大豆GmCAT3和GmCAT5基因在大肠杆菌中的热击诱导表达

利用RT-PCR技术获得大豆过氧化氢酶GmCAT3和GmCAT5基因的cDNA片断,序列长为1 492 bp,编码492个氨基酸,相对分子质量分别为56.9和56.7 kD,等电点(pI)都为6.77,同时预测了蛋白质的二级和高级结构;将获得的目的片段连接到pBV220表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,在42℃诱导6 h的条件下,蛋白的表达量最佳,诱导的目的蛋白在57 kD处主要以包涵体的形式存在,获得重组蛋白占总蛋白的百分比分别是47%和35%,为近一步研究大豆过氧化氢酶的结构和功能提供了实验基础.     

疾病生态学与人体健康

一、地理生态系统与人体健康的关系疾病生态学是以研究人体健康与地理环境相互关系为目的的一门学科。探索地理环境与生命,地理环境与人体健康及疾病的内在联系、相互影响和机制,探索地理生态病因在生命中的意义,已成为医学地理的基本研究任务,也是当代科学与实践要解决的重大问题之一。某些疾病所表现出来的区域特征,往往反映着地理生态系统在区域生态循环中的独特性及其与人体健康之间的关系,这种关系实质上表现为人类生存圈中与疾病生态学有关的地理因素间是否保持生态系统的动态平衡。     

基于LSU和ITS的青藏高原黄绿卷毛菇种群遗传多样性分析

为研究黄绿卷毛菇群体遗传结构,以青海、西藏、四川3个省份的10个地理群共91个样本黄绿卷毛菇为实验材料,采用分子生物学方法测定和分析所有样本的LSU和ITS序列。结果显示:1 995bp的LSU和ITS基因序列共有8个变异位点,得到20个基因型。单倍型多样性指数(Hd)和核苷酸多样性指数(pi)分别为0.538±0.026和0.00029±0.00002;青海玉树和青海兴海的遗传多样性指数最高。分子变异分析结果表明黄绿卷毛菇群体遗传变异主要来自种群内(75.70%),种群间遗传分化较大。系统进化树结果也表明,10个地理群分成2个支系,黄绿卷毛菇群体存在明显的地理结构。中性检测结果进一步证实,黄绿卷毛菇群体有着复杂的群体历史,曾发生过种群数量扩张,近期种群数量正在衰减。     

外源IAA对NaHCO3胁迫下黄瓜幼苗光合特性和抗氧化系统的影响

以黄瓜‘津研四号’幼苗为试材,采用Hoagland营养液栽培,研究了不同浓度(0、0.01、0.1、1和10μmol·L-1)IAA处理对50 mmol·L-1 NaHCO3胁迫下黄瓜幼苗光合特性及抗氧化系统的影响。结果表明,碱胁迫对黄瓜幼苗的生长有抑制作用,0.01~1μmol·L-1外源IAA处理可显著增加黄瓜幼苗的生物量;使叶中Na+积累降低,K+积累增加,且IAA的缓解效果具有浓度效应。叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量提高,净光合速率(Pn)和气孔导度(Gs)增加,以1μmol·L-1 IAA处理的效果最好。添加1μmol·L-1外源IAA显著提高了碱胁迫下黄瓜叶中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性及还原型抗坏血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)的含量,降低了碱胁迫诱导的活性氧积累和膜脂过氧化反应;而10μmol·L-1外源IAA处理则加剧碱胁迫对黄瓜幼苗的危害。     

生长休止蛋白7在成年大鼠肾脏、心脏和肝脏中的差异表达

目的研究生长休止蛋白7（Gas7）在成年大鼠肾脏、心脏和肝脏的表达。方法成年SD大鼠16只,分别采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法和免疫组织化学方法检测Gas7基因mRNA和蛋白在成年SD大鼠肾脏、心脏和肝脏的表达,并进行图像分析和统计学处理。结果RT—PCR结果显示,Gas7mRNA在肾脏高表达,在心脏的表达弱于肾脏（P〈0．05）,而在肝脏的表达最弱,基本检测不到。免疫组化结果显示,在肾脏中,Gas7免疫阳性产物在近髓肾单位的近曲小管呈强阳性反应,在集合管表达较弱,在肾小球和其余肾小管未见表达;在心脏中,Gas7免疫阳性产物均匀分布于心肌细胞,呈中等强度反应,弱于肾脏（P〈O．05）;在肝脏中,Gas7蛋白未见明显表达,与其mRNA在肝脏的表达相似。结论Gas7在大鼠肾脏、心脏和肝脏表达的不同,尤其在肾脏组织分布的差异性,提示Gas7在成年大鼠肾脏和心脏结构以及功能的维持中可能起着重要作用。     

雄全异株流苏树的花部特征及繁育系统研究

雄全异株是自然界罕见的繁育系统。通过野外观察和人工授粉实验对雄全异株植物流苏树传粉生物学特征及繁育系统进行研究。结果表明:流苏树的雄花与两性花的雄蕊发育过程基本一致,均能产生功能花粉粒。两性花的两个心皮原基愈合分化形成雌蕊,雄花的两个心皮原基愈合后形成一个空室并停止发育至整体退化。雌蕊先熟,柱头可授期长,花粉在花药开裂后具有活力,室温下,活力维持在10%以上约2周。流苏树靠风和昆虫(主要是蓟马和食蚜蝇)传粉。控制授粉30 d后,自然对照结实率为34.36%;两性花不存在无融合生殖现象,自交亲和,但自发自交的结实率仅10.70%;人工授粉下杂交结实率显著高于自交(同株异花);有性生殖受到传粉者限制;是混合交配系统。证实流苏树是木犀科又一功能性的雄全异株,其依靠雄株增加异交花粉的数量和质量,避免自交衰退;同时两性花的自交亲和保障生殖成功。流苏树雄花的雌蕊退化,从另一个角度证明木犀科的雄全异株是两性株向雌雄异株进化的过渡状态。     

原儿茶酸促进人脂肪干细胞体外增殖的研究

为了寻找能够促进干细胞增殖的药物,观察了中药益智仁（Alpinia oxyphylln）中提取的原儿茶酸对人脂肪干细胞体外增殖的影响,并对其作用机制进行了初步的探讨．人脂肪干细胞能在体外分化为神经元样细胞,并对凋亡的PC-12细胞起到保护作用．原儿茶酸能够促进人脂肪干细胞的增殖,且呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性．流式细胞术检测细胞DNA含量的结果显示,原儿茶酸处理组细胞S期所占比例明显增加,其中,1．5mmol／L原儿茶酸处理组细胞S期所占比例与对照组相比增加2倍以上．同时,该组细胞G2／M期所占比例明显增加,G0／G1期所占比例明显下降．蛋白质免疫印迹结果显示,1．5mmol／L原儿茶酸处理组细胞周期素D1（cyclinD1）的表达明显升高．cyclin D1-siRNA转染显著抑制了原儿茶酸对人脂肪干细胞体外增殖的促进作用．流式细胞术检测细胞表面标志物,成骨诱导和脂肪诱导的结果显示,原儿茶酸处理后,人脂肪干细胞仍保持间充质干细胞多分化潜能的特性．上述结果提示,原儿茶酸有可能在人脂肪干细胞介导的干细胞移植治疗中发挥作用．     

百合细胞中内生菌的发现

在健康的百合鳞茎、地上茎、叶和幼胚等组织的细胞中发现了“内生菌”。通过光学显微镜、电镜和组培等观察,“内生菌”不影响百合细胞的正常分裂和分化,再生植株健壮。这些细菌还能随着宿主细胞的分裂转移到子细胞。“内生菌”椭圆形或近圆球形。电镜切片菌壁厚,单层,均质,为典型革兰氏阳性菌壁结构。电镜观察结果与光学显微镜观察内生菌的革兰氏染色反应是一致的。     

鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达(英)

BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达,设计了带有SalⅠ,NotⅠ酶切位点的引物,以已构建好的质粒pGEM-T Easy/BRD7为模板,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架,并用SalⅠ,NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX-4T-2,然后用T4 DNA连接酶将其连接,得到重组表达质粒PGEX-4T-2/BRD7,经双酶切鉴定和测序验证,表达载体构建正确.重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm105后用IPTG诱导,成功表达了一分子质量约为90 ku的融合蛋白;37℃诱导4 h后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳后,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量28.48%, 蛋白质印迹(Western-blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功.这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备,进一步开展其功能研究奠定了基础.     

温度导致的我国东北三省玉米产量波动模拟

东北三省处在我国高纬度地区,一直以来玉米生长季由温度导致的低温冷害是影响东北三省玉米生产波动的主要农业气象灾害;作物模式能对作物重要生理生态过程及其与气象、土壤等环境条件的关系进行数值模拟,人为再现农作物生长发育过程.借助WOFOST作物模型在东北三省玉米生产适应性验证的基础上,对该三省区近46a来(1961～2006年)因温度导致的玉米产量波动情况进行了模拟分析.结果显示,黑龙江、吉林、辽宁三省区的玉米产量波动趋势基本相一致,且随着年份的增加产量波动有减小的趋势,产量波动最大的是黑龙江省,波动范围-20%～12%;产量波动最小的是辽宁省,波动范围-15%～8%.