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本文报道了用点免疫印迹法(DIBA)检测单头桃蚜(Myzus persicae)和棉蚜(Aphis gossypii)所带黄 瓜花叶病毒(CMV)的试验结果,作者摸索出的DIBA法操作程序用于检测提纯的CMV最低下限浓度为0.16ng/ml,即每2μl样品含0.32pg抗原.这样的灵敏度是可以检测出单头蚜虫所带CMV的。这种操作程序是将蚜虫口针截取下来,浸入适当的缓冲液(2—5μl)内。这不仅保证了CMV病毒粒子充分地从蚜虫口针上释放出来.形成较高的浓度,而且极大限度地减少了非病毒物质对检测的干扰,因此就克服了从单头介体昆虫上检测所带植物病毒时常遇到的病毒浓度太低和非病毒抗源干扰两大困难。试验还表明。用这种DIBA法检出的蚜虫带毒率同生物测定试验检出的蚜虫传毒率有很好的一致性。显然,在蚜传非持久性病毒检测技术上的这一突破,对于植物病毒病流行学研究具有重要意义。 相似文献
63.
HY5(ELONGATED HYPOCOTYL 5)转录因子在花青素的生物合成方面具有重要的作用。该研究以‘全红’杨叶片为材料,克隆了PdHY5基因,对其进行生物信息学分析;并通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,对其进行功能分析。结果显示:(1)PdHY5基因开放阅读框(ORF)长度为510 bp,共编码169个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,‘全红’杨PdHY5蛋白具有bZIP家族蛋白的保守结构域,与毛果杨PtHY5蛋白亲缘关系最近。(2)成功构建过表达载体pNP1302 35S PdHY5,经潮霉素筛选获得了4个转基因烟草株系(S1~S4)。(3)qRT PCR结果表明,PdHY5基因在4个过表达株系中的表达量显著高于野生型(WT),且S4株系的表达量最高, S1最低;同时过表达株系的花青素生物合成途径关键基因CHS、F3H及FLS的表达水平较WT均显著上调。(4)叶片花色素苷的相对含量在转基因烟草株系S2、S3、S4中较WT显著上调,分别增加了128.23%、97.36%和134.20%。研究表明,过表达PdHY5基因调控了烟草本身花青素生物合成途径中结构基因的表达,从而促进了花青素的积累。 相似文献
64.
薄层扫描法测定寡核苷酸含量 总被引:6,自引:4,他引:2
建立了薄层扫描测定寡核苷酸含量的新方法.与传统方法相比,该方法具有简单、微量、样品间无交叉污染等优点,该方法的线性方程 Y=-155.7+0.1428X),相关系数(r=0.9989),线性范围(10—3000ng),平均回收率(97.33%)及平均变异系数(5.5%)均属优良. 相似文献
65.
66.
苯酚在蚕桑生态系统中的积累和迁移潘如圭,吴长年,陈为民,管竟芳,王静江,陈德梅(江苏省植物研究所南京210014)(江苏省浒墅关蚕种场)AccumnulationaudMigrationofPhenolinSericulturalEcosystem.... 相似文献
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68.
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(1) 浙江产蝮蛇蛇毒中含有三种具有精氨酸酯酶活力的组分。它们分别是激肽释放酶、类凝血酶及类溶血纤维酶。其中类凝血酶的精氨酸酯酶活力最高,约占总酯酶活力的60%。(2) 提纯后的类凝血酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈一条区带。经凝胶过滤及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,其分子量约43,000。氨基酸组成分析表明含有较多的酸性氨基酸及脯氨酸,此外还含有约6%的中性糖,9%的己糖胺及3.3%的唾液酸。(3) 类凝血酶能直接使血纤维蛋白原凝聚,水解BAEE的活力约是胰蛋白酶的2.7倍,K_m为3.4×10~(-4)M,高于其它已知的蝮亚科蛇毒类凝血酶活力。它不作用于BANA、BAPA及其它蛋白底物。蛇毒类凝血酶与人凝血酶一样,对专一萤光底物Boc-Val-Pro-Arg-MCA都有明显活力,但其凝结血纤维蛋白原的活力却远低于人凝血酶。(4) 类凝血酶能被DFP及PMSF所抑制,但抑制速度缓慢,不能被胰蛋白酶的专一抑制剂TLCK所抑制,因而是专一性很强的丝氨酸蛋白酶。 相似文献
70.