小鼠胚胎干细胞(ES-M_(13))核骨架-核纤层-中间纤维结构体系的研究

本文使用细胞的选择性抽提、DGD包埋去包埋电镜制样、免疫荧光和免疫印迹技术研究了小鼠胚胎干细胞(ES-Ml_(13))的核骨架-核纤层-中间纤维(NM-L-IF)结构体系。在电镜下可以看到,ES细胞存在精细发达的核骨架结构,核骨架纤维同核纤层结构相连接,细胞质中有许多直径为10nm的中间纤维单丝。在免疫荧光分析中,使用角蛋白单克隆抗体有阳性反应,细胞质区域可以看到较强的荧光,没有极性分布现象,也没有观察到纤维状的荧光染色。ES细胞对波形蛋白和结蛋白抗体呈阴性反应,同对照组一样,只能看到非特异性的很微弱的荧光染色。在免疫印迹分析中,使用角蛋白单克隆抗体AF6检测到三条角蛋白多肽,分子量分别为65KD,62KD和52KD。     

Assembly and structure of neurofllaments isolated from bovine spinal cord

Neurofilaments (NFs) are neuron-specific intermediate filaments. The NFs were isolated from bovine spinal cord by differential centrifugation. The NFs were detected with electron microscopy and scanning tunneling microscopy (STM). Under STM, two kinds of sidearm of NFs were revealed: one was short, the other was long. They were arrayed along the 10-nm width core filaments one by one. The intervals between two adjacent long sidearms or two short sidearms were 20—22 nm, while those between two adjacent long and short sidearms were 10—11 nm. It was proposed that the rod domain of NF triplet prnteins was 3/4-staggered. The assembly properties of NF triplet proteins were also studied. Immuno-colloidal-gold labeling assay showed that NF-M and NF-H are able to co-assemble into long filaments with NF-L. NF-M and NF-H can also co-constitute into winding filaments.     

体外细胞核组装中核纤层与核膜的关系

采用非洲爪蟾卵提取物非细胞体系,以外源Lambda DNA诱导细胞核的体外组装,以此实验模式为基础,研究了细胞核体外组装过程中核纤层的组装,结果表明核纤层蛋白参与细胞核的体外组装过程,核内骨架的组装与核纤层的组装在时间上是有序的,核内骨架的组装可能为核纤层的装配提供了先决条件.在非洲爪蟾卵提取物非细胞体系中加入抗核纤层蛋白抗体,抑制核纤层的正常装配过程,核膜组装发生异常.结果提示核纤层的组装与核膜的组装是密切相关的.     

核纤层研究进展

核纤层是高等动物细胞中普遍存在的核结构。它由一至多种核纤层蛋白构成。根据蛋白质序列与生化性质分析,核纤层蛋白分为两类:A类和B类。这两类蛋自由不同的基因编码,它们具有共同的一级结构:     

辛德毕斯病毒非结构蛋白nsP2在细胞内的分布

应用免疫电镜技术,直观地显示出辛德毕斯病毒的nsP2蛋白存在于细胞核中以及它在核内的分布.将含有nsP2蛋白的一段SbV的cDNA转染细胞,结果表明,单独表达的nsP2仍可进入细胞核中.     

核体(Karyoplast,细胞去核产物)合成RNA的能力

近十年来由于细胞松弛素B(Cyto-chalasin B,以下简称CB)引起细胞群体去核的方法的建立和不断完善,为细胞核与质的相互作用关系研究提供了一个新的实验手段。为详尽地了解CB处理细胞所获的核体和胞质体的特性,以便利用其进行核质关系方面的研究,我们利用显微与电镜放射自显影技术对CB处理所获各类核体作了RNA代谢的研究。核体(Karyoplast)是外面包被着细胞质膜并带有不同量胞质的细胞核,核体本身就是研究细胞核与质相互关系的好材料。通过对核体的研究,可从中探讨大分     

影响去核效果诸因素的分析

用在角转头中垂直放置玻片的方法,对经过CB处理的HeLa、IB-RS-2、BHK—21和鸡胚成纤维细胞进行了离心去核。并在文中给出了这几种细胞的最适去核条件,去核率达90—96%。这种方法的优点是器材加工容易、操作简便、可任意调节离心角度。此外对于松胞素和秋水仙素联合处理的细胞用冲刷法去核的技术进行了探索,此法省却了离心操作,简便易行、细胞处理量大。去核率为60%左右。本文通过在较大范围内变动去核条件,说明细胞生长密度、细胞在周期中所处的时相、CB浓度、CB处理时间、离心的速度、角度、时间和温度等条件对去核率有显著的影响,并讨论了这些因素对去核产物的质量方面(形态、结构、生理活性和寿命等)的不同影响。     

介绍一些禽类移换蛋白试验的方法

禽类的移换蛋白实验开始于苏联学者1947年的工作。其后一系列苏、中、保、捷的学者继续了这方面的工作。他们的工作都表明移换蛋白能够引起禽类生活力提高和某些形态特征的变異。根据米丘林学说原理,这方面工作的成功和进一步的研究,在理论和实践上都有着重大的意义。我们在以前工作的基础上也进行了一点实验。我们之所以要做这个研究,首先是因为我们相信通过移换蛋白能够引起有机体的变異。我们在这一问题上的出发点并不仅仅根据了米丘林学说原理,还因为现在非常流行