β-葡萄糖苷酶与透明颤菌血红蛋白在大肠杆菌中的共表达

为解决大肠杆菌高密度发酵生产β-葡萄糖苷酶过程中溶氧不足的问题,分别采用双顺反子和T7启动子系统在Escherichia coli中引入透明颤菌血红蛋白(VHb)以改善溶氧的利用、提高菌体的生物量,进而增加β-葡萄糖苷酶的产量。以双顺反子形式诱导表达VHb时,在摇瓶低溶解氧条件下的最高生物量达到4.24±0.29(OD_(600)),与无VHb表达的对照组相比提高了35.03%,同时β-葡萄糖苷酶发酵酶活达到了(9.78±0.55)U/m L,比对照组提高了25.38%。在3 L发酵罐中使用双顺反子形式共表达VHb时,β-葡萄糖苷酶发酵总酶活达到141.23 U/m L,与无VHb表达的对照相比提高了35.57%。以T7启动子对VHb进行表达后,在摇瓶和发酵罐中β-葡萄糖苷酶的发酵酶活均低于对照组。这些结果表明,在大肠杆菌中以双顺反子形式共表达β-葡萄糖苷酶和VHb能够提升菌体对低溶氧的耐受能力,提高菌体生物量和β-葡萄糖苷酶的产量。     

贵州娘娘山湿地藓类沼泽植物群落特征及优势种种间关系

湿地植物群落的监测可为湿地公园的科学管理提供理论指导。本研究以贵州娘娘山湿地藓类沼泽为对象,比较了金发藓沼泽与泥炭藓沼泽植物群落特征,探索了群落优势种种间关系及群落多样性构成机制。结果表明,金发藓沼泽植物群落特征显示了自然恢复的良好成效,群落组成和结构逐步恢复。金发藓与蕨的优势度具有二次曲线关系,即较低优势度的蕨(40%)促进金发藓的生长,较高优势度的蕨(40%)抑制金发藓的生长。蕨类植物具有光竞争优势,抑制禾草状和非禾草状植物生长,显著影响植物群落多样性;非禾草状植物在植物多样性维持中具有重要地位。在湿地公园的管理中,合理控制蕨的生长有利于湿地水涵养功能和植物多样性保护。     

鹿科动物声音通讯的研究进展

所有鹿科Cervidae动物都要依赖视觉、嗅觉和听觉线索进行交流,声音通讯作为一种高效的交流方式,在群体生活中起着非常重要的作用。本文列举了鹿科动物发情鸣叫、警戒鸣叫、交流鸣叫、求救鸣叫等叫声类型,总结了其发声机制,探讨了声音与鹿科动物自身信息的相关性、叫声对两性繁殖行为的影响,以及鹿科动物对种内和种间叫声的识别,并介绍了鹿科动物声音通讯的研究方法。最后,对鹿科动物声音通讯未来的研究方向进行了展望。     

HEVAg-PLGA纳米颗粒疫苗小鼠体内免疫学研究

研究重组戊型肝炎抗原(HEVAg)-乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)纳米颗粒抗原能否在动物体内诱导产生免疫应答。制备HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原后,通过皮下、滴鼻、口服途径接种Balb/c小鼠,每隔4周加强免疫两次,HEVAg与铝盐佐剂(铝佐剂疫苗Al_2O_3-Ag)为对照组,一定时间内检测抗体及细胞因子的应答水平。结果HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原在小鼠体内诱导产生有效的体液免疫、细胞免疫。滴鼻、口服途径黏膜系统中诱导产生较高滴度的IgA抗体,ELISPOT结果显示鼻腔、唾液腺中IgA ASCs数量显著增加;皮下途径诱导产生较高滴度的IgG抗体;常规铝佐剂疫苗相比于HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原诱导较强的IgG抗体水平,未诱导产生黏膜免疫应答;HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原诱导产生较强细胞免疫应答,皮下接种途径IFN-γ、IL-4生成细胞数量显著高于其它免疫组。与铝佐剂疫苗相比,HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原能有效诱导产生系统免疫及黏膜免疫应答,显示HEVAg-PLGA有潜力成为备选HEV黏膜疫苗抗原,同时展示PLGA颗粒作为黏膜系统抗原递送载体及黏膜佐剂的优越性。     

紫薯中四种花色苷抗氧化活性的密度泛函理论研究

本研究旨在分析紫薯中四种不同花色苷的抗氧化机理。利用DPPH试验和脂肪过氧化抑制能力试验分析四种花色苷的体外抗氧化活性,进而通过密度泛函理论对花色苷及其简化分子模型的优化结构、键离能、电离势等进行分析,探讨抗氧化机理。结果显示,四种花色苷的OH-4'酚羟基的活性最高,键离能小于白藜芦醇的键离能,抗氧化活性的理论计算结果与体外抗氧化试验结果一致。研究结果表明,紫薯花色苷具有较好的抗氧化活性,并且DFT方法为花色苷抗氧化活性的开发提供了有力的理论基础。     

近交系BALB/c小鼠及先天遗传性白内障突变型BALB/cBk-Cat小鼠的DNA指纹研究

采用人工合成的寡核苷酸探针(GATA)~4|分别与近交系小鼠BALB/c和经10年 30代培育而成的自发突变型近交系先天遗传性白内障BALB/cBk-Cat小鼠进行DNA分杂交,DNA指纹显示:(1)BALB/c小鼠个体之间以及BALB/cBk-C at小鼠个体之间没有差异;(2)BALB/c小鼠与BALB/cBk-Cat小鼠的DNA指纹在23-6kb之间的区域有差异。     

表面等离激元显微镜对Supported-Membranes的观测

在国内首先建立了一台表面等离激元显微镜,利用此显微镜对不同厚度的脂肪酸ＬＢ膜样品进行了观察,很好的区分了双层硬脂酸和双层棕榈酸分子膜的厚度差别。接着又对处于固液共存分相状态的ＤＭＰＥｓｕｐｐｏｒｔｅｄｍｅｍｂｒａｎｅ的形貌进行了观测,从不同的光源入射角度得到了不同相畴处发生共振吸收的ＤＭＰＥｓｕｐｐｏｒｔｅｄｍｅｍｂｒａｎｅ的分相图像,并对各相畴区之间表观厚度差别进行了测定和讨论     

人类巨细胞病毒感染实验室定量检测的新进展

人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）的感染对人类健康威胁较大,尤以先天性感染、器官移植、艾滋病及反复输血患者的感染最严重。近处来在诊断ＨＣＭＶ感染方面取得的主要突破是早期、快速、定量测定。因此,本文就ＨＣＭＶ感染病毒血症、抗原血症的定量测定及标本中ＤＮＡ定量多了聚酶链反应（ＰＣＲ）技术测定一简单综述。     

栀子蓝色素摇瓶生产条件的优化研究

对栀子蓝色素摇瓶发酵生产的培养基配方进行了优化研究。结果表明,在栀子基质溶液中添加１．５％的可溶性淀粉、０．７５％的胰蛋白胨和０．１０％的ＭｇＳＯ４,可使栀子蓝色素的摇瓶产量提高１５．６％。     

碳青霉烯类药物耐药肠杆菌科细菌传播机制的研究

目的研究大连医科大学附属一院2013-2014年期间收集的68株对碳青霉烯类药物耐药肠杆菌科细菌(CRE)的药敏结果、耐药基因携带情况及传播机制。方法采用WHONET 5.6软件分析菌株耐药情况;聚合酶链反应技术(PCR)检测KPC、IMP、VIM、ISCR1及ISCR1可变区;ERIC-PCR进行同源性分析。结果 2014年与2013年相比较,各类抗生素的耐药率差异虽没有统计学意义,但均有所升高,升高率大部分约为20%;68株CRE中,KPC阳性16株,占23.5%,IMP阳性2株,占2.9%,VIM阳性17株,占25.0%,ISCR1阳性37株,占54.4%,ISCR1可变区阳性21株,占30.9%;ERIC-PCR将45株碳青霉烯类耐药肺炎克雷菌分为4个型别(A~D):A型占64.5%,B型占13.3%,C型占8.9%,D型占13.3%;23株碳青霉烯类耐药大肠埃希菌分为3个型别(A~C):A型占60.9%,B型占30.4%,C型占8.7%。结论 ISCR1是耐药基因分子间水平传播的重要原因。