人生长激素慢病毒载体的构建及其在鼠骨骼肌成肌细胞中的表达

构建能表达人生长激素(hGH)的pLentivirus6/V5-hGH载体,并实现hGH基因在骨骼肌成肌细胞中大量、长期和稳定的表达。体外培养SD鼠骨骼肌成肌细胞,并通过免疫组织化学方法鉴定所得细胞、用台酚兰染色确定培养细胞的活性并绘制生长曲线。将目的基因hGH亚克隆到真核细胞表达载体pLenti6/V5-D-TOPO载体上,构建重组质粒pLentivirus6/V5-hGH。将pLenti6/V5-hGH及阳性对照质粒pLenti6/V5-EGFP分别用Lipofectamin2000介导转染体外培养的SD乳鼠骨骼肌成肌细胞。在激光共聚焦扫描显微镜下计数,确定阳性对照质粒的转染数,从而估计该基因的转染效率。加入筛选试剂以获得稳定表达异源生长激素(GH)的成肌细胞。收集转染及筛选后的细胞培养基,用放射免疫分析法(RIA)检测重组人生长激素(rhGH)的表达水平。聚合酶链式反应法(PCR)及DNA测序显示hGH基因成功地插入到pLenti6/V5-D-TOPO载体中;阳性对照质粒转染细胞24h后,在激光共聚焦显微镜下观察,其转染效率达40%以上。检测收集的上清,与对照组相比,有极显著差异(P<0.01),观察至第8周,rhGH仍持续稳定表达。通过检测培养的chang-liver肝细胞上清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的水平,验证了rhGH的生物学活性。实验通过培养高纯度的成肌细胞,构建了能在真核细胞内表达hGH的重组质粒pLenti6/V5-hGH,实现了hGH基因在骨骼肌成肌细胞中大量、长期和稳定的表达,并且获得的rhGH具有较强的促进肝细胞分泌IGF-1的能力。     

一种抗革兰氏阳性致病菌新型靶酶——分选酶

许多革兰氏阳性菌的表面蛋白是经过一种被称为分选酶的半胱氨酸转肽酶的作用而锚定到细胞壁上,由于表面蛋白在病原菌的致病性方面起关键作用,分选酶有可能成为降低革兰氏阳性菌致病性的药物靶点.目前,通过对金黄色葡萄球菌中分选酶A(SrtA)的研究,已初步阐明分选酶的作用机制及其活性位点,与此同时,一些SrtA抑制剂的初步鉴定为今后抑制剂更深层次的筛选提供了基础.     

海南隔距兰属植物6个种的核型分析

采用压片法对海南产隔距兰属植物6个种,即：大序隔距兰Cleisostoma paniculatum（ker—Gawl．）Garay、短序隔距兰C．striatum（Rchb.f．）Garay、短茎隔距兰C.parishii（Hook．f.）Garay、金塔隔距兰C．filiforme,（Lindl．）Garay、尖喙隔距兰C.rostratum（Lodd．）Seidenf．、红花隔距兰C．williamsonii（Rchb．f）Garay的染色体数目和核型进行了研究。结果如下：大序隔距兰2n=2x=38：36m＋2sm;短序隔距兰2n=2x=38=2M＋36m;短茎隔距兰2n=2x=38=2M＋34m＋2sin;金塔隔距兰2n=2x=38=38m;尖喙隔距兰2n=2x=38=36m＋2sin;红花隔距兰2n=2x=38=34m＋4sm（2SAT）。主要由正中部着丝点区染色体组成。除尖喙隔距兰核型分类为1A型外,其他的都为1B型。     

粗枝崖摩中一个新的三萜(英文)

Five compounds were isolated from the EtOH extraction of the stem of Amoora dasyclada (How et T.Chen) C.Y.Wu (Meliaceae). On the basis of spectroscopic methods, their structures were elucidated as 24, 25-epoxy-tirucall-7-ene-3, 23-dione (1),24,25,26,27-tetranortirucall-7-ene-3-oxo-23(21)-Iactone (2),taraxerone (3),taraxerol (4)and β-sitosterol (5).Among them, compound 1 was a new triterpenoid, compounds 3-5 were firstly obtained from this plant; compound 2,an tetranortriterpenoid, was firstly isolated from natural sources, and its NMR data were assigned for the first time. Moreover, the △^7-bond and the Me-14 in compound 2 were never changed, which has never been found in other tetranortriterpenoids. And the biosynthetic pathway of tetranortriterpenoid was further discussed.     

中国的恋岩花属(爵床科)植物

恋岩花属 Echinacanthus Nees Nees in Wall.Pl.As.Rar.3:75,90.1832 et in DC.,Prodr.11:168. 1847;Benth.in Benth.＆ Hook.f.Gen.Pl.2(1—2):1064,1080.1865; C.B.Clarke in Hook.f.Fl.Brit.Ind.4:414.1884;Lindau in Engler, Bot.Jahrb.18:60,63,Taf.I,fig,14,1894 et in Engler u.Prantl,Nat. Pflanzenf.Ⅳ.3B:301.1895. 花两性;萼5深裂几及基部,裂片等大;花冠紫色,很少黄色,冠管圆筒状,喉部扩大呈钟形,冠檐近辐射对称,5裂,裂片近等大,旋转状排列;雄蕊4,二强,花丝     

茂兰喀斯特区圆果化香的种内和种间竞争强度分析

为了探讨喀斯特区圆果化香(Platycarya longipes)群落内物种间的竞争关系,该研究通过对茂兰国家级自然保护区圆果化香群落内36株对象木及1502株竞争木的调查,结合Hegyi的单木竞争指数计算了喀斯特圆果化香的种内和种间竞争强度.结果显示:(1)圆果化香的种内竞争强度(387.05)显著高于其种间竞争强度...     

病毒快速诊断

<正>我们对病毒性病的流行病学、自然史和发病机理的现行认识主要基于实验室病毒分离和血清学试验所得到的资料。实验室的技术使我们有可能鉴定病原体、监视流行病、采取和评价预防措施,甚至对个别病人可作出诊断。这些技术也直接导致研制病毒疫苗,这对卫生工程技术人员为减少传染病对全世界人民的影响是很有效的。然而,现行的病毒诊断技术既不够快速,也不足以广泛用于明显改变对病人的处理。     

人乳头状瘤病毒与肛管癌关系——PCR、斑点杂交、免疫组化、原位杂交分析

用聚合酶链反应、斑点杂交、原位杂交、免疫组化技术检测７２例肛管癌标本，ＰＣＲ扩增１９例鳞癌１例阳性（５％），斑点杂交证实为ＨＰＶ１６型，免疫组化发现ＨＰＶ抗原不仅在癌巢中，还在癌周上皮浅层和正常腺体中分布，但原位杂交检测阴性。其余标本检测均呈阴性。研究表明本组肛管鳞癌与ＨＰＶ感染关系不密切，但提示ＨＰＶ可以感染腺上皮，为其与肛管腺癌关系研究提供了一条线索