GABAA受体蛋白片段在大肠杆菌细胞表达条件研究*

为了提高GABAA受体a1蛋白片段在大肠杆菌中表达量,研究了重组菌的发酵条件,包括培养基、接种量、温度、摇床转速、pH、诱导培养时间和诱导剂IPTG使用浓度等对GABAA受体蛋白片段表达的影响。结果表明重组菌以LB培养基为发酵基质,按3％接种量,37℃培养细胞3.5h后IPTG 32℃诱导5h,菌体生物量为3.25g/L,目标蛋白表达量达95mg/L。用16L发酵罐进行放大培养,菌体生物量达4.95g/L,发酵周期5.5h,最高目标蛋白表达量达到136mg/L.     

SPR生物传感器的谱之数字解析

为了实时地从ＳＰＲ谱的变化得到生物大分子相互作用的信息,作者采用等效递推法编程模拟计算,探讨了影响ＳＰＲ谱的各种因素。结果表明：在实际应用中组装在金膜表面的多层生物样品的厚度、面密度与ＳＰＲ谱峰位移ΔθＳＰＲ成正比,单个样品分子所占的面积与ΔθＳＰＲ成反比。光源波长和棱镜玻璃的色散关系对上述关系的比例常数有较大的影响;虽然作为金膜载体的盖玻片会导致ＳＰＲ谱上叠加一定频率的干涉噪音,但是可以不考虑盖玻片的厚度以及金膜厚度的影响。为了实时地从ＳＰＲ谱的变化得到生物大分子相互作用的信息,作者采用等效递推法编程模拟计算,探讨了影响ＳＰＲ谱的各种因素。结果表明：在实际应用中组装在金膜表面的多层生物样品的厚度、面密度与ＳＰＲ谱峰位移ΔθＳＰＲ成正比,单个样品分子所占的面积与ΔθＳＰＲ成反比。光源波长和棱镜玻璃的色散关系对上述关系的比例常数有较大的影响;虽然作为金膜载体的盖玻片会导致ＳＰＲ谱上叠加一定频率的干涉噪音,但是可以不考虑盖玻片的厚度以及金膜厚度的影响。     

Nicorandil对心肌细胞静息状态及缺氧后复氧时细胞内游离钙的影响

大量实验显示Ｎｉｃｏｒａｎｄｉｌ有明显抗缺血再灌注损伤的作用。细胞内钙超载是心肌缺血再灌注损伤的主要发生机理之一,本研究旨在研究Ｎｉｃｏｒａｎｄｉｌ对静息状态下心肌细胞内Ｃａ２＋的动态作用及对缺氧后复氧时细胞内Ｃａ２＋的影响。１材料及方法１．１细胞培...     

大鲵消化系统的解剖学观察

本文报道了大鲵消化系统的形态结构。大鲵胃粘膜厚，胃腺发达。消化管肌层皆为平滑肌，环肌明显多于纵肌。肝脏较大，比肝重４．４１％，分左右两叶，右叶大于左叶，肝小叶不明显。胰腺长带状，位于十二指肠下方，胰岛明显。胰管与总胆管汇合后与回肠最前部相连。     

双磁珠法质粒DNA提取技术及应用

质粒是基因合成与测序领域中使用最为频繁的基因运载工具,然而传统的质粒DNA提取方法面临提取通量低、生产成本高等问题,无法满足日益增长的需求。本研究基于质粒提取原理,开发了双磁珠法(double-magnetic-bead method, DMBM)质粒提取技术,探究了磁珠投入量、质粒DNA片段大小、菌液投入量等因素对质粒提取的影响,并且对比了本技术与商业化质粒DNA提取试剂盒提取DNA质量、提取通量及提取成本。结果表明,双磁珠法质粒DNA提取技术可满足不同细胞密度、不同片段长度的质粒DNA提取。此外,该技术搭载96通道全自动核酸提取仪,提取的质粒DNA纯度更高、提取时间缩短80%、提取成本缩减57.1%,从而实现了质粒DNA提取的高通量、低成本,有效助力基因合成与测序。     

黄土高原地区主要植被类型的气候梯度分布

应用Thronthwaite的方法,对黄土高原286个气象站(台)的某些气候指标进行了计算,其中包括校正的潜在蒸散(APE)、水分指数(IM)、热量系数(TE)、干旱指数(IA)和湿润指数(IH)。同时,得到了每项气候指标的地理回归模型,并利用各项地理回归模型分别做出了各项气候指标的地区分布图。APE和IM与黄土高原地区植被的主要类型及其分布格局有密切的关系。本区大多数的植被类型的IM均为负值,照例划入干旱亚湿润-半干旱-干旱(dry subhumid-semiarid-arid)地区内,而大部分植被的TE在57.1—85.5之间,应属中温范畴。植被与气候指标的相关性表明:黄土高原南端的地带性植被,实际上为干旱森林、疏林和灌丛,它们在性质上与分布于山地上的辽东栋(Quercus liaotungensis Koiz.)林有所区别。     

β-葡萄糖苷酶的糖耐受和促活性质研究

【目的】以葡萄糖耐受并促活的β-葡萄糖苷酶Bgl2A为出发材料,寻找与β-葡萄糖苷酶的葡萄糖耐受和促活性质相关的重要氨基酸残基位点并对其进行突变;对突变酶性质进行检测,结合分子对接,探究突变对酶的糖耐受和促活性质的影响及机制;进而对葡萄糖不耐受的Bgl3A (Bgl2A:A22S/V224S)进行分子改造,以获得应用潜能更好的突变酶。【方法】通过序列和结构比对、统计耦联分析和结构分析,选取Bgl2A底物通道口、蛋白质表面以及活性中心附近可能间接影响葡萄糖耐受和促活性质的残基作为突变位点,构建了多个突变酶,并对其酶学性质进行检测。【结果】以Bgl2A为出发酶,D322I、W325A、W126Y、F172N、C173I和N226V的糖耐受和促活性质显著提升。分子对接提示,这些突变可能是通过变构效应影响活性中心与葡萄糖结合的自由能,从而改变酶葡萄糖耐受和促活性质。据此,在Bgl3A分子上对应构建多个突变体,筛选获得了较出发酶在糖耐受和促活性质提升的同时保持较高酶活和稳定性的突变酶N226V和F172N。【结论】除了酶与葡萄糖直接结合的位点,不与葡萄糖直接相互作用的位点也可通过远程作用间接影响...     

安县发现毛腿沙鸡

1991年12月14日,在四川省安县花荄镇海拔500米的安昌河边采得一只雄性毛腿沙鸡(Syrrhaptes paradoxus)。体重224克;全长320,嘴峰16,翅长250,尾长200,跗蹠长21毫米。嘴为鸡嘴状,足仅3趾,均黑灰色;跗蹠和