人羊膜与人脱细胞羊膜形态结构的对比观察

目的：对比观察人羊膜（human amniotic membrane,HAM）脱细胞处理前后的形态结构变化,为人脱细胞羊膜（human acellu-lar amniotic membrane,HAAM）作为良好的生物支架材料提供依据。方法：取健康剖宫产孕妇的胎盘,剥离获取HAM,行HE染色、透射电镜（transmission electron microscope,TEM）、上皮面与基质面扫描电镜（scanning electron microscope,SEM）检测;将HAM经物理和胰蛋白酶等脱细胞处理后获得HAAM,亦行HE染色、TEM、上皮面与基质面SEM检测;最后将检测结果进行对比观察。结果：通过HE染色表明HAM的细胞成分去除干净;TEM断面观察HAAM表明其富含大量密集的呈点状、线状及条索状的纤维成分;SEM观察表明HAAM的上皮面与基质面呈现不同的三维结构,未见胶原纤维和网状纤维断裂。结论：HAM经脱细胞处理制备的HAAM,既去除了可引起移植排斥反应的细胞成分,又保存了完整的三维结构,为良好的生物支架材料。     

羊水胆碱酯酶凝胶圆盘电泳改良法及其产前诊断神经管缺损的应用

本文在羊水胆碱酯酶凝胶圆盘电泳中,改用亚铁氰化铜的棕色显带沉淀反应,使显带比原法清晰,温培时间由12小时以上缩短为3小时。测定了210例正常的和19例神经管缺损畸胎的妊娠羊水,其阴性和阳性期望率分别达97.1％和100％。     

红树林放线菌0616167的生长特性及发酵条件优化*

菌株0616167是分离自红树林的具细胞毒活性的放线菌。研究表明,该菌最适生长的NaCl浓度是6%,能够耐受最高的NaCl浓度为20%;当盐度为0~3%时,细胞毒活性最高。通过正交试验法对发酵条件的优化,得出有利于细胞毒活性的最佳碳源、氮源、通氧量及发酵时间分别为:葡萄糖20g,硝酸钾15g,装液量为75mL/250mL三角瓶,发酵时间5d。通过优化,细胞毒活性提高了3倍。     

荧光互补与光能量共振转移检测B类G蛋白偶联受体PAC1二聚化

G蛋白偶联受体（G—protein couple receptors,GPCRs）是最大的超家族膜受体,其中它的B家族成员垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACl）是垂体腺苷酸环化酶激动多肽（PAcAP）的特异受体,介导PAcAP神经保护等功能,是神经系统疾病药物开发的重要靶点之一。二聚化或寡聚化是GPCRs普遍存在的现象,但是目前尚没有关于PACl形成同源二聚体或寡聚体的报道。为了验证PACl也能进行同源二聚化,该文采用生物发光能量转移（bioluminescence resonance energy transfer,BRET）方法进行检测,结果显示不同浓度梯度共转染中国仓鼠卵巢细胞（Chinesehamsterovary,CHO）的PACl一Rluc与PACl一EYFP重组载体,在底物腔肠素h（coelenterazineh）作用下呈现明显的BRET信号。双分子荧光互补（BiFc）检测显示,带有EYFPN端基因标记的PACl与带有EYFPC端基因标记的PACl共转染CHO细胞,能呈现完整的EYFP荧光信号。同时,Westemblot检测也显示,高表达PACl的细胞中可检测到JPACl二聚体的大分子。因此,PACl是能够进行正常同源二聚化的,这个发现将为后续神经损伤药物的开发奠定全新的理论基础,同时也为其他GPCRs同源二聚化的研究起到启发和借鉴作用。     

新城疫壳聚糖微球疫苗免疫效果的研究

鸡新城疫是由新城疫病毒引起的鸡的一种急性、烈性、高度接触性传染病,是危害养禽业的最严重疫病之一。控制新城疫最根本的措施是进行有效的疫苗接种,目前常用的疫苗是弱毒活疫苗和灭活疫苗,但二者在实际应用中均存在一定的局限性。口服微球疫苗可以诱导较强的粘膜免疫;同时还能够诱导产生系统的体液免疫和细胞免疫,已成为ND疫苗研究的热点。以壳聚糖为囊材,新城疫La Sota抗原液为芯材,戊二醛为交联剂,制备出新城疫壳聚糖微球疫苗,通过了实验室安全检验和效力检验。将新城疫壳聚糖微球疫苗与LaSota活疫苗和新城疫油乳剂灭活苗分别免疫SPF鸡,利用MTT、血凝抑制法(HI)和ELISA等分别检测不同疫苗免疫后的细胞免疫、体液免疫和粘膜免疫抗体IgA,并在当免疫鸡HI抗体降到23的情况下进行了攻毒试验。结果表明,新城疫壳聚糖微球疫苗安全性好,免疫后可刺激机体产生较强的细胞免疫、体液免疫和局粘膜免疫,具有较好的保护作用。     

黄粉虫营养成分的分析研究

为解决饲养广西特产经济动物蛤蚧的饲料难题,我们从北京动物园引进黄粉虫TenebriomolitorL．繁殖饲养蛤蚧获得成功。经多年试验证明,用黄粉虫喂养蛤蚧生长快,个体肥,特别秋末春初更为突出,一般每条蛤蚧月增重1．7～18．8g,比用灯光诱虫或用蝗虫、蝇蛆喂养的效果好[1]。目前许多单位利用黄粉虫喂养蝎子、蛤蚧、龟、鸟、蜈蚣、牛娃等经济动物效果很好,为了进一步开发利用这一优良昆虫饲料,对它的营养成分进行测定分析,测定结果如下。1材料与方法采用继代繁殖后的成熟幼虫、蛹、成虫进行测定分析。饲养堂为4×6m2的平房。一般温度在1…     

水分胁迫下内生真菌球毛壳ND35对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响

为明确不同水分条件下内生真菌对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响,以抗旱型小麦品种山农16和水分敏感型小麦品种山农22为材料,利用荧光定量PCR技术检测小麦干旱诱导基因脱水素wzy2的表达量来了解冬小麦在干旱胁迫下相关基因的表达差异,通过测定相关生理指标与酶活性来判断小麦发育及其在干旱胁迫下的生理响应状况。结果表明,与正常水分ND35组相比,接种球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35的干旱处理组小麦的根冠比、总蛋白含量、脯氨酸含量及丙二醛含量等指标显著提高,小麦叶片含水量和可溶性糖含量有所降低。在干旱处理组中,球毛壳菌ND35可以显著提高小麦山农16的根长和山农22的株高,接种球毛壳ND35的山农16脯氨酸含量、可溶性糖含量、过氧化氢酶活性比对照组均显著提高,丙二醛含量比对照组降低9.0%,但差异不显著;山农22脯氨酸含量和过氧化氢酶活性比对照组显著提高,丙二醛含量和可溶性糖含量比对照组有所降低,但可溶性糖含量差异不显著;相对定量检测数据显示,接种球毛壳ND35后,两种小麦脱水素wzy2基因的表达量较对照组均能够显著提高。综合分析说明内生真菌球毛壳ND35可以促进冬小麦苗期根系和植株发育,小麦提前进入三叶期,增强小麦避旱性,同时提高小麦根系活力,增强小麦耐旱性;提高个体细胞内水分、糖分、脯氨酸含量,降低丙二醛的氧化性损伤,增强过氧化氢酶活性,从而提高两种冬小麦对干旱胁迫的耐受能力;球毛壳ND35促进小麦干旱诱导相关基因wzy2的表达量,进而提高抗旱相关蛋白的表达,从而提高两种冬小麦耐脱水性和对干旱胁迫的适应性。     

小鼠感染合胞病毒与鼠流感病毒后肺脏病理学比较研究

目的与方法用合胞病毒(RSV)和鼠肺流感病毒(IVP)感染SPF级BALB/c小鼠,复制两种不同的小鼠病毒性肺炎动物模型,观察其临床症状,并对两种模型各自的肺部组织病理学特点进行研究。结果与结论IVP模型组与RSV模型组小鼠感染病毒后,分别在试验的2天和3天发病,临床症状均表现为精神沉郁、耸毛、卷缩、毛无光泽、活动减少、呼吸急促、咳嗽。但IVP感染模型组小鼠在发病后出现死亡,第7天其死亡率达到40%,而RSV感染模型组小鼠7日试验内无死亡病例发生。病理组织学诊断,RSV模型组小鼠为急性渗出性间质性肺炎,IVP模型组小鼠为出血性间质性肺炎。     

HarpinXoo及其功能域片段启动病原物诱导性启动子在转基因拟南芥中的活性

从烟草(Nicotiana tabacum L.)中克隆了3个病原物诱导性启动子PPP1、PPP2和PPP3,它们都含受细菌诱导的反应元件PPP1和PPP2中,另含有受生物激发子及水杨酸(SA)的诱导元件;PPP1内部还含重复的两段111bp的序列,而在PPP2K ,这个重复序列号中的一个111bpr的片段被定点删除.分别构建了含这三个启动子及花椰菜花叶病毒35S启动子的转化单元,用它们分别转化拟南芥(Arabidopsis thaliana L.)获得了转基因植株.PCR证明,几个启动子和所带的gus基因(uidA)已经整合到拟南芥基因组中.用青枯病菌接种转基因第二代植株,组织染色表明三个PPP启动子在拟南芥中都可以受青枯病菌诱导,说明克隆的PPP启动子是活性的.随后分别用SA、来自水稻白叶枯病菌的蛋白质激发子harpinx00以及harpinx00的3个具有不同功能的片段DEG(促进生长)、DIR(诱导抗病)喷雾处理转基因植株,通过GUS 的荧光定量分析,检测了启动子的活性.结果显示,表枯病菌诱导PPP1、PPP2和PPP3活性分别为35S启动子活性的53、39和25倍.PPP1和PPP2可以受SA、harpinx00、DEG、DIR和DPR的诱导,而PPP3则不能.这些结果说明了有关元件的可能作用.另外,PPP1 的活性比PPP2高3倍,表明11bp重复序列可以影响启动子活性水平.