降纤酶治疗急性缺血性脑血管病的疗效观察

目的 观察应用降纤酶治疗急性缺血性脑血管病的疗效。方法 将急性缺血性服血管病患者105例,随机分为治疗组和对照组。治疗线54例,用降纤酶10u（体重在60kg以下得5u）加生理盐水250ml静脉滴注,每天1次,连用3天,第4天后改为隔日静滴1次,降纤酶总量达到60u;对照组51例,用复方丹参20ml加0．9％生理盐水250ml静脉滴汪,每天1次,连用14天为1个疗程。于治疗后第7天、第14天检测两组治疗前后的神经功能缺损评分和日常生活能力评分,以评价其临床疗效。于治疗后第7天、第14天检测两组治疗前后的神经功能缺损评分和日常生活能力评分,以评价其临床疗效。结果 治疗组的有效率和显效率分别达到87．03％和62．9％,而对照组的有效率和显效率分别为60．78％和37．25％,两组比较有显著性差异（P＜05）。两组治疗后的日常生活能力和神经功能缺损评分均有显著性差异（P＜0．01）,血液流变学指标有明显的改善（P＜0．01）。结论 降纤酶具有降低血浆纤维蛋白原、改善微循环、降低全血粘度等作用,是治疗急性缺血性脑血管病安全、有效的药物。     

CDK2蛋白质分子结构与其入核转运过程关系的初步分析

应用重组技术构建野生型及缺失型CDK2基因的真核表达载体,分别使野生型及缺失型(2DK2蛋白与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced-green Fluorescent Protein,EGFP)形成融合蛋白。通过脂质体介导的方法将载体转染人宫颈癌细胞系HeLa和中华仓鼠卵巢细胞系CHO,经过细胞周期同步化处理后于荧光显微镜下观察EGFP的亚细胞定位以示踪野生型及缺失型CDK2基因的表达。结果表明,野生型CDK2基因的表达产物定位于细胞核．而两种缺失型CDK2基因分别编码的CDK2蛋白N-端1～201及98～298多肽均主要定位于细胞质。以上结果提示,CDK2蛋白序列中不含有与核定位直接相关的信号,其入核过程可能是由其N-端1～97及202～298多肽范围内的部分氨基酸共同形成高级结构,并依赖此高级结构与其他含有入核信号的蛋白形成复合物,从而被带动进入细胞核的     

人牛精浆蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达

为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了基因染色体定位 .通过RT PCR检测了该基因在人体各组织中的表达情况 .并将该基因编码的蛋白进行了原核表达 .新基因的cDNA长度为 10 5 2bp ,其开放阅读框架 (ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有 4个纤连蛋白Ⅱ结构域 ,与BSP蛋白在结构上具有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedproteins ,HBRP) .该基因定位于染色体 19q13,在大肠杆菌中表达为 5 2kD的融合蛋白 .研究结果提示 ,应用RACE方法克隆了一种新的人类与BSP蛋白相关的基因 ,推测其编码蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,通过基因重组技术大量获得表达蛋白 ,对进一步研究新蛋白的生物学功能具有重要的意义 .     

一种新的精子结合蛋白HBRP在原核表达及其活性研究

为了发现和研究牛精浆(bovine seminal plasma,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用,我们克隆了人类生殖相关新基因HBRP(Human BSP—Related Proteins),本通过基因重组技术,构建了GST—HBRP融合蛋白表达质粒,在大肠杆菌中获得大量表达,并检测了该蛋白对PKC活性的影响。     

医疗大数据应用需求分析与平台建设构想

医疗大数据的应用对于临床医学研究、科学管理和医疗服务模式转型发展都具有重要意义。文章介绍了国内外医疗大数据应用现状，以及作者所在单位在医疗数据利用方面的做法经验，并从医务人员、患者、管理人员和科研人员的角度，分析了医疗大数据的应用需求。最后，结合已有实践，提出了医疗大数据应用平台的建设构想和步骤方法等。     

贲门癌中染色体8p21-p23杂合性丢失的研究

目的 研究贲门癌中染色体8p21-p23杂合性丢失的情况。方法 采用激光捕获显微切割技术获得均质的肿瘤细胞及正常的胃粘膜细胞,多重置换扩增技术扩增捕获细胞的基因组DNA。PCR结合硝酸银染色方法分析19例贲门癌染色体8p21-p23的杂合性丢失。结果 在贲门癌中染色体8p21-p23的缺失频率非常高（63.2%）,我们确定了一个最小丢失区域. 结论 进一步明确此最小丢失区域内的抑癌基因将有助于贲门癌发生机制的阐明。     

一种从人血凝块中提取基因组DNA的方法

介绍了一种新的从人血凝块中提取基因组DNA的方法,用该方法提取的DNA成功地应用于PCR和限制性酶切等后续实验中。基本过程为首先机械粉碎,然后高盐高EDTA溶液处理,含蛋白酶K和SDS的消化液变换温度消化,苯酚氯仿抽提。     

SARS冠状病毒S蛋白候选细胞受体氨基肽酶N的基因变异研究

氨基肽酶N是人类冠状病毒HCoV 2 2 9E的细胞受体 ,可能为SARS冠状病毒 (SARS CoV)S蛋白的受体。应用变性高效液相色谱 (DHPLC)技术筛查了正常无关个体中氨基肽酶N编码基因ANPEP的全部外显子及其两侧部分内含子序列。对筛查中DHPLC峰型提示有基因变异存在的DNA片段行PCR产物直接测序 ,共发现 9种单核苷酸多态 (SNP) ,其中 4种为非同义SNP ,分别为T32 1M(96 2C >T)、S6 5 1L(195 2C >T)、S75 2N(2 2 5 5G >A)和G76 4R(2 2 90G >A) ;其余 5种SNP为T795T(2 385C >T)、IVS7+17G >A、IVS14 16A >G、IVS17+12C >G和IVS17+44C >T。这些SNP的发现 ,为SARS CoV的宿主遗传因素研究 ,特别是发现SARS CoV感染和SARS发病的易感基因或抗病基因 ,提供了遗传标记。     

微生物厌氧氨氧化耦合铁还原的研究进展及展望

厌氧氨氧化耦合铁还原[ammonium oxidation coupled to Fe(Ⅲ) reduction, Feammox]作为一种连接氮循环和铁循环之间的氮代谢途径,在自然界中氨氮转化过程中起到了重要作用。系统研究Feammox驱动的氮铁的生物地球化学耦合过程及其受控因素,有助于深入理解地球元素循环的微生物机制,也有助于揭示Feammox在缺氧地质历史时期对古海洋氮库演变和含铁矿物形成过程中的作用。本文从Feammox发展历史、相关微生物、影响因素和潜在地质意义等方面综述了Feammox的研究过程和研究内容,并对Feammox的未来研究方向提出展望。     

中国人群中STK15基因内两种非同义SNP的连锁不平衡和单体型分析

STK15基因编码一种丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,哺乳动物细胞中其过量表达将导致中心体扩增、染色体不稳定和细胞癌变。STK15基因外显子3中有3种非同义单核苷酸多态(SNP),即：91A→T(131F)、169G→A(V571)和311C→T(S104L)。新近研究发现,91A→T与人类肿瘤遗传易感性相关。应用PCR-RFLP技术确定了91A→T(131F)和169G→A(V571)两种SNP在中国人群中的基因型和单体型。采用巢式PCR方法扩增了193例正常个体的DNA样品,通过错配正向巢式内引物引入EcoRⅠ酶切位点。巢式PCR扩增产物用限制性内切酶EcoRⅠ和ACCⅡ双酶切消化,其中EcoRⅠ能酶切91A,AccⅡ能切开169G,用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法鉴定双酶切结果,发现了4种可能的单体型中的3种,其单体型频率分别为：p(91A-169G)=68．65％,p(91T-169A)=10．88％,p(91T-169G)=20．47％,p(91A-169A)=0％;它们组成的6种基因型及频率分别为：91A-169G／91A-169G(46．11％),91A-169G／91T-169A(14．51％),91A-169G／91T-169G(30．57％)．91T-169G／91T-169G(3．11％),91T-169G／91T-169A(4．15％),91T-169A／91T-169A(1．55％)。等位基因及单体型数据分析结果表明,91A→T(131F)和169G→A(V571)之间存在连锁不平衡。