限根对不同品种油桃幼树光截获能力和一些生理特性的影响

以一、二年生油桃早红宝石、沪油004、沪油018为试验材料,分析了设施栽培中限根对幼树树冠光截获能力、叶片可溶性蛋白含量变化以及叶片干重变化的影响。结果表明:(1)限根能改良冠层内叶片的水平分布、叶倾角,降低光在冠层内的损失,提高叶片光截获能力,有利于提高果树群体光能利用率。(2)限根对不同品种油桃幼树叶片中可溶性蛋白含量变化和叶片相对含水量、比叶重的影响明显不同。(3)编织袋限根处理比竹筐限根能更有效地改善幼树冠层光截获能力,提高光能利用率。早红宝石、沪油004采用编织袋限根栽培对果树生长发育比较有利;沪油018是个高光效品种,以竹筐限根较为适宜。     

超声波介导铁蛋白基因转化苹果的研究

以嘎拉苹果的叶片为转化受体,应用超声波法将菜豆铁蛋白基因导入受体中.实验表明,以0.5 W/cm2的声强、25℃、20 min超声波处理的转化效果最佳,抗性愈伤组织的比例高达24%.抗性愈伤组织经诱导获得了16个苹果抗性植株,有11株表现出GUS阳性,阳性比率为2.75%.经PCR检测,11株GUS阳性植株中有6株能扩增出目的条带;而Southern blotting实验表明,菜豆铁蛋白基因仅在2个苹果转基因株系的基因组中实现了完整插入,并且杂交的信号较强;进一步RT-PCR检测实验显示,外源菜豆铁蛋白基因在上述2株转基因植株中并未转录,发生了基因沉默.     

适合于苹果的ISSR反应体系的建立

以富士苹果为试材 ,对ISSR反应体系中的诸如模板DNA、Mg2 + 、dNTP和TaqDNA聚合酶的浓度进行了探索 ,确立了适合富士苹果的ISSR反应体系 :在 2 5 μl反应体系中 ,含 1×缓冲液 [10 0mmol·L-1KCl、80mmol·L-1(NH4) 2 SO4、10 0mmol·L-1Tris HCl,pH 9.0 ,NP 4 0 ]、1.5mmol·L-1MgCl2 、0 .2 0mmol·L-1dNTP、0 .4 0 μmol·L-1引物、2 0ngDNA、1UTaqDNA聚合酶     

转MhGlu基因烟草灰霉病抗性及光合特性研究

以湖北海棠盆栽及组培苗叶片为材料,经NaCl、PEG-6000及4℃下ABA处理后,通过RT-PCR技术克隆了湖北海棠β-1,3-葡聚糖酶基因MhGlu;构建MhGlu基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法将MhGlu基因转入烟草中,并通过PCR和RT-PCR检测,成功获得了4个转基因株系T6、T8、T11和T18;以转基因烟草株系T6及T8和非转基因对照植株为材料,对MhGlu基因的功能进行了进一步分析。结果显示:(1)半定量qRT-PCR显示,NaCl、PEG-6000及4℃下ABA处理均可以诱导湖北海棠盆栽及组培苗叶片MhGlu基因的表达;NaCl和PEG-6000处理48h内MhGlu基因的表达随处理时间延长逐渐增强,4℃下ABA处理的MhGlu基因表达量在4h时开始上调,12h时略降低,48h时又达到最大。(2)半定量RT-PCR检测转基因烟草植株几个病程相关基因PRs的表达量,表明过表达的MhGlu基因诱导并增强了烟草病程相关基因NtPR1、NtPR3和NtPR5的表达。(3)用灰霉病侵染烟草叶片,转基因烟草株系T6、T8均表现出较强的抗灰霉病特性。(4)测定烟草植株光合特性参数,转MhGlu基因烟草株系的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)较对照组均显著提高,且T8的净光合速率和蒸腾速率均显著高于T6,而T8与T6的气孔导度差异不显著。MhGlu基因在烟草中的过量表达能诱导病程相关基因PRs的表达,激活了烟草的光合特性保护机制,提高了转MhGlu基因烟草植株的灰霉病抗性。     

梅REMAP分子标记技术体系的优化及其应用

通过分析构成梅REMAP分子标记技术体系的主要成分适宜浓度、SSR引物选择性碱基的添加以及REMAP-PCR扩增产物检测的非变性PAGE最佳浓度,建立了适合梅REMAP分子标记的技术体系,并对24个梅品种的遗传多样性进行了分析.结果表明:(1)适宜梅REMAP-PCR的反应体系为:25.0 μL总体积中,基因组DNA 40.0 ng、2.5 mmol/ L MgCl2 1.5 μL、2.5 mmol/L dNTPs 2.0 μL、10×PCR Buffer(TaKaRa) 2.5 μL、Taq DNA聚合酶1.5 U、10 μmol/L LTR引物1.0 μL、10 μmol/L SSR引物1.0 μL,且SSR引物的3′端加碱基可明显提高REMAP的扩增效果,但碱基数量无明显影响.(2)5.0%非变性PAGE电泳条带数量多,扩增范围广(300～2 000 bp),且各品种扩增产物均可显示,能够清晰地反映品种间的多态性.(3)24个梅品种的遗传多样性分析显示,花梅的绿萼型及朱砂型分别聚在一起,这与形态学分类的结果一致,证明建立的REMAP技术体系的有效性和可行性.     

通过农杆菌介导将番茄铁转运蛋白基因导入八棱海棠

用农杆菌介导法,成功地将番茄铁转运蛋白基因导入了苹果砧木八棱海棠.获得了19个卡那霉素抗性株系,其中有11个株系经PCR鉴定为阳性.Southern杂交结果显示:有9个转基因株系基因组中整合了完整的目的基因.选择其中含有单拷贝和3个拷贝目的基因的各一个株系进行水培试验,结果表明整合了单拷贝目的基因的转基因株系表现出较强的抗缺铁胁迫能力,5周后其植株的鲜重比对照高21%～34%.     

果梅完全花与不完全花的差异蛋白分析

应用双向电泳技术对果梅完全花与不完全花的蛋白质组分进行了比较分析。经专业分析软件（PDQuest）对电泳图谱分析表明两者的蛋白分布相似,在完全花中发现了1个特异蛋白、1个上调蛋白、21个下调蛋白,在不完全花中发现2个特异蛋白,这些蛋白差异点可能与雌蕊的败育有关。应用质谱技术对3个特异点及5个差异大的蛋白点进行分析,得到的肽段数据与蛋白质数据库比对发现其中一个蛋白（28．2kD,pI4．53）与光敏色素B有关。     

利用S-SAP鉴定富士苹果芽变

利用银染S-SAP技术对苹果'富士'及其14个芽变品种进行研究,结果发现,筛选出的6对引物中,L12/E7能够将所有'富士'芽变品种同'富士'区分开来,其余5对引物能够在芽变品种中区分'秋富5号'、'烟富1'、'盛放富1'和'长富1号'.由于S-SAP多态性主要由基因组内逆转座子的转座引起,因此'富士'苹果芽变品种的产生可能与逆转座子的插入有关.     

套袋对苹果发育过程中果皮色素及果肉糖含量的影响

以富士苹果'长富2号'品系为试材,研究了套袋后果实生长发育过程中果皮色素含量、果肉糖含量及取袋后果皮色素、糖含量和PAL活性等品质形成因子的变化规律.结果显示:套用双层纸袋能显著降低红富士苹果果皮叶绿素含量,并以叶绿素a降低幅度较大,且与总叶绿素含量呈基本一致的下降变化趋势,而果皮类胡萝卜素降低幅度较小;果皮的花青苷含量取袋前显著低于对照,取袋后迅速上升,并在取袋后6 d超过对照,采收时超过对照1倍以上;果实PAL酶活性取袋后呈先升后降的趋势,取袋后4 d活性超过对照,取袋后6 d活性达到最高值;套袋不同程度地降低了果实可溶性总糖和还原糖含量,取袋后可溶性总糖、果糖和葡萄糖含量上升,蔗糖含量在取袋后4 d内迅速上升而后下降,但套袋果始终低于对照果.研究表明,套袋可以显著降低果皮中叶绿素的含量,促进花青苷积累,从而减少叶绿素对果实着色的干扰,提高果实外观品质,但同时也部分减少了果实总糖的含量,对果实内在品质有一定负面影响.     

水稻热休克转录因子OsHSF13的克隆与生物信息学的初步分析(简报)

环境刺激的信号转导是植物信号转导的一个重要研究方向。热激反应(heat-shockresponse,HSR)是动植物细胞或器官在遇到外界热刺激时所产生的一种保护性反应,是正常的蛋白质合成受阻时产生热激蛋白(heat-shockprotein,HSP)的一种细胞生理活动,其表达通过热休克转录因子(heat-shock factor,HSF)来进行调控[1]。编码热激蛋白基因的启动子区域存在着一段保守的DNA序列,是热休克转录因子的结合位点(heat-shockelement,HSE)。当植物受到外界的热刺激时,HSF可以与HSE特异性结合,激活热激蛋白基因的表达,