Tet-on基因表达系统转染胚胎干细胞和调控效应检测*

以荧光素酶基因为目的基因, 应用Lipofectamine介导的瞬时转染方法, 将pTet-on调控质粒和pTRE2hyg-luciferase表达质粒共转染小鼠胚胎干细胞, 滴加系列浓度的DOX后, 观察其诱导效应. 结果显示, 随DOX浓度升高, 荧光素酶的活性也逐渐增强; 而未转染细胞与转染细胞未加诱导剂时, 其RLU值均接近空白对照. 表明转染Tet-on基因表达系统的胚胎干细胞对DOX诱导有较好的反应性, 目的基因的表达与DOX具有严格的剂量依赖关系.     

露螽科四种昆虫的核型研究

本文以螽斯精巢为实验材料,经过低渗、固定、压片、空气干燥、Giemsa染色制备染色体标本,对螽斯总科露螽科4种螽斯的核型进行了研究,结果Phaneroptera falcata 2n♂=27, Phaneroptera gracilis 2n♂=25,Ducetia japonica 2n♂=29,Isopsera sp.2n♂=31,均为近端着丝粒染色体,性别决定机制均为XO♂/XX♀型, X染色体为染色体组中最大的染色体。作者认为,Isopsera sp.（2n♂=31）可能是露螽科中较原始的种类,Ducetia japonica(2n♂=29),Phaneroptera falcata (2n♂=27),Phaneroptera gracilis (2n♂=25)可能是由2n♂=31进化来的衔接融合在露螽科染色体进化中起着重要作用。 Abstract：Karyotypes of four species belonging to three genera of the Phaneropteridae were investigated.The diploid number of chromosomes is as follows: Phaneroptera falcata species 2n♂=27(XO),Phaneroptera gracilis 2n♂ =25 (XO),Ducetia japonica 2n =29 (XO) and Isopsera sp.2n♂=31(XO) ,all chromosomes are acrocentric,the X chromosomes are the largest members of the sets.It may be assumed that Isopsera sp. 2n♂=31 represents the basic number of chromosomes.The other species,Ducetia japonica 2n♂=29, Phaneroptera falcata 2n♂=27, Ph.gracilis 2n♂=25 could originate 2n♂=31 .Tandem fusions may be important in the karyotype evolution of Phaneropteridae.     

菠萝叶片中有机酸含量,转氨酶和脱氨酶活性的昼夜变化

研究了菠萝叶片中苹果酸,柠檬酸,草酰乙酰,α－酮戊二酸和草酸等有机酸和转氨酶、脱氢酶活性的昼夜变化。结果表明,除了草酸外,其他４种机酸的含量都呈白天降低晚上增高的趋势。     

高迁移率族蛋白B1调控肺癌细胞PD-L1表达机制

[目的]探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞程序性死亡受体配体-1(PD-L1)表达的影响。[方法]收集44例手术切除NSCLC癌组织及癌旁组织,检测其PD-L1及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平。以不同浓度的干扰素-γ(IFN-γ)处理A549细胞,观察PD-L1表达情况。A549细胞根据转染物质不同分为3组,检测PD-L1、Janus激酶信号传导(JAK)和与转录激活子3(STAT3)蛋白磷酸化相对表达水平。[结果]NSCLC肿瘤组织PD-L1(56.82%)及HMGB1阳性表达率(72.73%)显著高于癌旁组织(0.00%,22.73%)(P<0.05)。以100IU/mL的IFN-γ处理细胞,加重组人HMGB1蛋白处理的PD-L1阳性表达率(40.37±3.71)%高于未加重组人HMGB1蛋白处理(32.74±3.48)%(P<0.05);重组人HMGB1蛋白处理的A549细胞JAK1(60.45±5.73)%和STAT3蛋白磷酸化水平(65.38±4.28)%低于重组人HMGB1蛋白未处理(82.73±4.51)%,(85.59±5.17)%(P<0.05)。[结论]敲低HMGB1表达,能够抑制A549细胞JAK1和STAT3蛋白磷酸化,降低PD-L1表达水平;而上调HMGB1表达可抑制A549细胞JAK1和STAT3蛋白磷酸化,增加PD-L1表达水平。     

优雅蝈螽雄性附腺结构与分泌蛋白特性

通过组织切片和SDS-PAGE方法,研究优雅蝈螽Gampsocleis gratiosa Brunner von Wattenwyl雄性附腺的结构及分泌蛋白的特性。结果表明,优雅蝈螽雄性附腺由3类腺管组成:乳白长腺管、透明腺管和乳白短腺管,腺管的管壁组织结构相似,从内到外依次为单层上皮细胞、基膜、肌肉层,不同腺管管腔分泌物H-E染色后呈现不同颜色。SDS-PAGE分析各种腺管的分泌蛋白具有特异性。     

中国斜缘螽属的研究及两新种记述(直翅目,露螽科)

研究了中国斜缘螽属的种类,并报道两新种,即刺尾斜缘螽Deflorita centa sp.nov.和弯尾斜缘螽Deflorita curva sp.nov.,模式标本保存于西南农业大学植物保护学院标本室.     

解脲脲原体感染和不孕不育关系的研究

本文报道原因不明的不孕不育夫妇(甲组)2181例,解脲脲原体培养阳性1203例,阳性率55.16％。其中男性阳性率55.48％;女性为54.92％。正常生育夫妇(乙组)366例,阳性107例,阳性率为29.03％,其中男性18.93％,女性35.04％。两组比较,无论总阳性率,还是单独男性或女性,甲组均显著高于乙组(p<0.005)。经以强力霉素为主治疗后,转阴率达83.87％,其中妊娠390人,占38.65％。作者认为解脲脲原体感染和部分原因不明不孕不育是相关的。     

铃期增温对棉花产量、品质的影响及其生理机制

以泗棉3号棉花品种为材料,于2010和2011年在南京农业大学牌楼试验站设置铃期(7月13日-8月24日)增温试验,模拟全球增温条件下棉花产量、品质的变化趋势及其生理机制.结果表明: 在铃期增温2～3 ℃(日均温31.1～35.2 ℃)条件下,植株总生物量下降约10%,单株皮棉及籽棉产量降低30%～40%.棉纤维品质变化显著,且不同纤维品质指标对增温的响应程度存在较大差异:马克隆值和断裂比强度显著升高,纤维长度下降,而整齐度指数和伸长率无显著变化.棉株光合能力、干物质累积能力和光合产物输出能力显著下降;可溶性氨基酸、可溶性糖、蔗糖含量及碳氮比均显著下降,而淀粉含量显著上升;增温条件下营养器官干物质分配比例增多,生殖器官干物质分配比例相对减少,经济系数随之降低.棉株下部果枝受增温影响较小,中、上及顶部果枝受增温影响较大.表明在增温2～3 ℃条件下,棉株大部分时间处于热胁迫状态,不仅光合能力下降,而且光合产物向“库”端的转运能力下降,最终导致其减产.     

优雅蝈螽雄性附腺的超微结构及其腺管提取物对精子束的作用

为阐明优雅蝈螽Gampsocleis gratiosa Brunner von Wattenwyl雄性附腺的结构与功能的关系, 本文利用透射电镜(transmission electron microscope, TEM)技术研究了优雅蝈螽雄性附腺的超微结构, 利用微分干涉相差显微镜(differential interference contrast microscope, DIC)技术并结合雄性附腺匀浆提取物与精子束在体外的短暂培养, 研究了优雅蝈螽雄性附腺对精子束的作用。结果表明： 优雅蝈螽雄性附腺3类腺管组织结构相似, 腺管管壁为单层上皮细胞, 缺少内表皮, 说明其来源于中胚层。上皮细胞富含粗面内质网、 线粒体、 高尔基体, 具有分泌细胞的特点。腺管管腔中分泌物有4种形态, 即电子透明的物质、 电子致密的颗粒物质、 细纤维状物质以及绒球状物质。上皮细胞的分泌方式主要有2种, 即顶质分泌和局部分泌。乳白短腺管的匀浆提取物参与了帽状精子束解聚的过程, 乳白长腺管和透明腺管的匀浆提取物有维持精子束活性的作用。本研究结果为进一步阐明螽斯雄性附腺的生理功能奠定了基础。     

长爪沙鼠IgG的纯化及抗血清的制备

目的 纯化长爪沙鼠血清IgG,制备兔抗长爪沙鼠IgG抗血清。方法 采用Hitrap Protein G亲和层析预装柱来纯化长爪沙鼠血清IgG;通过SDS-PAGE电泳和Western-Blotting免疫印迹法对长爪沙鼠血清IgG进行纯度鉴定,免疫兔子制备抗血清。结果 7 mL长爪沙鼠血清纯化得到11 mg IgG;电泳和免疫印迹测定,IgG纯度大于95%;用纯化的IgG作抗原制备了兔抗血清,免疫双扩散测定效价达1∶32。结论 建立了长爪沙鼠血清IgG的纯化方法,制备了长爪沙鼠IgG抗血清,证实长爪沙鼠血清IgG和Protein G具有较高的亲和性。