TFPI-2对人肝癌细胞生长增殖、凋亡及AFP合成的影响

目的: 探讨TFPI-2基因对人肝癌细胞Hep3B生长增殖、凋亡及甲胎蛋白AFP表达的影响。 方法: 将重组质粒PCDNA3.1-TFPI-2转染Hep3B细胞并经G418稳定筛选后,RT-PCR和Western blot检测转染前后TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平,采用CCK-8法、生长曲线观察TFPI-2对人肝癌细胞Hep3B生长增殖的影响,通过平板克隆形成实验观察单个细胞的增殖能力,RT-PCR检测AFP mRNA的表达,并用电化学发光法测定培养上清液中甲胎蛋白AFP含量,流式细胞仪检测细胞早晚期凋亡情况。 结果: 转染成功的Hep3B细胞检测到TFPI-2 mRNA和蛋白的表达;与转染空载体及未转染的细胞相比,转染TFPI-2的细胞生长增殖能力明显减弱;AFP mRNA表达抑制率为16.51%,AFP蛋白分泌明显低于对照组(P<0.01);流式细胞术检测转染TFPI-2的Hep3B细胞早期凋亡率明显增加(24.03%±7.28% vs 8.77%±3.66%)。 结论: TFPI-2表达可显著抑制肝癌细胞生长和AFP的表达,同时还能诱导细胞早期凋亡。为进一步探讨靶向TFPI-2的肝癌基因治疗提供了实验依据。     

静电纺丝纳米纤维体外释放与蛋白活性的研究

目的:通过选择不同的模型蛋白,探讨准确的研究静电纺丝纳米纤维支架的体外释放和快速的测定蛋白活性的方法.方法:通过O/W乳液法静电纺丝制备纳米纤维,并用扫描电镜对纳米纤维表面进行了表征.以GM-CSF为模型蛋白,采用ELISA双抗体夹心法考察纤维的体外释放行为;以BSA为模型蛋白,用SEC-H-PLC比较纤维制备前后蛋白的聚集情况;以β-半乳糖苷酶为模型蛋白,用ONPG法比较纤维制备前后酶的催化活性.结果:纤维表面平滑,直径均一,呈现互相连通的三维网状结构.纤维在5天内释放90％以上;纤维中回收的BSA单体比例为66.53％;β-半乳糖苷酶在纤维中的催化活性保持原活性的3.37％.结论:通过选择不同的模型蛋白,能够准确的测定静电纺丝纤维的体外释放,快速的考察纤维中的蛋白活性,对于更好的研究蛋白药物纳米纤维支架具有重要的参考价值.     

盐酸胍对毕氏海蓬子类囊体膜蛋白光谱特征的影响

研究了盐酸胍（GuHCl）处理对毕氏海蓬子类囊体膜蛋白亚基和光谱特征的影响。结果显示,随着GuHCl处理浓度的增高,类囊体膜蛋白的吸收光谱和荧光发射光谱明显下降,峰位发生蓝移。这表明GuHCl处理下,类囊体膜蛋白色素微环境发生明显变化,色素蛋白结构遭到破坏;较低浓度2mmol.L-1GuHCl处理下,随着GuHCl处理时间的延长,类囊体膜蛋白的吸收光谱和荧光发射光谱也呈下降趋势,但与GuHCl浓度梯度处理比,下降程度略缓,峰位也基本没有变化。这说明类囊体膜在2mmol.L-1GuHCl不同处理时间下表现出的耐受性比在GuHCl浓度梯度处理条件强。     

节水减氮和品种管理对双季稻CH4的减排效果

秸秆还田、高效肥料、节水减氮是我国农业绿色发展主推技术,高产低排放品种是减少稻田CH₄排放重要方向。为明确秸秆还田下氮肥减量及节水灌溉集成技术对不同品种水稻田CH₄排放的影响,本研究以双季稻为对象,采用随机区组的裂区试验设计,设置施用尿素+间歇灌溉(U)、尿素减量20%+秸秆还田+间歇灌溉(US+S)、控释尿素减量20%+秸秆还田+间歇灌溉(CRUS+S)、尿素减量20%+秸秆还田+节水灌溉(US+S+SWD)共4个主区因素,常规稻和杂交稻作为2个副区因素,利用静态箱-气相色谱法监测双季稻生育期内CH₄排放规律及减排效果。结果表明,碳投入、氮投入、灌溉量和分蘖数是影响双季稻CH₄排放的主要因素。秸秆还田可补充氮肥20%减量的养分,并显著促进常规稻和杂交稻CH₄的排放,其中常规稻增排60.0%～107.8%,杂交稻增排99.8%～107.8%,这主要归结于秸秆还田带来大量碳源。秸秆还田搭配控释尿素并不能减少CH₄排放,较US+S增排1.8%～9.7%(除常规...     

圈养雌性非洲象妊娠期尿中性激素水平的变化

非洲象(Loxodonta africana)属于哺乳纲、长鼻目、象科、非洲象属,主要分布于非洲东部、中部、西部、西南部和东南部等广大地区,目前在世界大部分地区都有人工圈养.非洲象没有固定的发情季节,常年均可交配繁殖,雌兽的怀孕期为21 ～23个月,略长于亚洲象,是哺乳动物中孕期最长的动物.     

沙田柚自交、异交花粉管蛋白双向电泳分析

比较分析了沙田柚自交、异交花粉管蛋白的双向电泳图谱 ,两者的蛋白分布格局相似 ,具有重叠性 ,可分辨出 2 0 0多个蛋白点。在异交花粉管电泳图谱中发现了 1种特异蛋白 (A) ,A蛋白 (MrA =5 8.2 ,pI=5 9) ;在自交花粉管电泳图谱中发现了 2种特异蛋白 (B、C) ,B蛋白 (MrB =2 6.4,pI=6.1 ) ,C蛋白 (MrC =2 8 0 ,pI=6.3) ,这些蛋白可能与自交不亲和有关     

片口自然保护区植被的遥感分类

采用样方法对四川片口自然保护区的植被进行本底调查,利用野外普查数据和卫星照片解译相结合的技术,分析其植被现状。结果表明：片口自然保护区的植被类型比较丰富,且保存较完整,共有6种植被类型和15种群系。     

氨基甲酸酯类杀虫剂灭蚜威对麦蚜的防治效果

田间试验表明 :氨基甲酸酯新杀虫剂灭蚜威是一种对麦蚜杀虫活性高的杀虫剂 ,2 5 %灭蚜威EC使用剂量 9 375～ 1 2 5g (a .i.) 667m2 ,药后 3～ 1 0d校正防效山东河南两地分别为 87 64%～ 98 38%和 89 95 %～ 97 66% ,6 2 5g (a .i.) 667m2 药后 7～ 1 0d防效分别为 87 68%～ 92 0 2 %和 88 91 %～94 4 6% ;5 0 %灭蚜威WP使用剂量 1 8 75～ 2 5g (a.i.) 667m2 ,药后 3～ 1 0d防效两地分别为 89 1 7%～99 4 5 %和 93 60 %～ 99 2 3% ,1 2 5g (a.i.) 667m2 药后 7～ 1 0d防效分别为 90 60 %～ 93 5 9%和 92 37%～ 93 5 0 %。     

禽白血病病毒J亚群内蒙株的分离与鉴定

本研究从曾见典型禽骨髓性白血病(Myeloid Leukosis,ML)病例的内蒙古某肉种鸡场随机选取的淘汰肉种鸡中,分离出一株J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus Subgroup J.ALV-J)。利用PCR和间接免疫荧光反应进行鉴定,J亚群禽白血病病毒内蒙株可以被两对ALV—J特异性引物扩增(特异条带约2．2kb和545bp);且在特异性单抗的间接免疫荧光检测中呈现强阳性荧光反应。此外,对山东一例肉种鸡骨髓性白血病病例亦进行了J亚群禽白血病病毒的分离与鉴定。2．2kb PCR扩增物的测序结果表明,两株分离病毒的同源性为96．9％,与已分离的SD9901和YZ9901株ALV-J同源性达94．2％～95.4％。