大鼠腹腔异位心脏移植模型建立及改进

目的:建立一种快速有效的大鼠腹腔异位心脏移植模型。方法:采用SD大鼠作为受体,Wistar大鼠作为供体,行同种异位腹腔心脏移植,术后给以CsA5 mg/kg/d灌服,心脏移植手术方法采用改良的Ono术式,观察改良的腹腔异位心脏移植各步骤所需时间、术后成功率及主要并发症发生率。结果:共建立40只大鼠异位心脏移植模型,手术成功率92.5%。动脉吻合时间12.5±2.3min,静脉吻合时间12.3±1.5 min,供心缺血时间37±3.5 min,受体血管阻断时间34.2±2.6 min,总手术时间90.2±4.8 min,出现的主要并发症为出血和供心复跳失败(各占5%、2.5%)。结论:改进的大鼠腹部异位心脏移植技术是一种简便、快速、有效、成功率高的模型制作方法。     

蛋白质相互作用实验技术的最新进展

蛋白质相互作用的研究, 是揭示生物体正常生长发育及其应对各种生物或(和)非生物胁迫的分子机制及其调控网络的重要途径。文章综述了近年来发展起来的研究蛋白质相互作用的常用实验性方法, 如酵母双杂交系统、串联亲和纯化、免疫共沉淀、GST Pull-down、双分子荧光互补、荧光共振能量转移、表面等离子共振分析, 介绍了其原理、发展进程, 并分析了其优缺点。     

三峡地区特有植物荷叶铁线蕨的群落特征及其保护对策

荷叶铁线蕨(Adiantum reniforme var．sinense)是三峡库区特有植物,国家二级保护物种,仅分布于重庆市万州区和石柱县。采用随机样方法对该物种的生境和群落特征进行了调查,讨论了十多年来该物种的种群动态和群落演替,并提出了适宜的保护对策。研究结果表明：荷叶铁线蕨主要集中分布在武陵、新乡、燕山、溪口等乡镇,位于长江两岸纵深5km内、海拔80～480m之间的低山丘陵地区;该物种的野生资源量已锐减,其种群正急剧缩小,种群平均密度仅为0．55蔸／m^2;大多数分布点位于河沟边西南坡向的崖壁或灌丛中,光照和空气湿度对该物种的生长较为重要;该物种在群落中处于伴生地位,其所在群落有4种类型,即：化香-槲栎-芒群落(Ass．Platycarya strobilacea-Quercus aliena-Miscanthus sinensis)、盐肤木-鸢尾群落(Ass．Rhus chinensis-Iris japonica)、水麻-细穗腹水草群落(Ass．Debregeasia edulis-Veronicastrum stenostachyum)和黄荆条-海金沙群落(Ass．Vitex negundo-Lygodium japonicum);荷叶铁线蕨所在群落共有物种189种,其中乔木5种、灌木86种、草本89种、藤本9种,且多为单叶和落叶类型,生活型以高位芽植物为主。在综合分析荷叶铁线蕨分布现状和特点的基础上,提出了相应的保护对策。     

免疫胶体金法提取环境标本中细菌DNA技术

将抗-DNA单克隆抗体标记在胶体金颗粒上制成免疫胶体金试剂,提取标本中DNA,直接用于PCR检测,从而建立一种简单、快速、高效的免疫胶体金方法提取环境标本中的DNA。结果表明：应用免疫胶体金试剂可有效去除环境标本中PCR抑制剂,浓缩模板,提高PCR检测敏感度3～4个数量级。操作步骤简单,无需使用有机溶剂,避免环境污染,吸附了DNA的免疫胶体金可直接用于PCR扩增。研制了免疫胶体金试剂并确定其最佳反应条件,有效提高PCR技术在检测现场环境标本中的敏感性和实用性。     

HIV-1跨膜蛋白gp41的截短及表达

将HIV-1跨膜蛋白gp41进行截短,在大肠杆菌中进行表达并纯化。PCR扩增gp41的部分编码基因,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用EcoRI和Sal I切下目的基因,并构建到表达载体pGEX-4T3上,导入宿主细胞BL21(DE3),用IPTG诱导表达,表达产物用亲和层析进行纯化并作相应鉴定。截短的HIV-1跨膜蛋白gp41能直接在大肠杆菌内进行表达,利用亲和层析能方便地将目的蛋白进行纯化,为跨膜蛋白的进一步应用打下基础。     

衣原体疫苗研究进展

衣原体是一类专一细胞内寄生的人兽共患病病原体,所引起的动物及人类疾病相当广泛。本文以亚单位疫苗及DNA疫苗为重点,对衣原体疫苗的研究状况做了简要的介绍。     

呼肠孤病毒与SARS相关的形态学依据

SARS患者病理尸检肺组织样品分离病毒出现细胞病变的Hep2培养细胞,按常规制作超薄切片,透射电镜下观察.电镜下,检出在感染细胞内复制、组装的呼肠孤病毒及其包涵体.病毒粒子衣壳立体对称、无包膜、直径在60～80nm.成熟病毒粒子核心致密常排列呈晶格状,不成熟病毒粒子核心空亮.数目不等的上述两种病毒粒子、长短不等的微管样结构和病毒浆常在核旁胞质内组成大小不等、无定形的病毒包涵体.此发现进一步提供了呼肠孤病毒感染有可能与SARS相关的形态学依据.     

红鲫实验动物含肉率及营养成分分析

目的探讨红鲫实验动物的营养需要、科学配制红鲫饲料。方法用常规方法测定红鲫幼鱼、红鲫成鱼的含肉率及肌肉营养成分。结果红鲫幼鱼、红鲫成鱼的含肉率为46．34％、42．35％;红鲫幼鱼、红鲫成鱼肌肉（鲜样）中分别含水分79．11％、78．49％,粗蛋白质12．47％、14．72％,粗脂肪6．95％、4．37％,粗灰分1．01％、1．41％,无氮浸出物0．47％、1．07％,能量5．65kJ／g、5．24kJ／g,其E／P值（能量蛋白比）为45．32kJ／g、35．69kJ／g。结论红鲫幼鱼、红鲫成鱼含肉率、肌肉营养成分有一定差异。     

DNA提取方法的研究进展

样本DNA的提取是PCR反应的关键步骤。本文介绍了近年来国内外几种常用的DNA提取方法,如：传统法、螯合树脂法、玻璃粉法、磁珠法、免疫亲和法等,并对各种方法的优缺点进行了综合评述。     

鹦鹉热衣原体B细胞表位的表达及抗原鉴定

利用噬菌体PⅢ蛋白为载体对鹦鹉热衣原体单抗17筛选得到的B细胞抗原表位进行了研究,利用改构后的原核表达载体pQE30,构建含有B细胞表位基因的重组表达质粒,表达的蛋白经ELISA及Western Blot实验证实能够与单抗C17发生特异反应,蛋白免疫动物后得到了抗鹦鹉热衣原体的抗体,验证了所筛选表位的真实性。