杆状病毒生态学研究进展

杆状病毒是一类寄生于鳞翅目、膜翅目和双翅目昆虫及其它节肢动物的病原体,是具有囊膜的双链环状DNA病毒。目前至少已从600多种昆虫中发现有杆状病毒的感染,其中一部分能够引起宿主种群不同程度的流行病。杆状病毒在分类上独立为杆状病毒科,其典型的结构特征是病毒粒子包埋于蛋     

热胁迫下月季叶片蛋白双向电泳分析

采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和肽质量指纹谱,对耐热性不同的月季品种热激处理后进行蛋白质组分析与鉴定。双向电泳后,差异蛋白质点主要集中在分子量10-30kDa、等电点5～6范围内,对耐热品种在高温下特异表达的蛋白质点中选取3个进行肽质量指纹谱的分析,并检索不同的数据库进行蛋白质鉴定与功能预测,初步认为这些蛋白质点分别是eIF-SA、LEA蛋白和Hsp17．5。同时结合已报道其他植物中这3种蛋白的功能,对月季耐高温生理机制进行初步探讨。     

多聚甲醛固定对荧光蛋白分子间FRET效率的影响

目的：研究多聚甲醛固定对利用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)检测细胞中蛋白质相互作用的影响,解决运动能力较强的细胞中FRET效率检测的问题。方法：选用两个已知能够相互作用的蛋白分子TRA和TRB,将荧光蛋白ECFP和EYFP的编码基因通过融合PCR分别标记在其C端;将两个融合基因共转染靶细胞,一组细胞经低浓度（0.5%）多聚甲醛短时（0.5~1h）固定,另一组不固定,利用激光共聚焦扫描显微镜检测两个融合蛋白之间的FRET效率,比较其在两组细胞之间的差异情况。结果：经过统计学分析,在活细胞和经低浓度多聚甲醛短时间固定的细胞中,ECFP与EYFP之间的FRET效率没有显著差异。结论：低浓度短时间的多聚甲醛固定对于荧光蛋白分子之间的相互作用没有显著的影响,因此对于运动能力过强的细胞可以固定后再进行FRET检测。     

人白细胞介素11的定点聚乙二醇修饰

利用人白细胞介素11（hIL-11）无半胱氨酸（Cys）残基这一特点,通过定点突变将一个Cys残基引入hIL-11的N末端。然后,利用与Cys 巯基特异性反应的mPEG-马来酰亚胺将mPEG偶联到预先选定的位点,经层析纯化得到hIL-11的定点PEG修饰物。利用依赖型细胞株7TD1测定其生物学活性,结果表明,其体外生物学活性保持原有hIL-11活性的30%左右。定点聚乙二醇修饰方法为定向改造hIL-11,提高其药效的应用研究打下基础。     

有花植物的有性生殖

花是有花植物（被子植物）的有性生殖器官。在雄蕊的花药中产生雄配子体,通常称花粉;在雌蕊子房内的胚珠中发育雌配子体,通常称胚囊。在花粉或花粉管中形成的一对精细胞分别与胚囊中的卵和中央细胞受精,由此产生胚和胚乳。随着胚和胚乳的发育,整个胚珠发育为种子。这是被子植物有性生殖的一般过程。     

近12年下呼吸道感染病原菌变迁及耐药性分析

目的:了解1996-2007年湘雅医院呼吸科下呼吸道感染住院患者病原茵变迁及耐药性情况.方法:对呼吸病房下呼吸道感染住院患者痰菌(或支纤镜吸取分泌物)培养阳性标本结果进行回顾性统计分析.结果:分离出细菌2966株,其中革兰阴性杆菌占86.9%,病原菌主要为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、副流感嗜血杆菌、大肠埃希菌和流感嗜血杆菌;革兰阳性球菌占13.1%,主要病原菌为金葡菌和肺炎链球菌.近四年革兰阴性杆菌有所增加,而革兰阳性球菌有所减少.革兰阴性杆菌中,副流感嗜血杆菌和流感嗜血杆菌的比例明显升高;革兰阳性球菌中,金黄色葡萄球茵比例降低、肺炎链球菌比例升高.药敏试验结果提示主要革兰阴性杆菌对美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星均较敏感.铜绿假单胞菌还对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南敏感性高,对头孢曲松、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟耐药率增高.鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦敏感性较好,但耐药率有增高趋势,对头孢噻肟、头孢他啶、环丙沙星耐药率明显增高.肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对头孢哌酮、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦耐药率增高;但二者对头孢他啶仍然保持相对敏感,耐药率为25.3%和27.6%.嗜血杆菌属中,流感嗜血杆菌与副流感嗜血杆菌的敏感抗生素谱相似,均对强力霉素、壮观霉素、头孢类抗生素耐药性低,而对喹诺酮类和青霉素敏感性差.主要革兰阳性球菌对阿奇霉素、克林霉素、红霉素及青霉素耐药率均较高;二者对红霉素耐药率明显增高.其中金葡菌对万古霉素均敏感,对左氟沙星、苯唑青霉素、头孢唑啉、美洛培南、强力霉素耐药率均明显增高.肺炎链球菌还对美洛培南、左氟沙星耐药率低,耐药率无明显增高.结论:近年下呼吸道感染病原菌以革兰阴性杆菌为主;主要病原菌对大部分抗菌药物的耐药率有逐渐增高的趋势,临床应合理应用抗菌药,以延缓细菌耐药性的产生.     

炭疽灭活和裂解芽胞抗原免疫家兔后血清中的IgG抗体应答

炭疽杆菌芽胞在炭疽免疫中发挥基本作用。实验中以炭疽活芽胞疫苗为原形,建立了制备灭活和裂解炭疽芽胞的方法,研究了各种灭活和裂解炭疽芽胞疫苗不同浓度、不同剂次免疫家兔的抗芽胞和毒素IgG应答,总结分析了各种灭活和裂解炭疽芽胞疫苗用于新疫苗成分之一的可能性。甲醛灭活炭疽芽胞疫苗设芽胞浓度2.5×108剂量组、5×108剂量组、1×109剂量组,于0、4、8周时3次免疫。在3剂免疫后血清抗炭疽芽胞IgG水平持续升高,首次免疫后4、8、12周时家兔血清中抗芽胞IgG几何平均滴度可达到600～16000。裂解炭疽芽胞疫苗的制备和动物免疫中,只采取了2.5×108芽胞浓度,两剂免疫,免疫时间为0、4周。在首次免疫后4、8、12周时家兔血清中抗芽胞IgG几何平均滴度分别为362、776和388。各时间点采集的家兔血清未能测出或只测出极微量的抗炭疽毒素IgG。通过上述研究认为,以裂解炭疽芽胞抗原作为炭疽疫苗成分之一,其抗原性和免疫原性是适宜的;免疫剂量可以设定为2.5×108芽胞浓度上下;免疫次数可定为2剂间隔1个月。     

珠江口球形棕囊藻(Phaeocystis globosa)赤潮后期的浮游植物群落结构特征研究

研究小组于2009年11月30日至12月2日期间对珠江口一次球形棕囊藻(Phaeocystis globosa)赤潮后期的浮游植物群落结构特征进行了调查研究.共发现浮游植物(包括变种、变型)6门,57属,118种.其中,硅藻门26属67种,占总种数的56.77%;绿藻19属33种,占总种数的27.96%;甲藻4属6种;蓝藻4属5种:裸藻2属5种;金藻2属2种.调查期间,球形棕囊藻可视群体的直径范围为0.5～2.5 cm,密度均值为1 208 colonies·m-3,镜检的密度均值为675 000 colonies·m-3.11月中旬至月底的骤然升温是本次球形棕囊藻赤潮爆发的主要原因.赤潮期间主要伴随优势种有骨条藻(Skeletonema sp.)、颗粒直链藻(Aulacoseira granulata)、新月菱形藻(Cylindrotheca closterium),以及三星裸藻(Euglena tritella).     

小鼠β-防御素30的原核表达和纯化

目的:在原核细胞中表达小鼠β-防御素30(DEFB30),并对表达产物进行鉴定和纯化。方法:用RT-PCR方法扩增小鼠Defb30的cDNA序列,将2个拷贝的cDNA序列串联连入原核表达载体pET28(a),构建重组表达载体pET28(a)-Defb30,并将重组表达载体转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,以Western印迹分析表达产物His-DEFB30,用Ni-NTA亲和柱纯化融合蛋白。结果:构建了Defb30基因的原核表达载体,经IPTG诱导,相对分子质量约15×103的融合蛋白获得表达,Western印迹分析证实此蛋白即为目的蛋白,经Ni-NTA柱亲和纯化,获得了高纯度的融合蛋白His-DEFB30。结论:获得了在大肠杆菌中表达的DEFB30,为研究该蛋白的免疫避孕效果、抗菌活性奠定了基础。     

第二类医疗技术准入管理问题与对策研究

医疗技术准入制度越来越受到重视,我国这项工作刚刚起步,大多数研究只探讨了高风险、涉及重大伦理问题的第三类医疗技术的临床应用以及伦理问题,而未对第二类医疗技术准入问题进行探讨。第二类医疗技术准入管理刚起步,并存在评价指标的选择问题、申报数据的可靠性和真实性问题及准入后的后期跟踪管理问题等。卫生行政部门必须在认真做好医疗信息公示的前提下,采用科学的评价指标,分步骤实施医疗技术准入管理,并切实做好准入后的跟踪管理。