无赖氨酸激酶4在小鼠气管上皮细胞液体转运中的作用

该研究探讨了无赖氨酸激酶4(with no lysine kinase 4, WNK4)对于小鼠气管上皮细胞液体转运中的调节作用。在原代培养的小鼠气管上皮细胞中,应用siRNA特异性沉默WNK4基因,半定量PCR和Western blot实验验证沉默效率;随后应用尤斯灌流装置和Western blot实验记录该激酶的低表达对小鼠气管上皮细胞的短路电流及钠离子通道α-亚基蛋白表达水平的影响。半定量PCR和Western blot结果显示,该研究选用的siRNA序列可以沉默WNK4的表达。尤斯灌流和Western blot结果显示,沉默该激酶后,小鼠气管上皮细胞的阿米洛利敏感性电流和钠离子通道α-亚基蛋白表达明显增加。该研究表明,降低WNK4基因表达能增加小鼠气管上皮细胞的上皮钠离子通道α-亚基蛋白表达,促进钠离子转运,此过程可能参与相关水肿性肺疾患的修复。     

人椎间盘髓核来源的诱导多能干细胞重编程及功能的研究

椎间盘退变始发于髓核组织,获得足够有功能的髓核细胞是研究及治疗椎间盘退变的关键.而人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)不仅为建立疾病模型以研究疾病发生发展机制开辟了道路,还在再生医学领域展现出了广阔的应用前景.我们首先从椎间盘退变患者微创手术获得的髓核组织内分离髓核细胞,将携带OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC的仙台病毒(Sendai virus,Se V)转染髓核细胞,重编程获得iPSC.通过检测多能细胞特异性标志、体内成瘤实验、甲基化及核型分析对所获得的iPSC进行鉴定.并以皮肤成纤维细胞来源iPSC作为对照,在二维和三维水凝胶中对iPSC进行定向分化,检测髓核细胞相关蛋白和基因的表达,比较分析2种iPSC向髓核细胞的分化效率.结果显示,iPSC能表达多能细胞特异性标志,具有正常的二倍体核型,畸胎瘤实验显示三个胚层的出现.诱导分化后的iPSC表达髓核相关基因和蛋白,在水凝胶中诱导培养后,iPSC表达更多的髓核相关基因和蛋白.髓核来源的iPSC与成纤维细胞来源的iPSC相比,可表达更多的髓核相关基因和蛋白.本研究首次将患者退变髓核细胞重编程成iPSC,并在水凝胶内将其诱导分化为髓核样细胞,为椎间盘退变个体化细胞治疗奠定基础.     

铜绿假单胞菌NY3胞外分泌物对降解烃类的影响作用

为了研究铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa NY3胞外分泌物对烃类降解的作用,对胞外分泌物影响烃类降解的效率进行了研究。研究发现,NY3菌以LB培养基和以烃类为唯一碳源的无机盐培养基培养得到的种子液,离心并洗涤菌体后,菌细胞代谢烃类效率明显下降。分别利用盐析和溶剂萃取法,提取种子液上清液中胞外大分子和小分子,且投加在NY3菌(离心后的菌细胞)降解十四烷的无机盐培养基中,发现24 h内外加胞外大分子化合物,使NY3菌对十四烷去除率可提高约14%,而投加小分子化合物使NY3菌24 h内对十四烷去除率提高约6%。利用SDS-page聚丙烯酰氨凝胶电泳分离胞外大分子,结果发现主要是该菌胞外所分泌的蛋白或多肽类,主要有3个条带,它们的分子量约在35~55 k D范围内,其对烃降解促进作用机理有待进一步验证。利用飞行质谱(LCMS-IT-TOF)鉴定胞外小分子分泌物,结果表明在本研究条件下,它们均为氧化还原反应活性物,可以加快反应体系中电子传递速度,促进底物的氧化还原反应。     

腾格里沙漠东南缘生物土壤结皮的固氮潜力

以腾格里沙漠东南缘广泛分布的3类典型生物土壤结皮(藻类结皮、地衣结皮和藓类结皮)为研究对象,在野外环境下连续一年(2010年6月至2011年5月)测定了不同类型结皮的固氮潜力、季节变化,及其对环境因子的响应特征.结果表明：整个试验期间,藻类、地衣和藓类结皮的固氮活性分别为14～133、20～101和4～28 mol·m^-2·h^-1,差异显著,这种差异主要是由结皮种类组成的差异所致.3类结皮固氮活性对环境因子的响应特征基本一致.3类结皮固氮活性与降水量关系不显著,但与试验前3天小于3 mm的降水量均呈显著的正相关关系,说明该地区3类结皮在3 mm降水条件下即可达到最大固氮速率.3类结皮固氮活性与试验期温度均呈显著的二次函数关系,随气温升高均呈先上升后下降的趋势,藻类和地衣结皮的固氮活性在超过30 ℃后即迅速下降,而藓类结皮的固氮活性在超过25 ℃后即开始下降,说明不同类型结皮具有不同的固氮适宜温度区间.3类结皮固氮活性的季节变化均表现为秋季>春季>夏季>冬季,夏季高温和冬季低温抑制了结皮固氮酶活性,而春末秋初适宜的水热条件促进了其固氮活性的提高,结皮固氮活性的季节变化主要受水热因子的共同调控.温带荒漠区生物土壤结皮在湿润条件下全年均具有固氮能力,环境因子对其氮固定的控制作用层次分明,水分是影响其固氮速率和持续时间的关键因子,在水分和碳源充足的条件下,温度则是制约其固氮能力的主要因子.     

宁波鄞州新城区城市土地利用的空间趋向性

采用梯度分析和城市土地利用程度相结合的分析方法,研究了鄞州新城区居住用地和工业用地的空间布局特征,并选择公共绿地、公共设施用地和道路等作为区位优势因素,探索城市各类用地的区位特征.结果表明： 梯度分析能够有效地与城市土地利用的空间布局相连接,定量描述城市土地利用的空间特征;鄞州新城区城市空间形态中心主要集中在距中心2 km的范围内,即城市发展的十字轴核心片区,区位优势明显,鄞州大道以南将成为新城区发展的腹地.产业结构调整后工业用地的合理变迁、核心区土地刚性条件约束下商务用地的高效集约利用、以及东南部城乡结合带的农田保护将成为鄞州新城区在未来土地利用中需重点考虑的方向.     

L-肉碱的检测方法

Ｌ 肉碱是参与生物体新陈代谢的重要物质,本文简要介绍和比较了检测肉碱的７种主要方法,即生物法、化学法、酶法、荧光法、高压液相色谱法、 Ｎ Ｍ Ｒ和放射酶法,其中以酶法、荧光法和高压液相色谱法较为常用。     

汉族左利人群的指纹研究

对111名长治市的汉族左利手者的指纹进行了分析研究, 并与138名右利手者组成的对照组进行了对比分析, 发现左利手组的双箕斗纹（Wd）显著高于对照组(P<0.005)。 Abstract　To study the distribution difference of fingerprint patterns between left-handed and normal populations of Han nationality in Changzhi area, We investigated the frequencies of fingerprint pattern combinations in one or two hands. Comparing the normal population (80 men and 58 women), the left-handed population (58 men and 53 women) posessed higher Wdrate (P<0.005).     

错位双链寡核苷酸中碱基比例的测定研究

使用碱和碱性磷酸酶降解错位双链寡核苷酸 (Poly :Ⅰ :C12 U) ,使其生成三种核苷 ,再使用反相 高效液相色谱 (RP HPLC)方法 ,分析核苷的组成 ,从而计算出PolyⅠC12 U中的碱基组成比例 ,结果表明样品中的碱基比例接近设计比例 1 2∶1。     

单核苷酸多态性及其在鸡QTL定位上的应用

单核苷酸多态性是指DNA序列上的单个碱基变异,它具有分布广、多态信息含量大、易于检测和统计分析等优点,能较好用于基因图谱构建和数量性状QTL定位研究,被称为继RFLP和微卫星标记之后的第3代基因遗传标记。本文综述了单核苷酸多态性的性质及检测技术、利用候选基因SNP进行鸡QTL定位研究的现状,并对未来SNP的应用前景进行了展望。Abstract:Single nucleotide polymorphism (SNP) refers to the change of single nucleotide in DNA sequence.Because of its high density in genomes and easy in detection and analysis statistically,SNP can be used in genetic linkage map construction and QTL mapping.Here,the characters and detecting technology of SNP,as well as the status and foreground of the use of candidate gene SNP in chicken QTL mapping are introduced.     

不同产地斑叶兰及近缘种植物中两种内酯苷类成分的含量测定

比较不同产地斑叶兰Goodyeraschlechtendaliana及近缘种植物中两种内酯苷类成分的含量,为斑叶兰药材的质量控制提供参考。采用HPLC-ELSD法,以ChromCore AQ C18 (3μm,4.6 mm×250 mm)为色谱柱,超纯水为流动相,等度洗脱;流速0.5 mL·min^–1,柱温30℃,蒸发光散射检测器雾化温度70℃;载气流速2.5 mL·min^–1,进样量5μL,测定30批不同产地斑叶兰及近缘种内酯苷类成分含量。结果表明,斑叶兰苷和金线莲苷含量的线性范围均为62.5～1500μg·mL^–1,相关系数r分别为0.9995、0.9996,精密度、重复性、稳定性的RSD均小于3%;平均加样回收率分别为101.41%和101.16%,RSD分别为1.53%和1.36%。30批斑叶兰及近缘种植物的斑叶兰苷含量在28.31～243.07 mg·g^–1之间,平均含量为134.31 mg·g^–1,存在较大的差异(RSD=38.40%);30批斑叶兰及近缘种植物的金...