鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达

BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达,设计了带有SalⅠ,NotⅠ酶切位点的引物,以已构建好的质粒pGEM-T Easy/BRD7为模板,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架,并用SalⅠ,NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX-4T-2,然后用T4 DNA连接酶将其连接,得到重组表达质粒PGEX-4T-2/BRD7,经双酶切鉴定和测序验证,表达载体构建正确.重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm105后用IPTG诱导,成功表达了一分子质量约为90 ku的融合蛋白;37℃诱导4 h后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳后,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量28.48%, 蛋白质印迹(Western-blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功.这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备,进一步开展其功能研究奠定了基础.     

鄱阳湖流域锦江水体污染胁迫下浮游细菌群落结构及交互作用

【目的】为了探索河流水体污染胁迫对浮游细菌群落的影响。【方法】本研究使用主成分分析将水体污染胁迫分为高、中、低3级,基于高通量测序技术分析了鄱阳湖流域锦江干流浮游细菌群落的多样性、组成以及交互作用。【结果】锦江污染胁迫下的浮游细菌群落优势菌群包括假单胞菌门(Pseudomonadota,13.53%–45.83%)、放线菌门(Actinobacteriota,17.05%–40.50%)、拟杆菌门(Bacteroidota,5.79%–31.56%)、蓝藻菌门(Cyanobacteria,0.41%–59.31%)和芽孢杆菌门(Bacillota,0.11%–4.81%)。其中Bacillota在污染胁迫等级下显著差异(P=0.03)。浮游细菌群落组成在不同水体污染胁迫等级下存在显著差异(P=0.046)。群落丰富度Chao1与ACE指数在低污染胁迫地区显著高于中污染胁迫地区(P=0.024和0.037),Shannon多样性指数差异不显著。共生网络拓扑特征表明,随着水体污染胁迫减小,细菌共生网络的复杂性与稳定性增强,浮游细菌群落之间的交互作用增强。【结论】污染胁迫显著改变了水体细菌群...     

单核苷酸多态性及其在鸡QTL定位上的应用

单核苷酸多态性是指DNA序列上的单个碱基变异,它具有分布广、多态信息含量大、易于检测和统计分析等优点,能较好用于基因图谱构建和数量性状QTL定位研究,被称为继RFLP和微卫星标记之后的第3代基因遗传标记。本文综述了单核苷酸多态性的性质及检测技术、利用候选基因SNP进行鸡QTL定位研究的现状,并对未来SNP的应用前景进行了展望。Abstract:Single nucleotide polymorphism (SNP) refers to the change of single nucleotide in DNA sequence.Because of its high density in genomes and easy in detection and analysis statistically,SNP can be used in genetic linkage map construction and QTL mapping.Here,the characters and detecting technology of SNP,as well as the status and foreground of the use of candidate gene SNP in chicken QTL mapping are introduced.     

黔南独山地区泥盆系法门阶–石炭系杜内阶革老河组和汤粑沟组长身贝类新认知

本文描述了在黔南独山县其林寨剖面和黎家寨剖面上泥盆统革老河组和下石炭统汤粑沟组中发现的长身贝类化石共8属10种(含未定种)。其中,在革老河组中发现有3属4种:Productella? sp.、Yanguania dushanensis、Xinshaoproductusxinshaoensis和X.quadrata;汤粑沟组中有8属9种:Productella?sp.、Hunanoproductushunanensis、Spinocarinifera qilinzhaiensis sp. nov.、Yanguania dushanensis、Y.? sp.、Xinshaoproductus xinshaoensis、Tomiproductussp.、Ozora?sp.和Ericiatiakiangsuensis。总体而言,革老河组和汤粑沟组中的长身贝类在组成上主要以Productoidea超科中Productidae科的分子为主,Productellidae科和Echinoconchoidea超科中Sentosiidae科的分子各有1种。本文记述的Hunanoproductus和Xins...     

“细胞器——系统内的分工合作”的游戏活动教学

细胞器是本章中知识点多,记忆难度较大,且内容极抽象的一课。通过"细胞海报设计""细胞器大配对"和"你划我猜"3种不同类型的活动和游戏,可让学生在快乐的游戏活动中体会知识的生成和巩固,在知识输出中体会自主学习的乐趣,并进一步改善课堂教学氛围。     

PDTX模型的研究进展

细胞源性异种移植(cell line-derived xenografts,CDX)与原发肿瘤相比失去了肿瘤的异质性和基因的多样性,在临床前的实验中不能有效评估肿瘤药物的疗效和安全性,致使临床药物高消耗而没有达到治疗疾病的目的,严重阻碍了临床药物的发展;人源性肿瘤组织异种移植(patient-derived tumor xenografts,PDTX)保持了原发肿瘤的分子学、基因学和病理学特征,而且经过在小鼠体内传代它仍保持了原发肿瘤的这些特性,为肿瘤的个体化治疗提供了更好的模型。PDTX模型的这些特性与CDX模型相比在肿瘤的个体化治疗方面更具有指导意义。本文将就PDTX模型的特征及其在肿瘤研究领域中的应用作系统阐述。     

预水解发酵碳源对铜绿假单胞菌NY3产鼠李糖脂特性及应用效能的影响研究

发酵碳源对铜绿假单胞菌NY3(Pseudomonas aeruginosa NY3)产鼠李糖脂(Rhamnolipids,Rha)的特性影响较大。研究了利用废弃动物油作为发酵碳源时,其碱预水解和酶预水解对NY3菌发酵产鼠李糖脂产量、产物结构和性能的影响,从碳源水解酸值与水解产物、鼠李糖脂组分结构和实际应用效果进行了研究。碱、酶预水解实验发现,碳源酸值由初始的19.81 mg/g分别提高到72.04 mg/g和73.75 mg/g,气质联用(GC-MS)分析检测结果表明,碱、酶预水解后,碳源均释放7种C14-C18碳链的脂肪酸,鼠李糖脂产量由未预水解的8.28 g/L分别提高到15.35 g/L和17.63 g/L。液质联用(LCMS-IT-TOF)分析结果表明,用未预水解及碱、酶预水解碳源发酵时,NY3菌所产鼠李糖脂中单糖脂含量分别为62.07%、65.67%、87.32%。利用NY3菌在中试条件下处理高浓度石化企业油污泥,发现鼠李糖脂能促进NY3菌去除油污泥中的石油烃,且促进作用强弱顺序为未预水解产Rha碱预水解产Rha酶预水解产Rha。     

鸡8个功能基因5′-侧翼区与内含子的SNP多样性比较

本研究旨在探讨鸡功能基因5′-侧翼区的单核苷酸多态性(SNP)水平。作者以白来航鸡、隐性白洛克鸡、杏花鸡、丝羽乌骨鸡、固始鸡、红色原鸡为材料,扩增了GH、DDBC1、RIKEN、RASGRP3、IGF1、THRSP、VIP及PRL共8个基因的5′-侧翼区DNA序列。扩增序列全长为8,399bp,SNP的总数为161个,平均每52bp出现一个SNP。8个功能基因5′-侧翼区核苷酸多样性的θ均值和π均值分别为0.00620±0.00110和0.00559±0.00100。比较检验表明,5′-侧翼区的SNP多样性显著低于内含子区域。5′-侧翼区是基因表达的一个重要调控区域,在分子进化和系统发生过程中承受着比内含子区域更大的选择压,其较低的SNP多样性是适应性较好的表现。Tajima检验与Fu和Li检验表明,与鸡繁殖性状显著关联的VIP基因和PRL基因很可能是人工选择或自然选择的目的基因。     

重金属诱导拟南芥原生质体DNA 损伤的单细胞凝胶电泳检测

以拟南芥原生质体为实验体系, 研究不同浓度的3种重金属离子对拟南芥原生质体的毒性和DNA损伤的差异。结果表明, 用1-5 mmol.L-1的Zn2+、Cd2+ 和Cu2+分别处理的拟南芥原生质体, 2 小时内活力逐渐下降, 并表现出明显的浓度依赖性;与相同浓度的Cd2+ 和Cu2+ 相比, Zn2+对拟南芥原生质体活力的影响程度较小, 表现出较低的毒性。单细胞凝胶电泳检测发现,用0.1-0.8 mmol .L-1的Zn2+、Cd2+ 和Cu2+ 分别处理拟南芥原生质体30 分钟, 以OTM值表示的原生质体DNA损伤量随重金属离子浓度的增加而递增; 相同浓度(0.5 mmol.L-1)的3种重金属离子相比, Zn2+对原生质体的遗传毒性明显低于Cu2+ 和Cd2+。综合原生质体活力和DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测结果, 发现Zn2+对拟南芥原生质体的遗传毒性较低, 而Cd2+ 和Cu2+的遗传毒性较高。本研究建立的拟南芥原生质体实验体系, 结合运用单细胞凝胶电泳技术, 能够快速、灵敏地检测重金属对植物细胞的遗传毒性。