双台子河口沉积物中细菌多样性分析

【目的】掌握双台子河口沉积物中细菌多样性及其群落结构的季节变化特征。【方法】于2009年4月、7月、10月和12月共4个航次在内陆河流入海口处进行四季样品的采集, 采用PCR-DGGE技术对沉积物中细菌多样性进行分析。【结果】通过序列比对发现, 该处沉积物中的细菌主要归属于5个细菌类群, 分别为变形菌门(52.6%)、放线菌门(15.8%)、拟杆菌门(10.5%)、酸杆菌门(5.3%)以及绿弯菌门(5.3%), 此外还有一部分分类地位尚不明确的细菌(10.5%)。在四季样品中变形菌门(52.6%)为优势菌群, 而在变形菌门中, δ亚群又占绝对优势地位。实验结果还显示四季沉积物中细菌Shannon-Wiener多样性指数范围为1.84?2.79, 且春夏两季沉积物中的Shannon-Wiener多样性指数比秋冬两季沉积物中Shannon-Wiener多样性指数大。【结论】双台子河口沉积物中的细菌多样性符合典型河口沉积物中细菌多样性的特征; 低温能导致沉积物中细菌多样性的减少。本研究为初步掌握双台子河口沉积物中细菌种类和组成状况提供了一定的参考, 同时也为该处海洋环境的监测及生物资源的保护提供了科学依据。     

云南省发现藏南角蟾及其蝌蚪描述

2019年9月开展第二次青藏高原科学考察时,在云南省贡山县独龙江乡采集到一系列角蟾属标本。基于线粒体16S rRNA及COI基因序列的分子系统学分析和形态特征比较结果将其鉴定为藏南角蟾(Megophrys periosa),为云南省分布新记录种。本文还首次描述了该物种的蝌蚪形态特征。     

豌豆茎基腐病病原菌分离鉴定及其对杀菌剂的敏感性测定

豌豆(Pisum sativum)是我国重要的豆类经济作物, 病害对豌豆生产造成重大经济损失。通过形态学观察、分子鉴定以及致病性测定, 最终确定引起豌豆茎基腐病的3种病原菌分别为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、芸苔链格孢菌(Alternaria brassicae)和格氏镰刀菌(F. grosmichelii), 优势菌株为尖孢镰刀菌, 分离率为53.6%。室内毒力测定结果表明, 5种供试杀菌剂对3种病原菌的菌丝生长均有抑制作用, 其中咯菌腈和戊唑醇的抑菌效果最好。研究结果为豌豆茎基腐病的防治提供了科学依据。     

抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析

本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。     

从一粒花粉到一棵植株

花粉单倍体育种中,花药离体培养能否成功的关键之一是花粉的年龄。自然条件下花粉最初只有一个核,称为单核花粉,以后经过一次有丝分裂产生一个营养核和一个生殖核,称为两核花粉。营养核不再分裂,生殖核再经一次有丝分裂成两个精子,称为三核花粉。诱导单倍体最好用单核中晚期(单核靠近质膜时)的花粉。取下合适的花蕾或幼穗先经消毒灭菌,再在无菌条件下取出花药,接种到培养基上,培养条件对花粉的发育有十分明显的影响,一般进行花药培养的温度约在23—28℃之间,需给于适当的光照。由花粉长成单倍体植株一般有两条途径:一是由花粉分裂形成愈伤组织,再将愈伤组     

与BT型细胞质雄性不育水稻相关联的双链RNA

以改进的Kemble′s方法提取BT型水稻细胞质雄性不育系及相应保持系线粒体核酸,在电泳分离后的不育系线粒体核酸中发现一特异双链RNA(dsRNA)分子,进一步实验表明,它是线粒体外的成份。与真菌中普遍发现的dsRNA病毒类颗粒(virus-like particles,VLP)相似,这种颗粒也能以细胞质遗传的方式稳定遗传。在表现为杂种优势的F_1代(不育系×恢复系)也发现有这种颗粒,但在F_1代黄化苗相对成熟的基部,此颗粒相对线粒体有减少的趋势,推测是因为F_1核背景不适合此VLP的生存而逐渐被排斥。电镜观察估测dsRNA分子量为6.0×10~6。这种VLP在BT型水稻细胞质雄性不育系中的普遍存在及其遗传行为表明其与不育可能有关。     

依赖于DNA的RNA聚合酶的研究——Ⅴ.615小鼠肝RNA聚合酶B(Ⅱ)的免疫学特性研究

用615小鼠肝RNA聚合酶B免疫母鸡获得了抗血清。在免疫扩散实验中,这种抗血清和615小鼠肝RNA聚合酶B之间形成清晰的沉淀线;与L615(可移植性小鼠白血病)小鼠及大鼠肝RNA聚合酶B之间形成弱的沉淀线;而与615小鼠肝RNA聚合酶A和C以及大肠杆菌RNA聚合酶之间不形成沉淀线。这种抗血清对615小鼠肝RNA聚合酶B离体转录活性有明显的抑制作用,而对大肠杆菌的RNA聚合酶没有抑制作用。在免疫扩散实验中,这种抗血清可以和不同批号的615小鼠肝RNA聚合酶B产生沉淀线。 这种抗血清和615小鼠肝RNA聚合酶B形成免疫沉淀后的离心上清液电泳图谱中,血清免疫球蛋白的区带消失了。     

基于CRISPR/Cas9技术AEG-1基因敲除神经细胞系的构建及AEG-1基因敲除介导的神经细胞周期阻滞和细胞凋亡抑制

星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)是近年来研究较多的癌基因,但在神经系统疾病方面研究尚少。AEG-1与神经退行性疾病有关,然而其具体作用机制尚不明确。本研究通过设计靶向AEG-1 sgRNA序列并合成相应寡核苷酸,将其克隆到GV392质粒中,构建sgRNA/Cas9二合一表达载体,并进行慢病毒包装纯化。用慢病毒感染小鼠海马神经元HT22细胞,进行药物筛选和sgRNA活性鉴定,建立稳定的AEG-1基因敲除的细胞系;并进一步观察神经元HT22细胞的增殖与凋亡能力。结果显示,成功构建了3种靶向AEG-1基因的sgRNA/Cas9二合一表达载体。所设计的sgRNA的插入序列和开放阅读框架完全正确,成功建立了AEG-1基因敲除的稳转神经细胞系。进一步研究表明,AEG-1敲除后的神经HT22细胞与正常神经HT22细胞相比,细胞突起数目减少, 细胞周期阻滞,细胞凋亡率减少。以上结果为后续进一步研究AEG-1与神经系统疾病关系奠定了基础。     

强力安对食用菌生产中杂菌的毒力测定

试验利用滤纸片、管碟抑菌圈法测定了强力安杀菌剂对木霉TrichodermaviridePers.exFr、链孢霉MoniliasitophilaMont等食用菌生产上的杂菌的毒力,结果表明强力安具有明显的抑菌、杀菌作用。试验还测定了强力安对食用菌的作用,结果表明强力安对平菇Pleurotusostreatus(JacexFr)Quel、金针菇Flammulinavelutipes（Fr）Sing具抑制力,而对黑木耳Auriculariaauricula(l.exHook)Underw、香菇Lentinulaedodes(Berk)Pegler则未发现抑制作用。根据强力安对供试菌的最低抑制浓度,作者提出了生产实际上的用药浓度,以供参考。