表明,柑橘全爪螨的空间格局为聚集型;田间的抽样部位是上、中、下三部的叶片。提出了估算柑橘全爪螨在不同虫口密度下的理论抽样数。     

几种离子及有机物对蜡样芽胞杆菌蛋白酶活力的影响

研究不同浓度的金属离子及有机物对蜡样芽胞杆菌蛋白酶活力的影响,结果表明①五种无机离子中Mg     

农村学生营养改善措施的成本—效益分析：校园奶牛养殖

目的：分析校园奶牛养殖的成本 效益,评估其在农村学生营养改善中的作用,探讨农村学校开展校园奶牛养殖的可行性和可持续性,为农村学校选择适宜的营养改善措施提供科学依据。方法：使用问卷调查收集校园奶牛养殖的成本、牛奶产量和收益;通过与校长访谈,了解开展校园奶牛养殖的总体情况;实地考察学校食堂和奶牛养殖场地,分析学生就餐情况以及在奶牛养殖项目中的受益情况。结果：校园奶牛养殖为盈利项目。通过校园奶牛养殖提供牛奶的方式,提供10g蛋白质的成本为0.6元,低于直接购买牛奶的成本（2.1元）。一头奶牛每学年的产奶量（6 205kg）能给93名学生补充一学年的优质蛋白质（10g/人/d）。满足一所中等规模学校（400人）学生一学年的优质蛋白质需要量（25g/人/d）,每学年需要养殖11头奶牛。结论：校园奶牛养殖是获得优质动物蛋白质成本较低的方式,在无法购买市售奶类、并在提高管理技能和食品安全意识的情况下,可将校园养殖奶牛作为学生饮用奶类来源之一。     

螟长距茧峰,玉米螟与春玉米间相互关系的初步研究

研究表明,螟长距茧蜂发生主高峰期比玉米螟成虫高峰期大约推迟６－９天,与春玉米抽雄期相一致。玉米抽雄开花时绝大部分玉米螟幼虫处在易被螟长距茧蜂寄生的Ⅲ、Ⅳ龄。玉米开花后雄穗的形态结构和营养成分发生改变,致使幼虫下垂转移寻找更适宜的食物。螟长距茧蜂被取食玉米雄穗的玉米螟幼虫所吸引,其寄生与玉米螟幼虫的发育和玉米生育期密切相关。