中国珍稀濒危爬行动物资源——中华花龟

目的 中华花龟(Mauremys sinensis)是一种濒危野生动物,也是中国主要的养殖龟种.为了保护和可持续利用中华花龟,本文对其分类、生物学特性和资源保护现状进行总结和讨论.方法 通过研究分析文献,结合保护和养殖实践,进行系统的分析探讨.结果 中华花龟命名于1834年,现归隶龟鳖目地龟科拟水龟属,属于典型的淡水龟类,其最显著的特征是头颈部具有黑黄相间的细条纹.因其外部形态特征而得名花龟、珍珠龟和绿龟等.该龟分布广泛,见于殷商时代出头的动物遗骸之中,目前在中国分布于福建、广东、广西、香港、江苏、浙江、江西、海南岛和台湾岛,国外见于越南,并被引入韩国、美国的佛罗里达州和关岛等地.中国种群处于濒危状态,大规模的养殖和野外放归性保护行动对这一物种在海南岛的野生种群恢复奠定了基础.结论 中华花龟作为一种主要分布在中国的淡水龟,野外种群处于濒危状态.养殖技术的成熟和产业化发展,以及在海南的野外放归性保护行动能有效的促进这一资源的可持续发展.     

中南大学湘雅系统医疗对口支援工作的创新

??????? 目的 探讨大学及附属医院如何在对口支援工作中发挥更好的作用的方法。方法 回顾性分析中南大学及附属医院在国家新医改背景下对医疗对口支援工作模式和机制的创新和效果。结果 该校通过模式和机制创新,医疗对口支援工作取得良好成效。结论 大学及附属医院利用学科建设和人才培养等优势,创新性地开展医疗对口支援工作,可取得更好成效。     

妇科临床病例人乳头瘤病毒检测结果分析

目的 观察妇科临床病例人乳头状瘤病毒(HPV)感染现状,为预防宫颈癌提供参考.方法 以有性生活史的妇科病例作为检测对象;由妇产科医生采样,以反向杂交膜技术基因芯片进行HPV DNA检测;采用x2检验和趋势分析(Z)作检出率显著性检验.结果 共检测病例4347例,HPV检出率为24.64％;检出亚型23种,检出率以16型(8.10％)居高(X2＞6.63,P＜0.01),其次为43(3.93％)、58(3.52％)和52型(3.31％),显著高于其他19种亚型(x2＞6.63,P＜0.01),＞1％＜3％的有6、11、18、33、56型,其余14个亚型＜1％;随着年龄增长检出率呈上升趋势(Z=3.32,P＜0.01);阴道分泌物增多、不明原因阴道出血、月经紊乱等4类症状检出率为20.68％～25.59％,阴道分泌物增多加不明原因出血病例检出率为30.76％,宫颈鳞状上皮癌80例均检出HPV,高危型占97.50％ (78/80),16型占70.00％ (56/80),仅为低危型感染占2.50％(11型,2/80);炎性疾病检出率为24.75％,宫颈炎、阴道炎、宫颈炎合并症检出率为23.03％ ～ 28.38％,外阴炎为16.81％.结论 妇科临床病例HPV检出率以16型居首,其次为43、58和52型;宫颈癌检出率100％,阴道分泌物增多加阴道不明原因出血和宫颈炎为主的病例检出率较高;年龄越大,检出率越高,显示高年龄宫颈炎性疾病或阴道分泌物增多加不明原因阴道出血病例,是HPV和宫颈鳞状上皮癌防治的首要对象.     

不同消毒方式对硅橡胶类义齿软衬材料消毒效果的实验研究

目的 对比微波、紫外线和环氧乙烷对Silagum硅橡胶义齿软衬材料的消毒效果.方法 将高温消毒后的软衬硅橡胶试件染菌(白色念珠菌),分别进行不同时间的紫外线、微波、环氧乙烷消毒,消毒后的试件用无菌生理盐水冲洗,无菌玻璃平皿收集冲洗液,接种环将冲洗液接种于沙氏琼脂平板培养基,37℃恒温培养24～48 h观察,菌落计数,评价消毒效果.结果 环氧乙烷(EO浓度600 mg/L)肖毒60 min灭菌率为100％;紫外线(功率40 W、波长253.7 nm、距离1 m)照射40 min可杀灭99％的白色念珠菌、50 min可完全杀灭;微波(800 W V 100％)照射1 min灭菌率为93％,照射2 min灭菌率为100％.结论 三种消毒方法都具有消毒效果,且消毒时间越长消毒效果越好;环氧乙烷、紫外线、微波消毒口腔硅橡胶义齿软衬材料可与高温高压灭菌达到同样的效果,而且方便、有效,是良好的软衬材料的消毒方法.     

栓菌漆酶在毕赤酵母中高效表达及重组酶的性质

栓菌420（Trametes sp. 420）漆酶基因lacD以两种方式在巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）进行异源表达,产生两种重组漆酶：rLacDx（具有天然N-末端）和rLacDe（N-末端带有8个额外的氨基酸残基）。摇瓶发酵18d,rLacDx和rLacDe的产量分别为1.21×10⁵u/L、7.38×10⁴u/L ［以2,2′-连氮-3-乙苯-二噻唑-6磺酸（ABTS）为底物］。在高密度发酵条件下,rLacDx的产量增加到2.39×10⁵u/L,同时其生产周期降至7.5 d。两种重组酶对愈创木酚底物的氧化特性相似,且在50℃和pH3～10的范围内均稳定。然而,rLacDx对底物ABTS的比活力（1761u/mg）高于rLacDe （1122u/mg）,其表观K_m值(427μmol/L)低于rLacDe (604μmol/L)。     

大电导钙激活钾通道对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

为了观察开放和拮抗大电导钙激活钾通道（bigconductanceCa2＋-activated砧channel．BKca）对大鼠骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs）增殖的影响并探讨其机制,该研究分离培养了大鼠BMSCs,采用BKca通道特异性开放剂msl619）和拮抗剂（IBTX）干预,MTT、平板克隆测定细胞增殖活力及细胞克隆形成能力;流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期分布;Westernblot、定量PCR检测周期蛋白cyclinD1基因和蛋白表达水平;整细胞膜片钳技术分析细胞膜电生理特性。结果显示,NS1619干预组与对照组相比,BMSCs~胞膜科通道外向电流振幅增大,细胞增殖能力和克隆形成能力增强,凋亡减少。此外,开放BKca通道明显促进细胞从G1期向S期过渡,cyclinD1蛋白7LmRNA表达上调,而拮抗BKca通道则相反。推测,BKca通道通过调节细胞周期进程最终影响细胞增殖,该作用可能与其具有调控细胞膜心电流的电生理特性有关。     

经椎弓根椎体内植骨联合短节段内固定治疗老年骨质疏松性脊柱骨折的临床疗效

目的:探讨使用椎弓根椎体内植骨联合短节段内固定法治疗老年骨质疏松性脊柱骨折的临床疗效。方法:将2013年2月至2013年10月入院的59例老年胸腰段脊柱骨折患者按照治疗方法分为两组:观察组27例,进行经椎弓根椎体内植骨联合短节段弓根钉棒系统内固定治疗;对照组32例,单纯进行短节段弓根钉棒系统内固定治疗。研究过程中对患者的术中失血量、手术所用时间、VAS、手术前后椎体高度、骨折愈合时间及住院时间等治疗进行记录,并对两组数据进行统计学分析。结果:观察组术后及末次随访椎体高度丢失明显低于对照组(4.31±2.867.13±4.41,4.72±3.9811.57±4.72,P0.05),术前Cobb角两组患者无差异,而术后及末次随访Cobb角观察组明显低于对照组(3.96±3.477.25±5.29,5.17±4.3311.21±6.29,P0.01),差异均有统计学意义(P0.05)。术后疼痛程度评分显示,对照组高于观察组(5.68±2.371.86±1.41,P0.05),有显著性差异。观察组术后内固定物失效率也明显低于对照组(P0.05)。结论:临床调查结果显示,使用椎弓根椎体内植骨联合短节段内固定治疗老年骨质疏松性脊柱骨折可降低术后痛感,提高固定即时稳定性,值得临床推广使用。     

小鼠 LRRC 10腺病毒载体构建及其在心肌细胞中的表达

目的：构建含有小鼠Lrrc10（Leucine-rich Repeat Containing protein 10）基因的重组腺病毒表达载体。方法：设计小鼠Lrrc10特异性引物,以小鼠cDNA为模板,通过PCR扩增出mLrrc10的编码区,并引入HA标签蛋白和Sal Ι酶切位点。该片段经凝胶电泳纯化后插入pMD-18 T载体。测序后,用Sal Ι和Hind III酶切,将目的片段亚克隆至pAd-track-cmv穿梭载体中。用PmeΙ线性化后,用100 ng转化细菌BJ5183,在细菌内同源重组后得到 pAd-Lrrc10质粒。pAd-Lrrc10经PacⅠ线性化后用LipofectamineTM2000转染293A细胞,包装得到含Lrrc10基因的病毒重组子。将病毒重组子在293A细胞中扩增后,反复冻融得到滴度较高的含Lrrc10的病毒液。将收集的病毒液感染心肌细胞,绿色荧光观察 GFP、免疫印迹检测Lrrc10-HA蛋白的表达。结果：用病毒液感染原代心肌细胞,24小时后在荧光显微镜下可观察被感染的细胞发出绿色荧光,提取心肌细胞总蛋白,Western可检测到Lrrc10-HA融合蛋白的表达。结论：小鼠Lrrc10腺病毒载体构建成功,并可将编码Lrrc10-HA的目的片段导入心肌细胞中表达。     

棉花PTS2受体基因(GhPex7)的克隆及表达分析

利用cDNA—AFLP差异片段F010,通过RACE延伸、EST、检索等方法获得了一个棉花过氧化物酶体定位信号2受体蛋白基因(peroxisomal targetingsignal type 2 receptor,GhPex7p)的编码序列。该cDNA包含一个954bp的开放阅读框,编码317个氨基酸,推测其等电点为5．603。同源性分析表明：推测GhPex7与拟南芥、酵母、果蝇、小鼠和人的Pex7p基因存在序列相似性,其中与拟南芥的同源性最高,为83％,并具有3段WD-40蛋白家族的保守域,与拟南芥AtPex7的编码蛋白同类。Southern杂交结果表明该基因在陆地棉基因组中存在两个拷贝。Northern blotting和RT-PCR分析表明该基因在棉花根、茎、叶、花、胚珠和纤维中均表达,但茎、叶组织中的表达水平明显高于胚珠和纤维。     

同种异体宫内移植小鼠嵌合模型的建立

干细胞宫内移植是一种很有前途的产前治疗方式。为深入研究干细胞移植后的细胞行为,采用宫内移植的方法建立同种异体的嵌合小鼠模型。将雄鼠骨髓单核细胞宫内注射到胎鼠腹腔,在受体鼠出生后检测雌性受体鼠外周血细胞。应用PCR检测外周血是否存在雄性鼠的DNA,并采用定量PCR技术确定其嵌合量;同时用荧光原位杂交（FISH）技术直观观察外周血中雄性来源的细胞。结果表明：共获得4只阳性外周血嵌合小鼠,其中3只稳定嵌合达到6个月以上。应用宫内移植成功建立了外周血中存在异源细胞的小鼠嵌合模型。