CRISPR/Cas9基因编辑技术在前列腺癌研究中的进展

CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeat/CRISPR-associated protein 9)基因编辑技术是基于细菌和古细菌适应性免疫防御系统发展而来的一种基因编辑工具。Cas9蛋白借助gRNA的引导靶向目标基因进而实现对目标基因精确、高效的编辑。因其具有操作简单、成本低的特点,被研究人员广泛应用,并在前列腺癌相关基因及信号通路的研究中发挥着重要作用。该文将对CRISPR/Cas9基因编辑技术的发展、作用机理及其在前列腺癌研究中的应用进展进行综述。     

神经粘附分子NCAM140 基因RNA干扰质粒的构建与鉴定

摘要目的：构建有效的小鼠神经粘附分子（NCAM140）基因的RNA 干扰（RNAi）质粒载体,为研究NCAM140参与的细胞信号通 路转导、其生物学作用以及以NCAM140 为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi 质粒。方法：使用基因序列软件设计、筛选符 合公开文献筛选参数的4 条靶序列以及1条阴性对照序列,由上海吉玛技术有限公司合成。与载体质粒pGPU6/GFP/Neo 重组后, 分别命名为pSi-nca1、pSi-nca2、pSi-nca3、pSi-nca4和pSi-control。转染大肠杆菌感受态细胞。选择阳性克隆进行DNA 测序鉴定, Western blot方法进行干扰靶点的筛选。选取干扰效率最高的质粒转染MN9D 细胞,普通光学显微镜分别计数同一视野细胞总数 及GFP阳性细胞数,计算转染效率。结果：酶切和DNA 测序结果证实shRNA正确插入pGPU6/GFP/Neo 质粒;Western blot结果 显示与空质粒对照组比较,pSi-nca4 组细胞NCAM140 表达明显下调,细胞转染效率为62 %。结论：成功构建靶向小鼠 NCAM140 基因的RNAi 质粒,为NCAM140 参与的细胞信号通路的研究以及以NCAM140为靶点的基因治疗提供了稳定转染 细胞的干扰质粒,为研究其生物学作用奠定了分子生物学基础。     

江西井冈山蕨类植物研究

井冈山地处中国南岭山地湘赣边境的罗霄山脉中段 ,北纬 2 6°2 2′～ 2 6°48′,东经 1 1 4°0 5′～ 1 1 4°2 3′。在植被分区上被认为是“中国亚热带常绿阔叶林区 ,东部 (湿润 )常绿阔叶亚地域的中亚热带南部亚地带”。该地植物种类繁多 ,区系成分复杂 ,保存着比较完整而古老的第三纪型的植物和森林生态系统 ,是许多古老植物种属的著名“避难所”〔1〕。笔者在多年野外调查和查阅标本及资料的基础上 ,系统分析了井冈山蕨类植物区系和生态分布特征。旨在为蕨类植物的研究、保护和开发利用提供理论依据。1 　井冈山的蕨类植物区系地理成分…     

文山松毛虫质型多角体病毒S8片段cDNA克隆与原核表达

文山松毛虫质型多角体病毒(DpwCPV)S8片段被克隆和测序,该片段全长1332bp,编码390个氨基酸组成的分子量大约为43kDa的蛋白P44.根据本实验室测定出的马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)基因组全序列,设计引物,扩增出文山松毛虫质型多角体病毒S8部分片段,并亚克隆出p44基因序列,然后将p44基因序列cDNA克隆到表达载体pET-28a中,构建成表达质粒pET-S8,用IPTG诱导大肠杆菌BL21,经SDS-PAGE证明p44基因在大肠杆菌中获得成功表达,并对其编码蛋白序列进行了分析.     

采用七味中草药外敷治疗毒蛇咬伤267例疗效观察

福建省泰宁县地处山区 ,是蛇伤多发地区。近1 0年来 ,笔者在总结中草药及民间验方基础上 ,采用七味中草药合成粉剂外敷治疗各类毒蛇咬伤2 6 7例 ,效果显著 ,现报道如下。1　临床资料1 .1　一般资料　本组 2 6 7例中 ,男 2 0 8例 ,女 5 9例 ;年龄最小 9岁 ,最大 81岁 ;蝮蛇咬伤 1 9例 ,银环蛇咬伤 7例 ,蝰蛇咬伤 4例 ,眼镜蛇咬伤 80例 ,烙铁头蛇咬伤 1 1例 ,五步蛇咬伤 49例 ,青竹蛇咬伤 97例 ;咬伤后 2 h内就诊 95例 ,3 h～ 2 4 h就诊 98例 ,2 5 h以后就诊 74例 (其中含入院前已溃烂及严重溃烂的 5 3例 )。1 .2　治疗方法　取红冬青、山鸡椒…     

血流感染粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及耐药研究

回顾性分析上海市某三甲医院血培养阳性标本中粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及对抗菌药物的耐药特征,为临床治疗其所致感染奠定基础。收集上海市某三甲医院2012年2月—2016年9月血流感染患者血液标本中的粪肠球菌和屎肠球菌,采用法国生物梅里埃公司的VITEK 2Compact全自动细菌鉴定和药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏测定,研究细菌临床分布特点及对常用抗菌药物的耐药特征。共分离获得30株粪肠球菌和17株屎肠球菌。粪肠球菌样本主要来自泌尿科、消化科和血液科,所占比例分别为13.33%、16.67%和10.00%。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、四环素和红霉素的耐药率分别为13.33%、10.00%、36.67%、33.33%、66.67%和60.00%。屎肠球菌样本主要来自消化科(29.41%),其对以上抗菌药物的耐药率分别为88.24%、82.35%、88.24%、76.47%、23.53%和70.59%。屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率显著高于粪肠球菌,而对四环素的耐药率显著低于粪肠球菌。两者均对替加环素、利奈唑胺和万古霉素敏感,但万古霉素对屎肠球菌的最低抑菌浓度显著低于粪肠球菌。结果提示,屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率高于屎肠球菌,对万古霉素敏感,且其万古霉素最低抑菌浓度低于粪肠球菌。本研究为治疗这两种细菌所致感染的经验性用药提供了数据支持。     

黑白花奶牛的xx/xY嵌合体一例

异性李生不孕症仅发生于牛和绵羊,山羊、 猪、马中也有类似异性孪生不孕症状,但为数较 少。牛的双胎中约有57并为异性孪生。形成 这种病症很重要的原因之一就是性染色体的嵌 合现象山。本文利用外周血淋巴细胞培养,进 行染色体分析,鉴别诊断一头黑白花奶牛性染 色体的嵌合体,现报道如下。     

滩涂禾草镶嵌群落植物斑块与土壤因子的对应分析

【摘要】为研究镶嵌群落植物斑块特征与土壤性质的对应关系, 以江苏省盐城市的江苏大丰麋鹿国家级自然保护区内互花米草(Spartina alterniflora)-芦苇(Phragmites australis)-白茅(Imperata cylindrical)-獐茅(Aeluropus littoralis)镶嵌群落为研究对象, 于2018年4月24日及25日, 分别采集各植物斑块0-10 cm、10-30 cm和30-60 cm深度的土壤样品, 测定土样的盐度、总有机碳含量、全氮含量、全磷含量、容重和平均粒径等理化指标, 并对其与不同植物斑块结构特征的对应关系进行了典范对应分析。研究结果显示： （1）植物斑块类型间土壤特征的主要差异体现在表中层, 其中盐度差异最显著, 其次为全氮、容重、总有机碳、土壤含水率、平均粒径, 全磷在植物斑块类型间、不同土壤层次间差异不显著; （2）土壤因子与植物斑块类型的对应关系随着土壤深度增加而减弱, 显著相关的土壤因子数量也逐渐减少; （3）典范对应分析显示, 与植物斑块特征的对应关系, 不同土层间总有机碳、含水率、容重、盐度具一致性, 而全氮、平均粒径、全磷层次间有较大差异。总体上,各指标在土壤层次间的分布特征往往因植物斑块类型而异,表浅层土壤总有机碳、盐度、容重以及含水率是植物斑块特征的主要影响因子。     

长江下游平原区乡村景观的结构、管理和土壤有机碳研究

通过实地研究主要位于宜兴市域的区域乡村景观代表性样方,评价并阐明了人口密集的长江下游平原区乡村景观的结构,土地管理与土壤有机碳储量的关系。景观绘图是基于1m分辨率的IKONOS影像并采用生态立地分类及绘图标准,通过直接解译和实地检验对边界清晰的均质景观缀块进行分类和绘图;依据区域权重分层取样设计方法,在生态立地斑块中随机设定取样点进行土壤和淤泥取样;利用区域权重系数进行区域土地利用/覆被和土壤有机碳储量评价计算。结果表明:在2.13×106hm2的长江下游平原区乡村景观面积范围内,0~30cm土壤有机碳储量为76.97Tg。该区域土地利用/覆被的主要类型为水田,水产养殖,非渗漏性建筑用地,旱地1年生作物和水浇地多年生作物,这5种类型的面积百分数和土壤有机碳储量百分数分别为83%和85%。其中平原稻田面积为0.89×106hm2,占总面积的42%;其0~30cm土壤有机碳储量高达36.60Tg,占总储量的48%。通过区域分层取样和小尺度景观斑块的区域权重推绎分析,揭示了人口密集的乡村景观中土地利用/覆被方式对当地和区域土壤有机碳的影响模式。这种在小尺度下对土地管理调查,土壤有机碳和其它生态特征研究的方法明显优于传统的基于30~1000m分辨率遥感影像的土地覆被研究和基于土壤类型的区域土壤有机碳储量评价方法。     

邻苯二甲酸酯在不同品种通菜-土壤系统中的累积效应研究

在邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)不同污染程度的水稻土上盆栽不同品种通菜,应用GC／MS联机检测技术研究了通菜-土壤系统中DEHP的环境行为与归宿．结果表明,通菜中DEHP的含量为0．335～12．710mg·kg^-1,与土壤的污染程度呈正相关．不同品种通菜之间对DEHP的吸收累积效应存在显著差异,与其叶子大小存在一定的正相关关系．种植不同品种通菜后土壤中DEHP的残留量(1．424～19．834mg·kg^-1)存在显著差异．通菜对土壤中DEHP的BCFs都小于1．0,与土壤的污染程度呈负相关．不同通菜品种的BCFs之间存在显著差异,中等叶子通菜品种的BCFs相对较大。