金铁锁转录因子ptMYC2的克隆和生物信息学分析

金铁锁是 “云南白药”等多种中成药的重要组成,其有效成分为三萜皂苷,MYC类转录因子在调节植物三萜类次生代谢积累中有重要作用。为研究ptMYC2 基因在金铁锁三萜皂苷合成代谢途径的调控机制,该研究基于金铁锁转录组测序数据,克隆得到ptMYC2转录因子的两个全长基因; 通过生物信息学软件对两条转录因子的同源性、理化性质、疏水性、跨膜结构、亚细胞定位、结构域、靶基因结合位点等进行初步预测分析。结果表明:两条转录因子所编码的蛋白属于亲水性蛋白,不存在跨膜区域,均是非分泌蛋白质,且不存在信号肽; 两条转录因子的亚细胞定位于细胞核; 结构域分析显示,两个基因都含有bHLH家族结构域; 预测得到金铁锁三萜皂苷合成途径中HMGR、FPS、SE、β-AS等基因的启动子可能存在与MYC2结合的E-box特异性结合位点。该研究结果将为进一步研究ptMYC2基因在金铁锁三萜皂苷合成代谢途径的调节机制奠定基础。     

油茶林鳞翅目害虫3种天敌记述

采用林间调查和室内饲养等方法,发现了油茶林鳞翅目害虫的3种天敌,即印度长颈步甲Ophionea indica、日本长颈步甲Mimocolliuris insulana和茶梢尖蛾长体茧蜂Macrocentrus parametriates ivorus,前2种天敌主要捕食鳞翅目卷叶类害虫、假眼小绿叶蝉Empoasca vitis等,且为首次在油茶林中发现;茶梢尖蛾长体茧蜂寄生茶梢尖蛾Parametriotes theae幼虫,为首次在广东省记录。记述了3种天敌的形态特征、寄主、国内分布及生物学特性等。     

伊乐藻对浮游动物群落结构的影响

浮游动物是淡水生态系统的重要组成部分,一方面浮游动物主要以浮游植物作为食物^[1],同时又能摄食细菌^[2、3]、原生动物^[4、5];另一方面浮游动物又是一些鱼类优良的食物^[6、7]。国内外一些研究发现,有大量沉水植物存在的湖区,浮游动物的种类数、数量、生物量和多样性都比存在少量或没有沉水植物的湖区要高^[8-13]。     

高等医学院校非医学专业生理学教学的探讨

为了满足现代社会对各方面专业人才的需求,许多高等医学院校开设了一些非医学专业.生理学课程作为一门重要的医学基础课,成为非医学专业学生必修的一门课程.文章从该课程教学目的、教学中常见的问题及要注意的事项进行探讨,提出了一些建议:要合理地选取教学内容;注意加强前后知识以及相关学科间的联系;增加实验训练;通过各种教学方法提高学生学习的积极性;要注意引导学生的学习方法以及加强教师自身建设.     

马立克氏病病毒I型CVI988/Rispens疫苗株UL13激酶结构域分析及其偏嗜密码子片段在大肠杆菌中的表达

摘要：目的 寻找MDV-1UL13激酶催化中心,并体外表达UL13,以便研究UL13蛋白激酶的功能。方法 用PCR方法从CVI988疫苗株基因组中扩增UL13基因,利用GENEART（www.gcua.de）分析UL13在大肠杆菌中表达时密码子的偏嗜性;通过DNAstar抗原性分析确定UL13的高抗原性片段,进行原核表达,并以切胶免疫方法免疫小鼠制备多抗血清;通过NCBI的protein blast功能及Cn3D 4.1在线软件分析UL13保守结构域。结果 PCR扩增出UL13基因,序列分析结果表明, UL13的259-400aa、431-513aa两个片段抗原性强,且稀有密码子较少;保守结构域分析发现UL13催化中心主要位于152-297氨基酸残基间,且在激酶Subdomain Ⅶ的保守甘氨酸残基被丝氨酸替代,SubdomainⅧ的保守非极性脯氨酸残基被极性半胱氨酸残基替换。利用大肠杆菌表达的UL13第259～400 aa片段免疫小鼠制备出多抗血清能与真核表达产物反应。结论 MDV-1 UL13催化中心主要位于152-297氨基酸残基间,体外表达的基因产物诱导机体产生了抗UL13激酶的特异性抗体。     

急性胆源性胰腺炎行腹腔镜胆囊切除的体会

目的:探讨应用腹腔镜技术治疗急性胆源性胰腺炎的可行性、有效性和手术方法。方法:回顾分析我院腹腔镜胆囊切除术在急性胆源性胰腺炎治疗中的病人资料,将其按发病后的手术时间分为三组,统计各组病人的手术耗时、术后住院天数、住院花费以及并发症的有无。结果:经过随访有34位患者术后恢复良好,有1位复发,三组之间的手术耗时、术后住院天数、住院花费以及并发症无统计学差异(P>0.05)。结论:急性胆源性胰腺炎患者采用腹腔镜手术治疗效果明显、安全,手术时机的选择无严格的限定。     

绿僵菌无纺布菌条的制作(I)液体种子培养条件

研究了金龟子绿僵菌菌株M a83液体培养最佳营养及环境条件,为无纺布培养提供良好的液体种子。以生物量为指标,通过液体摇瓶试验确定了绿僵菌M a83菌株液体种子培养参数,对不同的氮源、碳源及其浓度和初始pH进行单因素分析。结果表明,绿僵菌M a83菌株液体种子培养最佳营养条件为4%黄豆粉,2%白砂糖,0.5%MgSO4.7H2O,0.05g/LKC l,0.1g/L FeSO4.7H2O,1.0g/L KH2PO4,pH6.3~6.5。70L发酵罐培养,干生物量第三天可达35g/L,显著优于筛选前培养基(SDA,28g/L,a=0.05)。     

抗菌光动力疗法应用于乳前牙治疗对髓腔内微生物的影响CSCD

目的 旨在评估常规牙髓治疗后抗菌光动力疗法(a-PDT)对乳前牙髓腔内微生物的影响。方法 选择2020年12月就诊于郑州大学附属医院口腔科儿童的62颗牙髓坏死的乳前牙,随机分为常规根管治疗组(A组)和常规根管治疗联合a-PDT治疗组(B组),每组各31颗。a-PDT使用浓度为0.005%的亚甲蓝作为光敏剂,用无菌纸制锥形管在根管内部涂抹3 min,用激光在根管入口处直接照射40 s(波长:660 nm,能量密度:4 J/cm^(2),功率:100 mW)。使用锥形管采集两组患者根管内的微生物样本(两组均在治疗前和治疗后立即采集)进行培养。治疗后1个月和3个月进行临床随访,包括瘘管和牙齿活动度等。结果 与治疗前比较,A组治疗后细菌载量减少了93%,B组减少了99%,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后1个月和3个月,两组康复情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 常规治疗联合a-PDT可有效杀灭乳牙内微生物。     

在鱼腥藻7120中建立反义glnA系统

应用反义技术对鱼腥藻７１２０的内源ｇｌｎＡ基因的表达进行调控,首次获得了人工反义系统的蓝藻品系。先从编码谷酰胺合成酶的基因ｇｌｎＡ中取得部分结构基因片段,与表达质粒载体ｐＲＬ－４３９及穿梭质粒载体ｐＤＣ－８相连接。通过酶切鉴定筛选出反向克隆的穿梭表达质粒ｐＤＣ－ＡＴＧＳ,然后应用三亲接合转移法把它鱼腥藻７１２０。     

牛病毒性腹泻病毒Erns蛋白的中华仓鼠卵巢细胞表达及免疫原性分析

本研究利用中华仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV) E^rns蛋白,并分析其免疫原性。以BVDV-1 NADL标准毒株基因序列为基础,构建BVDV E^rns蛋白重组真核表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E^rns,转染悬浮培养的CHO细胞,进行上清分泌表达。SDS-PAGE分析E^rns蛋白的表达和纯化,并用抗His单克隆抗体和BVDV阳性血清进行Western blotting鉴定纯化蛋白;进一步使用纯化的E^rns蛋白免疫新西兰大白兔,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞间接免疫荧光(indirect immunofluorescence,IFA)实验检测血清抗体水平及其免疫反应活性,用病毒中和实验测定免疫兔血清的中和抗体滴度。BCA蛋白定量试剂盒检测纯化的E^rns