应用CTB基因启动子及信号肽序列构建分泌性表达系统

利用霍乱毒素B亚基基因的启动子、信号肽序列及ctx操纵子的转录终止信号构建了分泌性表达的质粒载体pMCOSS。Β－半乳糖苷酶基因克隆至霍乱毒素B亚基基因的信号肽序列下游后能得到高效分泌性表达。不同的宿主菌和培养基成分中对β-半乳糖苷酶的表达产量有较大的影响,以MM2为宿主菌、在玉米浆培养基中β－半乳糖苷酶的表达产量达4 lOOu／ml,产物的大部分分泌至细胞的周质,活力测定的结果与SDS—PAGE电泳测定结果基本一致,说明表达的β－半乳糖苷酶绝大部分都具有酶活性。构建的蛋白质分泌性表达的载体－宿主系统及合适的培养条件为易形成包含体的蛋白质的高效表达提供了一条新的途径。     

抗菌肽改良设计及抗炎作用的研究进展

抗菌肽因其具有广谱抗菌活性、不容易引起抵抗性,被认为是先天免疫系统对抗微生物感染的多功能工具。然而,天然抗菌肽存在抗菌活性低、稳定性低、溶血性高等问题,使其较难应用于临床,所以研究人员对抗菌肽进行改良设计以期获得更高抗菌活性、更低溶血活性的新型抗菌肽。另外,天然抗菌肽作为一类免疫效应因子而被发现,其表现出的抑菌、免疫调节、内毒素中和等作用,使得研究人员对抗菌肽在抗炎作用的研究表现出极大的兴趣。就抗菌肽的药物设计方法及抗炎作用机制进行综述。     

人脂皮素-1cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

脂皮素1(LC1)是钙依赖性的膜磷脂结合蛋白,介导糖皮质激素的抗炎作用。本研究采用RTPCR法获取人LC1cDNA,以pUC18为克隆载体、pBV220为表达载体,在DH5α菌成功表达了LC1,免疫印迹实验证实了重组蛋白的免疫活性 。     

PTSD促进大鼠中缝背核细胞色素c表达

目的研究创伤后应激障碍(PTSD)大鼠中缝背核神经元细胞色素C(Cyt-c)的表达变化。方法应用无连续单一刺激(SPS)方法建立PTSD大鼠模型,随机分为SPS刺激后1d、4d、7d和对照组,应用酶组织化学法和RT-PCR方法观察中缝背核神经元Cyt-c的表达变化。结果光镜酶细胞化学法和RT-PCR法显示中缝背核神经元Cyt-c染色阳性细胞于SPS刺激后1d明显高于对照组,4d逐渐增高,并于7d达到高峰。电镜下显示Cyt-c阳性反应产物主要分布在中缝背核神经元线粒体膜,SPS刺激后可见Cyt-c释放到胞浆中。结论 SPS刺激引起Cyt-c在PTSD大鼠中缝背核神经元呈过表达。     

产L-苹果酸重组大肠杆菌的构建

基于产琥珀酸重组大肠杆菌E.coli B0013-1050的琥珀酸合成途径,利用Red同源重组技术结合Xer/dif重组系统敲除富马酸酶基因fumB、fumC,苹果酸酶基因maeB,构建L-苹果酸合成途径,最终得到重组大肠杆菌E.coli2030,该菌株在15 L发酵罐中,产L-苹果酸12.5 g/L,葡萄糖-苹果酸转化率为52.1%,同时对发酵产物中主要杂酸丙酮酸和琥珀酸的生产原因进行了初步的探讨与分析。为进一步提高L-苹果酸的转化率,整合表达来源于黄曲霉的苹果酸脱氢酶基因,构建重组菌E.coli 2040,在15 L发酵罐中产L-苹果酸14 g/L,葡萄糖-苹果酸转化率提高到60.3%。     

真核藻类的病毒和病毒类粒子（VLPs）

真核藻类的病毒和病毒类粒子（ＶＬＰｓ）赵以军石正丽（中国科学院水生生物研究所,武汉４３００７２）（中国科学院武汉病毒研究所,武汉４３００７１）ＶｉｒｕｓｅｓａｎｄＶｉｒｕｓ－ｌｉｋｅＰｅａｒｔｉｃｌｅｓｏｆＥｕｋａｒｙｏｔｉｃＡｌｇａｅＺｈａｏＹｉｊ...     

竹黄菌固态发酵竹红菌素条件的研究

研究了竹黄菌固体发酵培养生成竹红菌素过程中培养条件的影响。结果表明,竹黄菌生长及竹红菌素生成适宜的温度、pH分别为26℃、5．5—6。最佳的培养基物料厚度为5cm左右。固态发酵过程中最适的水份含量为50％。玉米粉是一种适宜的培养基基本组成。在以上发酵条件下竹红菌素产量为4mg/kg。     

血清白介素8基因多态性与食管鳞癌根治术后的相关性分析

摘要 目的：探讨与分析血清白细胞介素8（IL-8）基因多态性与食管鳞癌（ESCC）根治术后的相关性。方法：2017年8月到2020年6月选择在本院诊治的食管鳞癌患者98例作为研究对象,检测血清IL-8表达水平。所有患者都给予根治手术治疗,随访患者的预后并进行相关性分析。结果：所有患者术后随访到2021年7月,平均随访时间为25.69±2.58个月,死亡28例,死亡率为28.6 %（死亡组）。两组血清IL-8表达水平表达具有差异（P<0.05）。所有患者的基因型频率均符合Hardy-Weinberg这一平衡法则,表明本文所选取的样本均具有群体代表性。IL-8基因启动子rs4073A/T的AA基因型较死亡组高,TT基因型较死亡组低,两组A、T等位基因频率分布对比有差异（P<0.05）。直线相关性分析显示：IL-8基因启动子rs4073A/T的AA基因型、A等位基因、血清IL-8表达水平与预后死亡率存在相关性（P<0.05）。多因素logistic回归分析显示：IL-8基因启动子rs4073A/T的AA基因型、A等位基因、血清IL-8表达水平为导致患者随访死亡的主要因素（OR=2.051,3.094,P<0.05）。结论：食管鳞癌根治术后患者依然存在一定的死亡率,患者死亡与血清IL-8基因多态性存在相关性,同时多伴随有IL-8的高表达。IL-8基因启动子rs4073A/T的AA基因型、A等位基因、血清IL-8表达水平为导致患者死亡的主要因素。     

一株生淀粉酶产生菌的分离鉴定及酶学性质研究

采用苔酚蓝-生淀粉法从贵州遵义百年磨坊的磨盘下的土样中筛选得到一株具有生淀粉降解能力的丝状真菌,经形态学鉴定和ITS核苷酸序列比对确定该菌为Rhizopus microsporusvar.chinensis。本文首次报道了由Rhizopus microsporus var.chinensis产生的生淀粉酶。通过酶学性质研究发现,该菌株所产生淀粉酶拥有较好的温度耐受性和较宽的pH适用范围,具有一定的工业应用价值。     

WBSCR22在脑胶质瘤中的表达与临床病理特征及预后关系

摘要 目的：探索WBSCR22在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法：通过生物信息学数据库,分析WBSCR22表达与脑胶质瘤生存的关系、在不同种族脑胶质瘤表达差异。通过免疫组织化学法检测WBSCR22在171例脑胶质瘤组织芯片中的表达,分析其与脑胶质瘤患者临床病理特征及总生存期的关系。结果：生物信息学分析显示脑胶质瘤WBSCR22表达高的患者生存期较表达低的患者短（P<0.05）。亚洲人群脑胶质瘤中WBSCR22表达较高加索人、非洲人种表达升高（P<0.05）。组织芯片学结果显示：不同肿瘤分级、复发与否的脑胶质瘤患者WBSCR22的表达存在差异,差异具有统计学意义（P<0.05）。不同性别、年龄患者脑胶质瘤细胞 WBSCR22表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）WBSCR22高表达患者的总生存期明显短于WBSCR22低表达患者的总生存期（P<0.01）。结论：WBSCR22在亚洲人群脑胶质瘤中表达较高,其表达水平与肿瘤分级相关,且脑胶质瘤细胞WBSCR22表达水平越高,总生存期越短。