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为探明β-1,3-葡聚糖酶基因(β-1,3-glucanase)对油菜(Brassica campestris)抵御低温胁迫能力的作用,通过蛋白质谱分析得到β-1,3-葡聚糖酶蛋白,采用RT-PCR技术克隆白菜型冬油菜(B.rapa)陇油6号和天油4号β-1,3-葡聚糖酶的c DNA序列;并对该序列进行生物信息学分析;进而采用实时荧光定量PCR及半定量PCR检测β-1,3-葡聚糖酶基因在低温胁迫下的表达模式。结果获得长度为1 032 bp的陇油6号β-1,3-葡聚糖酶基因开放阅读框,编码343个氨基酸,相对分子量为38.102k Da,理论等电点为6.63,其与菜心(B.rapa subsp.chinensis)和甘蓝型油菜(B.napus)的蛋白质氨基酸序列同源性高达93.94%。该基因编码的酶是一个主要由α-螺旋组成的亲水性稳定蛋白,含有1个信号肽,存在2个跨膜结构域。该基因在进化上高度保守,其保守序列属于植物的糖基水解酶家族17特有的保守结构域。β-1,3-葡聚糖酶基因表达模式分析显示,4°C时该基因上调表达,继续低温(–4°C)胁迫处理,该基因上调表达至峰值,至–8°C时其表达下调。研究表明从白菜型冬油菜中克隆的β-1,3-glucanase在冬油菜品种陇油6号抗寒过程中发挥作用。 相似文献
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蒙古黄芪下胚轴愈伤组织诱导与再生植株 总被引:2,自引:0,他引:2
植物名称:蒙古黄芪(Astragalus mongolicus),别名黄芪、绵黄芪。材料类别:野生种经栽培三年所得的种子,经消毒置于培养基表面,发芽后取其下胚轴,切成3~4mm小段为外植体。培养条件:MS为基本培养基:(1)诱导愈伤组织培养基附加6-BA20 mg/L(单位下同)+IAA 0.5;(2)分化培养基附加6-BA1.0+NAA0.5+IAA0.2+CH500或6-BA1.0+NAA1.0;(3)生根培养 相似文献
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毛细管电泳分子信标技术与SARS病毒的实验室检测 总被引:1,自引:0,他引:1
随着非典型肺炎的病原体SARS病毒的发现,为研究者提出了一个新的课题---如何有效地进行SARS病毒的实验室早期诊断。为此,各种检测方法应运而生,对SARS病毒的现有检测方法进行综述,并对毛细管电泳分子信标技术的原理,及在SARS病毒检测中的优势进行简单叙述。 相似文献
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氨甲蝶呤(MTX)是一种重要的常用化疗药物,然而由于肿瘤细胞对其耐药性的增强而经常导致其疗效大大降低。为了寻找并鉴定与MTX耐药性相关的蛋白质从而为进一步闸明MTX的耐药机制提供线索,培养来源于小鼠NIH3T3的小鼠胚胎成纤维细胞系3T3R500与其耐300μmol/L MTX的细胞系MTX300,提取上述两种细胞系的总蛋白质,双向凝胶电泳分离蛋白质组成分,扫描并通过软件分析考马斯亮蓝染色的2-DE凝胶,选取表达差异最显著的点,胶内酶切后MALDI-TOF-MS进行肽指纹图谱(PMF)鉴定。图像分析显示,实验组和对照组的蛋白质组图谱之间,一些蛋白质点的表达有明显的变化。通过MALDI-TOF-MS和数据库查询,成功鉴定了耐药后表达变化最显著的蛋白质点为二氢叶酸还原酶(DHFR),并通过Western blot验证了该结果,提示DHFR在MTX耐药机制中发挥重要作用。 相似文献
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不同苗龄梭梭根系分泌物组分分析 总被引:5,自引:0,他引:5
以梭梭幼苗为供试材料,采用循环灌溉技术收集梭梭不同苗龄近自然状态下根系分泌物,利用气相色谱质谱联用技术分析了根系分泌物的组分和含量,探讨梭梭幼苗不同发育时期根系分泌物的差异.实验结果表明:不同苗龄梭梭幼苗根系分泌物化合物的种类组成相似,主要由酚醌类、醛酮类、醇类、有机酸类、酯类和胺类化合物组成;30 d梭梭幼苗根系分泌物主要以有机酸和酯类化合物为主,占梭梭幼苗根系分泌物总量的81.57%;60 d梭梭幼苗根系分泌物主要以酯类和含氮化合物为主,占梭梭幼苗根系分泌物总量的65.08%. 相似文献
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放牧及刈割强度对鸭茅密度及能量积累的影响 总被引:3,自引:1,他引:3
1 引 言放牧及刈割对牧草种群的影响 .一直是草地生态学研究的重点 .科学的放牧、刈割管理制度是保证草地畜牧业可持续发展的重要前提 .作为南方人工草地优势植物之一的鸭茅(Dactylisglomerata) ,是一种经济效益高、生产价值大、在我国具有广泛应用前景的优良牧草 .通过对亚热带高山人工草地进行的梯度放牧及刈割实验 ,本文分析比较了不同放牧及刈割强度对鸭茅种群密度及能量积累的影响 ,旨在为该地区合理刈牧制度的建立提供理论依据 .2 研究地区与研究方法2 1 自然概况研究地点位于湖北长阳火烧坪 ,地理位置在 30… 相似文献
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黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)为烟草花叶病毒属(Tobamovirus)成员,Tobamovirus属病毒基因组至少编码4个蛋白,靠近5′端的126kDa和183kDa两个蛋白与病毒的复制有关,其中183kDa是由126kDa蛋白终止子超读产生的;另外两个蛋白分别为约30kDa的移动 相似文献