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报道大肠杆菌核糖体蛋白质S1 2或L2 4突变体均可以在翻译层次上抑制λN基因表达 .为研究其机理 ,用DNA外切酶Ⅲ(DNAExoⅢ)对λN lacZ融合基因上的λN基因部分进行了 5′→ 3′的缺失 ,以期改变λN基因的TIR(Translationalinitiationregion)或编码区 .经DNA序列分析共得到 2 3种缺失的λN lacZ融合基因 .比较它们在野生型菌株与核糖体蛋白质突变体内的β 半乳糖苷酶活性的结果表明 :( 1 )核糖体蛋白质S1 2突变体可以影响 30S小亚基同λN基因的TIR识别与结合 ,从而不利于 30S起始复合物形成 ,降低了翻译起始效率 ;( 2 )λN基因的编码区也是造成它在S1 2突变体内表达下降的原因 ;( 3)核糖体蛋白质L2 4突变体抑制λN基因表达的原因与翻译起始和λN基因 5′端的编码区无关 ,而可能与其 3′端结构基因有关 相似文献
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利用枯草杆菌碱性蛋白酶E基因的信号顺序构建分泌表达载体 总被引:7,自引:0,他引:7
本文利用枯草杆菌碱性蛋白酶基因E(aprE),对建立枯草杆菌分泌表达的载体-宿主系统作了探讨。首先用大肠杆菌-枯草杆菌穿梭的启动子克隆质粒pGKV210对aprE的启动子功能进行检测,发现用E.coli作为研究aprE表达信号的“中间宿主”是可行的;然后在穿梭质coli作为研究,aprE表达信号的“中间宿主”是可行的;然后在穿梭质粒,进而构建了基于aprE启动子和信号顺序的分泌表达载体pSP1和p 相似文献
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λ Nam 7除其cI基因是cI 857温度敏感突变外,其N基因携有amber无义突变,故在Eseherichia coli A19(met,thi,his-95,rna-19,rel-1)上不能增殖。λcI 857只有cI 857温度敏感突变,其N基因是野生型,所以能以E. coli A19为宿主进行增殖。λcI 857和λ Nam7只有1个N基因之差。λcI 857在A19及其衍生株上增殖的优劣,可以作为判断N基因表达程度高低的标准。本文以24种核糖体蛋白质突变体为宿主,测定λcI 857的成斑率。结果在S3+L22,S4+L16+L24,S21+L25,L24,缺L1,缺S3等突变体中,成斑率下降到10~(-6)—10~(-6);在S3+S18+L6+L24+L27和L27突变体中,成斑率分别提高6.02和3.56倍。以上结果说明核糖体蛋白质突变影响λ N基因的表达。 相似文献
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大肠杆菌核糖体蛋白质L24和L27突变对λN和λQ基因表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
核糖体是生物体翻译遗传密码的唯一场所。核糖体各组份的确切功能目前仍不清楚。本实验室的研究已证实:有些核糖体蛋白质突变能在翻译水平上影响核糖体翻译的特异性。本文使用转座子Tn10将核糖蛋白质L24(rpmA)突变从A19的衍生株转到T83菌株上,并研究这2个突变对λN和λQ基因及对N-lacZ和Q-lacZ融合基因表达的不同影响,为核糖体蛋白质能影响核糖体翻译的特异性提供了又一个实例。 相似文献
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打开当今任何一本遗传学教科书一读,就会使你觉得遗传学研究成果累累。遗传的物质基础是核酸,不是DNA就是RNA,两者必居其一。80年代初期出现的Prion 迷雾,已经不复存在。不论以DNA或RNA作为遗传物质,遗传信息都是以四种碱基作为编码字母,编码于核苷酸的顺序之中。令人兴奋的是遗传密码这部天书,经过生物学界最大的一场会战,在短短几年之内,干净利落地解决了;而且证明生物不论其进化程度的高低、结构繁简,都使用这同一套密码。对于基因的认识也大大进了一步,基因不但是编码蛋白质或RNA的一段DNA序列,而且也包括其转录、翻译的起始、终止信号。基因不但是各个分立的实体,而且也可以是重叠的、割裂的。DNA是隋性的,它所携带的遗传信息必须经过转录、翻译成 相似文献
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核糖体蛋白质的翻译特异性— 遗传密码翻译装置对信使RNA的选择性 总被引:4,自引:0,他引:4
分子遗传学泰斗J. D. Watson于1957年首先对核糖体进行系统的研究。其后0.
许多科学家的共同努力,核糖体的结构已经基本研究清楚。然而对核糖体蛋白质的确切
功能,却仍然一无所知。1979年以来,本实验室主要从事分离核糖体蛋白质突变体,研
究核糖体蛋白质突变对基因表达的影响。发现在S12突变体中,碱性蛋白酶活性下降,
而中性蛋白酶活性正常。到目前为止,我们分离鉴定了的枯草杆菌核糖体蛋白质突变体
总数居世界首位。我们研究了核糖体蛋白质突变对噬菌体基因组表达的影响。发现在
S12的依赖链霉素突变体中,噬菌体娜05裂解量下降;蛋白质合成受Pf-;而RN A和
DNA合成正常。测定了噬菌体价29在27种共44株核糖体蛋白质突变体中的成斑
率。在多数突变体中,成斑率下降,最低达10-6;少数升高,最高达三倍;还百一些升降都
不明显。大汤杆菌C600的S12发生依赖链霉素突变,x噬菌体的成5k率和相对产量
大大降低,而T4和T7的成斑率正常。大肠杆菌1.148叹Xc 1857)的S12发生依赖
链霉素突变,肠1857的诱导释放量大大降低,而T4的成斑率反有所增加。在大肠杆菌
A19野生型菌株中,I噬菌体的N基因表达正常;核糖体蛋白质S10, S16, S19, S20
和L3友生突变,能抑制N基因表达;L21 + L25, L24突变,N基因不能表达;L27突
变,促进N基因表达;S8,L6,L7ZL12,L14禾L23突变,对N基因表达没有明显影响。
把N基囚克隆在质拉上,用功能互补的方法,测定N基因表达的程度。结果清楚表明,
S12发生依赖链霉素突变,N基因不能表达;发生杭链霉素突变,却表达正常。综合以上
实验结果,可见不同的核糖体蛋白质突变时同一基因表达的影响不同;同一核糖体蛋白
质突变对不同基因表达的影响也不同。还有一些核糖体蛋白质突变,对其他基因表达没
有明显的影响。 相似文献
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本文首次报道了枯草杆菌依赖链霉素突变体不能形成孢子、抗链霉素突变体孢子形成正常的现象。已知链霉素作用于核糖体,而核糖体是转译遗传密码的场所,所以这类孢子形成突变体可能与其转译水平的调节不全有关,对从转译水平研究基因表达的遗传调节可能会有重要意义。本文作者于1973年7月将本文投寄《遗传学通讯》编辑部。当时由于受“四人帮”反革命修正主义路线的干扰,本文曾被扣压,不准发表。现在,粉碎了“四人帮”,排除了“四人帮”的干扰,特将本文发表在这里。 相似文献