PEG法介导转化诸葛菜下胚轴原生质体获得转基因植株

采用诸葛菜无菌苗的下胚轴组织为材料,分离原生质体,在原生质体培养基中作液体浅层暗培养,植板率为５％,植株再生频率为１００％。作者进而开展了遗传转化研究。为研究ＰＥＧ介导转化诸葛菜原生质体的影响因素,通过瞬间表达,实验了ＰＥＧ法转化子叶原生质体的过程,在此基础上将分离纯化后的原生质体与带ＨＰＴ基因的质粒ＤＮＡ（ｐＢＩ２２２）混合,ＨＰＴ基因作选择标记,ＰＥＧ介导转化;重新收集转化后的原生质体,以５×１０４／ｍｌ的密度在原生质体培养基中作浅层培养;培养１０—１５天后用２５ｍｇ／Ｌ的潮霉素（ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ）进行筛选,一月后出现少量细胞团,转入含潮霉素５０ｍｇ／Ｌ的扩增培养基扩增愈伤组织,进而转入含５０—１００ｍｇ／Ｌ潮霉素的分化培养基诱导分化成苗,分化率为１００％,转入生根培养基中生根成完整植株。抗性植株再生率为４×１０（－５）。在获得再生转基因植株后,以再生植株叶片为材料,进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交,证实外源基因已稳定整合到植物基因组中并表达,再生转基因植株频率为１０（－５）。国内外首次转化诸葛菜属植物原生质体获得成功。     

诸葛菜若干外植体再生力试验结果

用诸葛菜的不同器官、组织作外植体进行离体培养,测定其再生力,首次得到下列结果。1.用诸葛菜子叶切块进行离体培养,上述外植体产生胚状体,并再生小苗,胚状体的发生频率达100%;2.用诸葛菜花托进行离体培养,从花托直接产生小芽,以后长成小苗,花托的出芽率为78.2%;3.用诸葛菜的花药进行离体培养, 获得了混倍体花粉植株,诱导率达10%;4.用诸葛菜的子叶组织分离原生质体,原生质体经纯化后在培养基中作液体浅层暗培养,两周后将细胞团转入扩增培养基,待愈伤组织长出后,将其转入分化培养基中即形成完整植株,分化频率达100%。 Abstract:Various organs and tissues of O.violaceus were used as explants for in vitro culture to examine their regeneration ability,and the following results are reported for the first time in literaturel.Cotyledon segments of O.violaceus,when cultured in vitro,regenerated embryoids first and then plantlets.The frequency of embryoid production was 100%.2.The receptacles of O.violaceus cultured in vitro,regenerated small buds directly,which later developed into plantlets.The frequency of bud regeneration was 78.2%.3.Anthers of O.violaceus,when cultured in vitro,produced mixoploid pollen plantlets.The induction frequency of pollen plantlets was 10%.4.Protoplasts,isolated from cotyledons of O.violaceus and cultured in vitro,developed into cell colonies,calli and later plantlets.The frequency of plantlet regeneration was 100%.     

α7nAChR调控STAT3磷酸化在星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应中的作用

目的:通过建立星形胶质细胞机械性损伤模型,研究烟碱型乙酰胆碱受体α7亚单位(α7nAChR)在创伤性脑损伤后星形胶质细胞炎症反应中的作用及调控机制。方法:建立星形胶质细胞机械性损伤模型,通过ELISA检测炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-10和TGF-β的表达;利用α7n ACh R抑制剂α-BGT和激动剂PHA-543613处理星形胶质细胞,检测相关炎症因子表达,并通过Western blot检测信号传导及转录活化因子3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达;利用α-BGT和STAT3抑制剂Stattic处理星形胶质细胞,检测相关炎症因子表达。结果:①星形胶质细胞机械性损伤后,促炎因子IL-1β、TNF-α表达增加,抗炎因子IL-10、TGF-β表达降低(P0.05)。②利用α-BGT抑制α7nAChR可增加损伤后IL-1β、TNF-α的表达,减少IL-10、TGF-β的表达(P0.05);而利用PHA-543613激活α7nAChR功能,则发挥相反作用(P0.05)。③α-BGT可促进STAT3磷酸化,而PHA-543613抑制STAT3磷酸化(P0.05)。④STAT3抑制剂Stattic可减少IL-1β和TNF-α的表达,增加IL-10和TGF-β的表达,并部分阻断α-BGT对IL-1β、TNF-α、IL-10及TGF-β表达的影响(P0.05)。结论:机械性损伤后,激活α7nAChR可减轻星形胶质细胞炎症反应,而抑制STAT3磷酸化是其重要的下游机制。     

安宁河流域植物、土壤特征与钉螺分布的关系

植物、土壤是日本血吸虫的中间宿主———钉螺孳生繁殖不可缺少的重要条件。对四川凉州地区安宁河流域的血吸虫病流行区内不同环境的植被、土壤特征进行研究,有助于我们进一步了解钉螺孳生的环境特征,以便指导钉螺防治。１研究方法１．１选择安宁河流域土壤浸蚀程度不同...     

运用植物区系质量指数快速评估湿地植被恢复成效

目前通常采用的评估湿地保护和恢复成效的指标体系较为复杂, 常涉及生物学、环境科学和社会学等多个学科, 导致监测评估成本高, 并难以实现综合的定量评估, 因此有必要提出能够在较大程度上表达生态环境状况的综合生态指标。植物区系质量指数(Floristic Quality Assessment Index, FQAI)反映了植物区系中物种的生态保守性程度, 作者将其作为主要生态指标, 来验证该指标用于湿地植被恢复成效定量评估的有效性。作者以四川盆地丘陵和平原地区湿地植物为对象, 构建了区域库塘及河滩湿地植物区系质量指数计算方法与赋值表, 以成都市重要水源地——云桥湿地的3年生态恢复成效为案例进行了检验。结果表明, 在云桥湿地3年恢复期间, 植物物种组成及其比例在恢复年限间无显著差异, Shannon-Wiener指数、Pielou指数和Simpson指数在3年中也并未发生显著变化, 但生态保守性系数平均值(CC_mean)和植物区系质量指数(FQAI)均随恢复年限显著上升, 表明FQAI可以快速、有效地实现生态系统水平湿地植被恢复成效的比较和定量评估。     

甘蓝型油菜游离单细胞培养及植株再生

本文首次报道了甘蓝型油菜(Brassica napes）二倍体游离单细胞的培养并再生出了植株。从甘蓝型油菜下胚轴愈伤组织分离的游离单细胞在含有2mg/L 2,4-D和3mg/L BA的Nitsch培养基中作浅层液体静置培养时,可形成大量愈伤组织。在附加3mg/L BA人和2-6mg/L GA₃的MS培养基上,从这些愈伤组织中可高频率地诱导产生再生植株。从3个供试品种（Canadian twin, Altex和81008) 的游离细胞培养中,都获得了再生植株。其中Canadian twin的再生频率高达67%, Altex和81008的再生频率分别为41%和11.7%。     

诸葛菜的研究现状与开发前景

诸葛菜是一种十分珍贵的野生油料作物种源。从农艺性状、种子含油量、菜苔氨基酸含量、食用安全性等方面,概述了诸葛菜的研究现状。并提出了在我国开发诸葛菜系列产品,如：保健食用油、脱水保鲜菜苔、菜汁营养饮料,以及作为饲料添加剂的利用前景。     

甘蓝型油菜与紫罗兰属间杂交的植物遗传学研究

为探索属间杂种的遗传特点以及改良甘蓝型油菜油分品质,进行了甘蓝型油菜和紫罗兰的属间杂交.杂交母本为甘蓝型油菜奥罗(Brassica napus L. cv. oro),父本为紫罗兰(Matthiola incana (L.) R. Br.).将授粉7 d后的油菜子房切下,消毒后,培养于添加适当植物激素的MS培养基.从750个离体培养的油菜授粉子房中,获得了2粒成熟胚胎,其结籽率为0.26%.将胚胎取出,转接于MS培养基(添加2.0 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA),获得了丛生芽.将丛生芽分割为许多单芽,转接到新鲜培养基中,长成了22株小苗.杂种一代植株呈中间性,它的许多性状介于两个亲本之间,一些性状倾向母本,少数性状表现显著的超亲杂种优势,植株结实性差.杂种后代(F2)植株表现多样性,多数植株的性状倾向母本,能育.部分植株表现中间性、育性差,少数植株发育不良、不育.染色体研究表明,杂种一代植株为混倍体.在杂种体细胞中,许多细胞的染色体数为2n=26,为两个亲本的配子染色体数之和.杂种后代(F2)中,倾母植株的染色体数为2n=38,矮小植株的许多细胞具非整倍染色体数,如2n-1=37、2n+1=39.从杂种后代中获得了种子油分品质较好的植株,有可能用于油菜的品质育种.     

放牧强度对川西北高山草甸两个优势物种凋落物分解的影响

研究了川西北高山草甸两个优势物种垂穗鹅冠草(Roegneria nutans)和四川嵩草(Kobresia setchwanensis)凋落物在不同放牧强度下的分解及其碳氮损失率。经过一年的分解,放牧不同程度地加速了两种凋落物的分解。垂穗鹅冠草凋落物在不放牧、轻牧、中牧和重牧草地的失重率分别为26.0、27.2、29.6和32.8%;川嵩草凋落物的失重率分别为44.0,46.2,50.4和56.2%。不放牧、轻牧、中牧和重牧草地垂穗鹅冠草凋落物碳的损失率分别为26.1%、27.5%、29.4%和32.9%,氮的损失率分别为13.6%、14.4%、17.3%和19.1%;川嵩草凋落物碳的损失率分别为41.9%、44.3%、48.5%和54.4%,氮的损失率分别为39.4%、41.4%、46.4%和52.8%。研究表明,增加的放牧强度加快了两种凋落物的分解速率,加速了凋落物中碳氮的释放;同时也表明,川嵩草凋落物的分解速率要快与垂穗鹅冠草凋落物。     

瑞香狼毒对青藏高原东部高寒草甸主要物种花粉萌发和种子结实的花粉化感效应

花粉化感是一类特殊的化感作用,能够抑制其它物种的花粉萌发和种子结实。研究了瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)花粉水浸提液对其它物种花粉萌发和种子结实的潜在化感抑制作用,包括:在实验室中,用一系列浓度的狼毒花粉水浸提液对与它同花期的其它6个物种(秦艽(Gentiana macrophylla Pall.var.fetissowii),湿生扁蕾(Gentianopsis paludosa(Hook.f.)Ma var.paludosa),鳞叶龙胆(Gentiana squarrosa Ledeb.),椭圆叶花锚(Halenia elliptica D.Don var.elliptica),高原毛茛(Ranunculustanguticus(Maxim.)Ovcz.var.tanguticus)和鹅绒委陵菜(Potentilla anserina L.var.anserina))以及自身花粉进行测试,测定花粉萌发率;在野外,在其它4个物种(秦艽,湿生扁蕾,鳞叶龙胆和椭圆叶花锚)的柱头上施用上述浓度的狼毒花粉水浸提液,观察种子结实率。实验室的花粉萌发试验证明,狼毒花粉对自身花粉萌发没有自毒作用,而其它受试的所有物种的花粉萌发率随着狼毒花粉浸提液浓度的增加呈显著地非线性降低。大约3个狼毒花粉的浸提液就可以抑制受试的多数物种的50%的花粉萌发。在野外试验中,发现受试的4个物种种子结实率随狼毒花粉浸提液浓度的增加呈显著地非线性降低。狼毒可能通过花粉化感对其周围其它物种的有性繁殖存在抑制作用,但其它物种可能通过花期在季节或昼夜上的分异避免受到狼毒花粉化感作用的影响,或者通过无性繁殖来维持种群繁衍。