新疆药用植物天山雪莲及红景天内生真菌的分离与初步鉴定

本文采用常规组织块分离法及直接克隆测序的方法初步鉴定了新疆天山地区代表性的两种药用植物天山雪莲和红景天根内可培养及不可培养的内生真菌。从两种药用植物根中共分离获得34株内生真菌,除7株鉴定为镰孢菌属Fusarium外,其余菌株均具有暗色、有隔菌丝,不产生孢子;从形态上看,属典型的深色有隔内生真菌（dark septate endophyte,DSE）。采用直接克隆测序的方法,从两种植物的根中共获得143个真菌克隆子。依据核糖体内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列鉴定多数克隆子归属于柔膜菌目Helotiales及格孢腔菌目Pleosporales,与已知的DSE如背芽突霉属Cadophora、瓶头霉属Phialocephala、瓶霉属Phialophora以及Leptodontidium等有90%以上的核苷酸序列相似性。该结果显示DSE在天山雪莲和红景天根部内生真菌中占优势,暗示其可能参与了宿主植物对高寒、强辐射环境的生态适应。     

猪苓、伴生菌及蜜环菌共培养的形态学研究*

本文对猪苓、伴生菌及蜜环菌两两共培养及三者共培养进行了宏观形态观察及细胞学水平上的研究。结果表明,猪苓与伴生菌共培养时,在二者之间形成一致密拮抗线,猪苓菌落表面菌丝分化产生大量菌丝束;猪苓与蜜环菌共培养时,猪苓能阻止蜜环菌菌索对其自身的进一步侵袭,互作区中的双方菌丝及菌索均停止生长;蜜环菌与伴生菌共培养时,蜜环菌能穿透整个伴生菌菌落,在伴生菌菌落下方产生大量分枝;三者共培养后,猪苓对蜜环菌的防御能力有所下降,伴生菌对蜜环菌的耐受力有所提高,蜜环菌产生的新分枝均向伴生菌一侧生长,猪苓与伴生菌之间并不形成致密拮抗线,只可见双方菌丝的白色交融区。 猪苓与伴生菌均能在蜜环菌菌索皮层上形成侵入位点。     

灵芝原生质体制备、再生及融合的研究

报道不同菌龄、酶液浓度、稳渗剂对灵芝原生质体产率及不同种类、不同浓度的稳渗剂对原生质体再生的影响。结果表明,诱变后具抗药性标记的“中国红灵芝”菌种（mH1）原生质体制备时菌丝最适菌龄为48小时,酶液浓度为3％,稳渗剂以0．6mol／L蔗糖为佳;诱变后具抗药性标记的“韩国红灵芝”（mK1）原生质体制备时菌丝最适菌龄为40小时,酶液浓度为1％,稳渗剂为0.4mol／L甘露醇时原生质体产率最高。mH1,mK1原生质体均以蔗糖作稳渗剂再生率较高,其最佳浓度为0．6mol／L。在该条件下mH1原生质体再生率为3．20×10-2,mK1为5．40×10-2。在此基础上,以30％的PEG作为融合诱导剂进行灵芝原生质体融合,并获得了融合子,融合率为140×10-2。     

天麻种子萌发过程中与其共生真菌石斛小菇间的相互作用

天麻Ｇａｓｔｒｏｄｉａ ｅｌａｔａ种子与石斛小菇Ｍｙｃｅｎａ ｄｅｎｄｒｏｂｉｉ的共生萌发试验表明,石斛小菇可与天麻共生,促进天麻种子发芽并形成原球茎。菌丝主要分布于原球茎的柄状细胞、外皮层细胞和内皮层细胞,在外皮层细胞中形成菌丝结,内皮层细胞中的菌丝则被消化。原球茎细胞中的菌丝均被电子透明物质和原球茎细胞质膜包围而与球茎细胞质相隔离,菌丝进一步液泡化并最终被水解。含有衰败菌丝的原球茎细胞常被菌丝     

蜜环菌生物种及鉴定方法研究进展

蜜环菌属真菌是一类重要的大型真菌,在全世界范围广泛分布。该属中有些种是重要的林木病原菌,有些种则具有很高的食药用价值。由于蜜环菌属真菌形态差异并不明显,缺乏分类特征,该属的分类和鉴定一直是大型真菌的研究热点。自从生物种的概念提出之后,蜜环菌的分类鉴定取得了突破性的进展,目前全球范围内已报道的蜜环菌生物种近40种;而对蜜环菌生物种的鉴定方法则包括了最初的形态学鉴定以及近些年发展起来的分子生物学鉴定方法。本文对当前世界范围内已经鉴定的蜜环菌生物种进行了梳理,并对蜜环菌生物种的鉴定方法的研究进展进行了综述,旨在为蜜环菌的研究提供参考。     

红豆杉—内生真菌化学成分的研究

从药用植物红豆杉（Taxus chinensis(Pilg.)Rehd.）的内生真菌-粘帚霉属真菌（Gliocladium sp.简称F菌）菌丝体中分离到3个化合物,根据光谱方法确定了它们的结构。其中,（20s,22s)-4a-同-22-羟基-4-氧杂麦角甾-7,24（28）-二烯3-酮为新化合物,化合物4,8,12,16-四甲基-1,5,9,13-四氧杂环十六烷-2,6 ,10,14-四酮为首次从该属真菌中分离到,6,9-环氧麦角甾-7,22-二烯-3-羟基为首次从F菌中分离到。     

粉红粘帚霉菌丝体化学成分研究

用柱层析色谱进行分离,光谱和化学方法进行结构的鉴定,从一种明显促进花叶开唇兰Anocetochilus roxburghii(Wall.)Lindl。生长的粘帚霉属真菌－粉红粘帚霉Gliocladium roseum(Link)Bani。的菌丝体分离鉴定了1,3－二棕榈酰基－2－（4,4－二甲基庚二酸单酰基）甘油酯（1）,4,4－二甲基庚二酸（II）等4个化合物,其中,Ⅰ为新化合物,Ⅱ为首次从本属分离得到的天然产物。     

真菌在兰科植物种子萌发生长中的作用及相互关系

本文从真菌在兰科种子萌发中的应用、真菌侵染的过程、种子和根系消化真菌的途径及共生真菌的分布等方面,综述了真菌与兰科植物种子萌发及菌根关系的研究进展,讨论了该研究的有关问题及真菌在兰科种子萌发中应用的前景。     

药用真菌猪苓2种氧化应激相关基因的克隆和序列分析

摘要:【目的】克隆药用真菌猪苓NADPH氧化酶及乙二醛氧化酶基因并进行生物信息学分析。【方法】利用RACE技术取得基因cDNA全长;利用生物信息学在线工具预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征;用Bioeditor和MEGA 5.0分别对氨基酸进行多序列比对和进化关系分析。【结果】克隆到PuNOX(JX035912)及PuGLOX(JX035913)。它们cDNA全长分别为1674 bp、1723 bp;分别编码557、515个氨基酸,相对分子质量分别为63.845 kDa、55.891 kDa,等电点分别为5.58、4.82。PuNOX与真菌NADH蛋白的一致性为74% －80%,系统进化树分析结果显示猪苓PuNOX与糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)亲缘关系较近;PuGLOX与真菌乙二醛氧化酶同源性较高,均大于50%;其系统进化树分析表明猪苓PuGLOX与黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)进化上最保守。【结论】药用真菌猪苓NADPH 基因PuNOX以及乙二醛氧化酶基因PuGLOX的分子特征为进一步研究其在猪苓菌核生长发育过程中的作用奠定理论基础。     

芬娜冬菇子实体发育过程及胞外酶活性

分离并鉴定了采自北京妙峰山的1株野生大型真菌——芬娜冬菇Flammulina fennae,对该菌株进行了子实体发育过程研究,并对其最适生长条件进行了正交实验,测定并分析了菌株液体发酵及子实体生长过程中的酶活变化。结果表明:芬娜冬菇在原基期就完成了菌柄菌盖的分化;正交实验结果显示,不同氮源和p H对菌株生长影响显著,不同碳源则影响不显著;菌株液体发酵过程中未检测到过氧化氢酶和酸性木聚糖酶活性,而子实体发育过程中,漆酶、纤维素酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、酸性木聚糖酶活性较高。在原基形成期和子实体发育后期5种酶活性较高,均呈现先升后降的变化趋势,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、纤维素酶活性峰值出现在原基形成期和子实体发育后期,酸性木聚糖酶活性峰值出现在原基发育期,漆酶活性峰值出现在子实体发育后期。