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401.
402.
H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的原核表达及间接ELISA方法的初步建立 总被引:15,自引:1,他引:14
根据GenBank公布的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,用PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒HA1基因, 将该片段定向插入到原核表达载体pET_32a(+)中,构建原核表达载体pET_HA1。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3), 经IPTG诱导, HA1基因获得表达, 重组蛋白以包涵体的形式存在。通过改变IPTG的浓度和诱导时间
, 确定了表达HA1基因的最佳诱导条件: IPTG终浓度为0.8mmol/L,诱导时间为3h。Western blot分析表明表达产物具有良好的免疫学活性。以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测H5亚型AIV抗体的iHA_ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为4μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶200, 阳性标准初步定为:OD待检血清>05,且
OD待检血清/OD阴性血清>2。 相似文献
403.
404.
共生菌在褐飞虱致害性变化中的作用 总被引:17,自引:0,他引:17
研究了不同虫源和致害性褐飞虱Nilaparvata lugens种群体内共生菌数量动态及其对褐飞虱在抗虫品种上的取食选择、生长发育、繁殖以及氨基酸转移酶活性的影响。结果表明,褐飞虱田间种群的致害性与其体内共生菌数量有关。广西南宁种群雌成虫体内的共生菌数量显著地高于浙江杭州和龙游两个虫源的雌成虫体内共生菌数量,而已纯化的3个不同致害性生物型体内的共生菌数量无显著差异。取食抗性品种能显著减少生物型Ⅰ雌成虫体内的共生菌数量。缺乏共生菌时,生物型Ⅰ、Ⅱ若虫对水稻品种TN1和ASD7的选择性增大,而对Mudgo的取食选择性下降。尽管缺共生菌的3个生物型在已适应的和不适应的感虫和抗虫品种上的若虫存活率和雌成虫产卵量均下降,若虫历期明显延长,但在已适应品种上的变化程度明显小于在不适应的抗虫品种上的变化程度。共生菌还明显影响成虫体内丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶的活性。这些结果证明体内共生菌的数量和质量在褐飞虱对水稻致害性的变化中发挥了重要作用。 相似文献
405.
进行有性生殖的植物可以通过两个途径——花粉或者种子——来传递它们的基因 (即适合度 )。雌雄同体的植物不仅可以依靠种子生产获得雌性适合度 ,而且还可以依靠花粉途径获得雄性适合度。从种群角度看 ,这两个途径完全是均等的 ,在重要性上并没有什么差别。每个二倍体生物都只有一个父亲、一个母亲。对于一个繁育种群来说 ,通过种子途径传递的基因与通过花粉途径传递的基因在数量上必然是相等的 ,虽然不同个体之间可能存在着这样或那样的差别。早期的植物学家几乎把注意力全部集中在种子生产上 ,基本上忽略了植物个体的雄性适合度组分 ,似乎… 相似文献
406.
407.
通过对南温带和北亚热带生长的杜仲不同月份次生代谢物含量与物候期关系的研究,发现杜仲次生代谢物合成积累的第一次高峰期出现在“芽开绽期”后的70d左右;第二次高峰期出现在“落叶盛期”。当掌握了杜仲次生代谢物合成积累高峰期(最佳采收期)的物候期时,无论南方、北方,也无论高山、平原地区,就可根据这一物候期,大致估算出该地区杜仲的最佳采收期。 相似文献
408.
409.
410.
应用RNA原位核酸杂交检测乳腺癌石蜡切片中ER mRNA、PR mRNA表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:制备地高辛标记的寡核苷酸探针,检测乳腺癌石蜡切片中雌激素受体(ER)mRNA、孕激素受体(PR)mRNA表达。方法:应用RNA原位核酸杂交(RISH)和免疫组化(IHC)检测技术,结果:(1)278例乳腺癌石蜡切片ERmRNA,PRmRNA阳性率分别为67.3%和61.5%,阴性率分别为32.7%和38.5%,ERmRNA,PRmRNA双阳性,双阴性分别为54.3%和25.6%,ERmRNA阳性PRmRNA阴性或ERmRNA阴性PRmRNA阳性率为20.1%。(2)RISH法的mRNA、PRmRNA阳性率分别为67.3%和61.5%均高于IHC法ER、PR的48.9%和41.2%(P均<0.01)。(3)ERmRNA与ER、PRmRNA与PR的阳性和阴性符合率分别为7%和75.95。(4)杂产信号在乳腺癌细胞中的分布可分为,柱状上皮的胞质的上下方,胞质内均匀或近胞膜,核周偏位和核内外分布。(5)ERmRNA与ER、PRmRNA阳性率与组织学级别有关,Ⅱ级组中RV的阳性率为83.5%分别高于Ⅰ组中62.4%和Ⅲ组中54.5%(P<0.01),Ⅰ、Ⅱ级组中PRV的阳性率为66.7%,67.3%,均高于Ⅲ组中50.6%(P<0.05)。结论。结论:地高辛标记的ER、PR寡核苷酸探针和RISH是一种较为理想的检测乳腺癌组织中ERmRNA和PRmRNA的分子检测技术。 相似文献