高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系

以载体双表达的方式构建重组酵母环境雌激素的评价体系, 用于快速筛选雌激素类化合物。在表达载体中, 用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动a人雌激素受体基因(hERa)的表达; 在报告载体中, 用雌激素效应元件(ERE)调控的绿色荧光蛋白(yEGFP)作为报告基因。将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中, 构建成重组绿色荧光蛋白酵母细胞。该酵母细胞经不同浓度的雌激素类化合物作用后, 发现GFP的表达量与此类受试物具有明显的剂量效应关系。与其他环境雌激素酵母评价体系相比, 该重组酵母评价细胞, 在应用时不需要破坏细胞壁, 也不需要底物和相关试剂, 可直接在96孔板中操作完成, 具有快速、高通量、敏感性高、重现性好及廉价等特点。     

黑曲霉木聚糖酶在工业酒精酵母中的分泌表达

用重叠延伸PCR方法从黑曲霉 (Aspergillusniger)UV 11的基因组DNA中克隆出木聚糖酶的cDNA基因 ,构建了由酵母乙醇脱氢酶 (ADH1)启动子和终止子引导表达、木聚糖酶自身信号肽引导分泌、rDNA序列介导的酵母整合型分泌表达质粒pAX2。用pAX2与酵母YEp型G4 18抗性质粒共转化野生型工业酒精酵母S .cerevisiae 2 346 ,获得了整合型分泌表达木聚糖酶的酵母重组菌株XY2。发酵分析表明该工程菌能够明显提高酒精生产率     

苦苣菜脂溶性化学成分

利用柱层析、薄层层析,从苦苣菜(Soncbus oleruceus)丙酮提取物中分离得到6个化合物,经1^HNMR、13^CNMR、IR等现代波谱技术鉴定,分别为洋芹素(1)、木犀草素(2)、槲皮素-3-O-葡萄糖苷(3)、3β-羟基-12-烯-乌苏酸(4)、对-甲氧基苯乙酸(5)、对-羟基苯乙酸(6),这些化合物在该植物中为首次报道。     

一个受褐飞虱取食诱导的水稻GST类似蛋白基因的克隆

BpHi006AcDNA长度为1943bp,具有一个795bp组成的完整的读码框,其表达受褐飞虱取食的诱导。BpHi006A蛋白含有谷胱苷肽S转移酶(glutathione Stransferase)的N末端结构域和C末端结构域,为谷胱苷肽S转移酶超家族的成员。BpHi006A蛋白与拟南芥四氯氢醌还原性脱卤素酶相关蛋白有61％的一致性,序列分析表明这两种蛋白质构成一类新的植物GST。     

新德里金属β-内酰胺酶-1及其突变体结构与功能研究进展

耐药菌株所分泌表达的新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi Metalloβ-lactamase-1,NDM-1)是金属-β-内酰胺酶家族的成员,能够催化几乎所有β-内酰胺类抗生素的水解,其迅速传播已成为人类健康的严重威胁。我国是产该酶病原菌分离率较高的国家之一,绝大部分为革兰氏阴性菌。到目前为止,全世界已报道了由16个突变位点和1个插入位点所形成的21种不同的NDM突变体,这些突变体的核酸序列通过单个或多个碱基取代或插入而改变。本文总结了NDM-1的结构及催化水解机理,对其结构中α-螺旋、β-折叠和环区结构进行了探讨,并基于此突变位点对该酶结构的影响进行了分析。这些区域所发生的突变,直接影响其水解底物的活性。深入了解这些突变对其结构和功能方面的影响,对于在分子水平上的进化研究具有十分重要的意义。     

Obestatin对血浆ghrelin和nesfatin-1水平及胃排空的影响

目的:探讨侧脑室注射obestatin对大鼠血浆酰基化ghrelin、去酰基化ghrelin、nesfatin-1水平的影响以及对胃排空的调控。方法:侧脑室注射obestatin,采用酶免疫测定(EIA)法检测血浆酰基化ghrelin、去酰基化ghrelin、nesfatin-1水平以及胃排空率的变化。结果:侧脑室分别注射0.1、0.3或1.0 nmol obestatin,大鼠血浆酰基化ghrelin、去酰基化ghrelin以及nesfatin-1水平无显著改变(P0.05),且酰基化ghrelin与去酰基化ghrelin比率无显著改变(P0.05);侧脑室注射obestatin,大鼠摄食量无显著改变,但胃排空率明显增加(P0.05);胃排空率明显延迟(P0.05)。与侧脑室注射1.0 nmol Obestatin组相比,注射1.0 nmol Obestatin+CRF,大鼠摄食量无显著改变,胃排空率明显延迟(P0.05)。各组摄食量及进入十二指肠内食物量无明显差异(P0.05)。结论:中枢obestatin促进大鼠的胃排空,可能与h/r CRF通路有关。     

羊草草原土壤动物特征的研究

对东北羊草草原土壤动物特征的研究表明i,土壤动物共有4门6纲14目。其水平分布规律是杂类草群落>羊草群落>拂子茅群落>榆树疏林>碱茅群落>碱蓬群落。土壤动物的数量和生物量的季节变化趋势相似,最大值均出现在8月份。随着土层的加深其数量逐渐减少,0-10cm上层中土壤动物数量约占总数的50%以上。     

二化螟越冬种群∶年龄结构对其冬后取食和化蛹动态的影响

调查了不同类型稻田及茭白田中二化螟的越冬年龄结构,比较了不同龄期幼虫之间的在冬后取食与化蛹动态方面的差异。结果表明,越冬虫龄以双季晚稻田中明显较低,中稻田与茭白田中相对较高。出现取食的个体比例在４－５龄幼虫之间差别不大;但取食的开始时间在龄期之间具明显差异,以４龄个体最早取食。未取食个体的化蛹进度明显快于取食个体;未取食个体中以４龄幼虫的化肾时间较早。