牛体外受精胚胎的基因组甲基化模式

利用抗5-甲基胞嘧啶(5MeC)抗体免疫荧光法检测了体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)和体外培养(IVC)的牛合子及早期胚胎的基因组甲基化模式. 实验结果表明: 有61.5%的合子发生了雄原核去甲基化, 而34.6%的合子没有发生去甲基化; 当胚胎发育到8-细胞时, 甲基化水平明显下降, 且一直到桑椹胚期仍维持低甲基化状态, 但同一枚胚胎的不同卵裂球之间甲基化水平不同; 在囊胚期, 内细胞团细胞的甲基化水平很低, 而滋养层细胞的甲基化水平却很高. 本研究结果至少部分地提示, IVM/IVF/IVC可能对牛合子及早期胚胎的甲基化模式有一定影响.     

不同类型冠心病患者血清Hcy、TBIL、hs-CRP、尿酸的表达及临床意义

目的:探讨不同类型冠心病患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、总胆红素(TBIL)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、尿酸的水平及临床意义。方法:选取首都医科大学附属北京地坛医院2015年9月-2018年7月收治的冠心病患者132例为冠心病组,根据临床诊断分为稳定型心绞痛52例(SAP组)、不稳定型心绞痛42例(UAP组)、急性心肌梗死38例(AMI组),另选取50例同时期于我院体检的健康志愿者为对照组,检测各组Hcy、TBIL、hs-CRP、尿酸的水平,采用Pearson相关分析Hcy、TBIL、hs-CRP、尿酸水平之间的相关性,采用Logistic回归分析冠心病的影响因素。结果:冠心病组患者的血清Hcy、hs-CRP、尿酸水平显著高于对照组,TBIL水平显著低于对照组(P0.05)。AMI、UAP组患者的血清Hcy、hs-CRP、尿酸水平显著高于SAP组,TBIL水平显著低于SAP组(P0.05),且AMI组患者的血清Hcy、hs-CRP、尿酸水平显著高于UAP组,TBIL水平显著低于UAP组(P0.05)。经Pearson相关分析显示,Hcy与hs-CRP、尿酸呈正相关,与TBIL呈负相关,hs-CRP与尿酸呈正相关(P0.05),TBIL与hs-CRP、尿酸无明显相关性(P0.05)。经Logistic回归分析显示,Hcy、hs-CRP、尿酸、高血压、糖尿病均是冠心病的独立危险因素(P0.05),TBIL是冠心病的保护因素(P0.05)。结论:冠心病患者血清Hcy、hs-CRP、尿酸水平升高,TBIL水平降低,Hcy、TBIL、hs-CRP、尿酸与患者的病情相关,也是冠心病的影响因素。     

C型尿钠肽在动物繁殖过程中的作用研究进展

C型尿钠肽(CNP)为尿钠肽家族成员之一,作为自分泌及旁分泌因子不仅具有维持心血管系统功能稳态、调控细胞增殖及促进骨骼生长等功能,并且在动物繁殖过程方面具有重要的作用。近年研究揭示CNP是小鼠体内减数分裂抑制物质,而且CNP能够促进卵泡发育,增加促性腺激素刺激后的排卵数量。基于此,CNP在用作生理性的减数分裂抑制剂增强卵母体外发育及提高家畜的超排效率方面具有重要的应用前景。因此,综述CNP结构、作用机制、在动物繁殖过程的作用及应用前景。     

家兔供体卵裂球细胞周期对核移植胚胎发育的影响

通过化学药物处理使家兔桑椹胚卵裂球的细胞周期分别同期化于G1、S或G2期 ,然后分别移入去核的MⅡ期卵母细胞中 ,以研究供体核细胞周期对家兔胚胎细胞核移植效率的影响。试验结果表明供体核细胞周期对家兔核移植胚胎的发育潜力有明显影响 ,以G1期卵裂球为供体的核移植重组胚的激活率、卵裂率、桑椹胚、囊胚和孵化囊胚率及囊胚平均细胞数分别为 87 3% (32 2 / 36 9)、 84 9% (2 99/ 35 2 )、 71 5 % (193/ 2 70 )、5 8 0 % (76 / 131)、 35 1% (4 6 / 131)和 12 6± 4 8,显著高于S期 [79 6 % (10 9/ 137)、 74 4% (93/ 12 5 )、30 3% (33/ 10 9)、19 3% (17/ 88)、 6 8% (6 / 88)和 118 8± 3 5 ]、G2期 [6 3 6 % (70 / 110 )、6 0 % (6 0 / 10 0 )、16 9% (11/ 6 5 )、 16 3% (7/ 43)、 4 7% (2 / 43)和 110 6± 5 8]和未经同期化处理的卵裂球 [78 1% (185 /2 37)、 73 2 % (15 8/ 2 16 )、 49 4% (4 3/ 87)、 32 2 % (2 8/ 87)、 12 6 % (11/ 87)和 12 0 5± 4 4](P <0 0 5 )。来源于G1期卵裂球的 144枚克隆胚胎移植到 12只受体中 ,6只妊娠并产下 19只活仔 ,产仔率为 13 2 % ,显著高于来源于S期 (5 8% ,7/ 12 0 )、G2期 (0 ,0 / 12 6 )或未同期化卵裂球的克隆胚胎 (5 3% ,8/ 15 0 ) (P <0     

动物乳腺生物反应器的现状和趋势

利用转基因家畜的乳腺生产人类重组蛋白,可以高效获得安全、足量的药用蛋白。本文针对乳腺生物反应器的成功研制,从目的基因的选择、载体构建、转基因技术等方面探讨了动物乳腺生物反应器的研究现状。分析了提高转基因效率和外源蛋白表达水平的技术途径,提出了降低总体成本的战略措施。特别探讨了利用Cre-loxP系统发展“体细胞打靶体细胞核移植技术体系”,高效生产乳腺生物反应器动物的可能性。     

兔转基因单细胞克隆株的分离培养及其染色体倍性分析

为检测原代二倍体细胞转基因后单细胞克隆的增殖能力及其染色体倍性稳定性,用脂质体介导的转染方法将质粒DNA pEGFP-C1（带有报告基因GFP和Neo^r）导入体外培养的兔胎儿成纤维细胞中,经G418药物筛选后,分离出73个GFP阳性细胞克隆,最后存活13个（18％）,对其中9个克隆的染色体倍性进行分析,结果只有2个（22％）克隆的染色体倍性正常率在75％以上,分别为80％和75％,其余7个克隆的染色体倍性正常率均在70％以上。这表明,当使用转基因单细胞克隆株作为供核细胞产生克隆动物时,单细胞克隆的增殖代数和染色体倍性的稳定性需要进一步研究提高。     

转pGH基因猪血清pGH含量的分析

用ELISA方法分别测定了3头F0代成年阳性猪和8头F1代幼年阳性猪血清 pGH的水平,发现阳性个体间在激素含量及变化趋势上有很大差别,其中F1代个体pGH变化趋势与阴性对照较为一致。研究结果表明阳性个体本身性别及生理状况与外源基因表达有关,同时也反映出外源 pGH基因的表达状况与该基因在宿主基因组中的插入位点不同有着密切的联系。     

卵丘细胞核移植技术生产克隆牛犊

分别以短期培养的5头牛卵丘细胞(1~5 BCC)为细胞核供体, 共用1188枚体外成熟的去核卵母细胞构建了931枚重构胚(78.4%).体外培养后,763枚(82%)发育至2-细胞期,627枚(67.3%)发育至8-细胞期,最后获得囊胚275枚(29.5%).囊胚的平均细胞数为124±24.5 (n = 20).分析不同个体来源的卵丘细胞,同一个体卵丘细胞饥饿与否以及饥饿时间的长短、融合后核/质相容时间(融合到激活的时间长短)等因素对核移植效率的影响发现,5个个体的体细胞核移植囊胚率(14.1%,45.2%,27.3%,34.3% vs 1.5%)有显著差异(P<0.05).同一供体细胞饥饿与否(47.1% vs 44.4%)、饥饿11~12 d (52.5%)和18~19 d (41.6%)均不影响核移植囊胚率(P≥0.05).核/质相容2~3 h的囊胚率(20.3%)显著低于3~6 h组(31.0%,P<0.05). 3~6 h范围内,囊胚率无差异(P≥0.05).其中63枚冷冻的核移植囊胚解冻后移植给31头受体牛,妊娠4例,最后顺利获得2头克隆牛犊.结果表明,牛卵丘细胞饥饿不是核移植成功的关键因素,核质相容程度和供体细胞的个体差异对核移植效率有一定影响.卵丘细胞能够获得全程发育的克隆牛犊.     

基于营养视角的中国食物进口需求研究

基于2000-2016年中国食物进口数据,从营养视角考察了中国热量及主要供能营养素进口来源分布情况,并实证估计了中国各营养成分进口需求弹性。研究发现：美国、巴西、阿根廷和东盟是中国热量、蛋白质、脂肪和碳水化合物进口的主要来源地;从支出弹性来看,美国和阿根廷的热量及主要营养素的支出富有弹性;所有营养的自价格弹性都为负。交叉价格弹性结果表明,在中国热量进口市场,美国与巴西和东盟之间表现出显著的替代关系;在蛋白质和脂肪进口市场,美国与巴西之间均表现出显著的替代关系;在脂肪进口市场,东盟与巴西和阿根廷之间存在着显著的互补关系;在碳水化合物进口市场,美国与东盟之间存在较强的替代关系。     

转pGH基因猪外源基因染色体定位研究

应用地高辛标记探针对转pGH基因(猪生长激素基因)猪染色体进行原位杂交,经胶体金抗体、银增强放大系统检测外源pGH基因在染色体上的整合位点。研究表明,转基因阳性个体间外源基因整合位点存在差异,但对个体而言,外源基因总是集中分布于某一特定的染色体上。本研究将为探究外源基因整合位点与其表达效率的关系及今后定点整合的研究提供理论指导。