矽尘致肺泡巨噬细胞产生O_2~的原位显示技术

建立无机有毒粉尘颗粒致肺泡巨噬细胞 (alveolar macrophages,AMs)产生超氧阴离子 (O- ·2 )的原位显示技术。以硝基四氮唑蓝 (Nitro Blue Tetrazolium,NBT)为捕捉剂 ,于产生 O- ·2 的原位形成紫蓝色的双甲月替沉淀。O- ·2 的阳性反应呈紫蓝色沉淀 ,分布于 AMs质膜及与吞噬颗粒交界处。结果表明 ,无机有毒粉尘颗粒致 AMs产生的 O- ·2 能够以细胞化学方法于原位显示 ;以 O- ·2 反应阳性为标志 ,AMs为一个异质性群体。这一技术比自由基总体测定技术更能直观具体的显示 AMs与粉尘的作用关系 ,是一项实用的研究技术。     

人Leptin的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

用 RT- PCR自脂肪细胞 RNA扩增人瘦素 (leptin)基因的 c DNA片段 (约 50 0 bp)并克隆至克隆载体 p SK(+) ,获得重组质粒 p SK- OB,DNA序列分析显示获得的 Leptin基因和文献报道一致 .用限制酶 Eco R 和 Bam H 从 p SK- OB切下并插入原核表达载体 p BV2 2 0的相应限制酶位点 ,转化大肠杆菌 DH5α.转化菌株经 42℃诱导 ,SDS- PAGE检测和 Western印迹鉴定 ,获得高水平重组人瘦素的表达菌株 ,其表达量达菌体总蛋白的 30 %以上 .     

重组葡激酶的分离纯化

在构建出高表达,高活性的葡激酶工程菌株的基础上,对表达产物进行了分离纯化研究。经离子交换纯化后,纯度达８５％－９０％,回收率为５０％－６０％,经凝胶过滤后,纯度达９９％以上,回收率为６０％,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定,相对分子质量为１５．５＊１０＾３,比活为１．０＊１０＾５,Ｎ端氨基酸序列与献报道的相符。     

超高效液相色谱-电喷雾串联四级杆质谱鉴定灵芝中脂质成分

脂质是灵芝重要活性成分之一,但目前对灵芝胞内脂质成分的构成研究甚少。本研究采用UPLC-ESI-MS/MS技术,对灵芝发酵菌体的胞内脂质构成进行分析。结果显示,灵芝细胞中共鉴定到296种脂质,其中甘油酯112种、磷脂148种、鞘脂34种和甾醇2种;甘油酯和磷脂分别占总脂质的44.70%和38.06%,鞘脂和甾醇分别占总脂质的17.08%和0.16%。分析甘油酯中主要成分为甘油三酯,占甘油酯总含量的67.36%;磷脂中主要成分为磷脂酰乙醇胺,占磷脂总含量的62.64%;鞘脂中主要成分为神经酰胺,占鞘脂总量的60.33%;此外,本研究检测出27种游离脂肪酸,其中20种为不饱和脂肪酸,相对含量为65.59%;7种为饱和脂肪酸,相对含量为34.41%。本研究系统性地分析了灵芝细胞中的脂质构成,为进一步开展灵芝细胞中脂质相关研究奠定基础。     

玉米和花生间作根际细菌群落结构与PICRUSt的功能预测

禾本科/豆科作物间作能够促进作物生长与产量形成,而根际微生物组被认为与间作产量优势形成关系密切。将玉米和花生进行盆栽间作并设置以下三种根系分隔方式：塑料膜分隔(即全隔玉米与全隔花生)、尼龙网分隔(即网隔玉米与网隔花生)、无分隔处理(即无隔玉米与无隔花生),采用基于16S rRNA基因的高通量测序技术及PICRUSt功能预测分析不同模式下二者根际细菌群落结构与功能类群的变化,以期从土壤微生物组角度阐明玉米/花生间作产量优势形成的内在机制。结果显示：玉米/花生间作明显改变了二者根际细菌群落结构,无隔、网隔玉米的根际细菌群落结构更为相似并区别于全隔玉米,而网隔花生根际细菌群落结构明显区别于无隔、全隔花生。而且,无隔、网隔玉米根际放线菌门的相对丰度显著高于全隔玉米,网隔花生根际放线菌门、厚壁菌门的相对丰度显著高于全隔、无隔花生,而芽单胞菌门呈现相反的变化趋势。在玉米和花生根际,无隔、网隔处理高于全隔处理的OTU也均主要注释为放线菌门。共存网络分析发现,作为玉米根际细菌网络重要节点的Streptomyces、Actinomadura、Arthrobacter、Bacillus等菌属其丰度变化表现...     

细菌Ⅵ型分泌系统的调控与功能研究进展

Ⅵ型分泌系统(Type Ⅵ Secretion System,T6SS)是近年来研究较多的一种细菌分泌系统,广泛存在于革兰氏阴性菌中,在细菌的毒力、定殖、扩散及竞争遗传中发挥着重要的作用.本文综述了细菌T6SS的结构、调控以及生物学功能的最新研究进展,以期为基于T6SS的抗菌药物研制及细菌感染的诊断与防控提供新思路.     

老年患者术后脓毒血症预后影响因素分析

探讨发病原因及感染等因素对老年患者术后发生脓毒血症病情及预后的评估价值。

收集2019年1月—2021年11月外科重症监护室术后发生脓毒血症的老年患者92例,以生存结局分为死亡组和存活组,通过比较两组患者术前、术后身体质量指数（BMI）、血清总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、C−反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、B型利钠肽（BNP）、乳酸和D−二聚体（D-D）等指标差异,采用多因素logistic回归分析分析影响术后脓毒血症预后的危险因素,并绘制受试者工作特征曲线（ROC）,计算ROC曲线下面积（AUC）。

两组老年患者合并的基础疾病中,消化系统疾病引发脓毒血症的死亡率高于其他系统疾病（P＜0.05）。存活组与死亡组术前血清TP、Alb、CRP、PCT、BNP、乳酸和D-D与术后比较差异无统计学意义（P＞0.05）。术后存活组与死亡组比较,血清乳酸、Alb、PCT、D-D和BNP差异均有统计学意义（P＞0.05）。多因素回归分析发现乳酸和BNP是影响术后脓毒血症死亡的危险因素,AUC分别为0.879和0.858。

血清乳酸和BNP与老年术后发生脓毒血症严重程度密切相关,对判断预后具有一定参考价值。老年患者术前的慢性病防治与消化系统疾病早发现、早期手术干预是老年患者规避重症感染的关键,对改善老年患者术后临床结局至关重要。

     

粪便菌群移植治疗腹泻型肠易激综合征12例临床疗效观察

目的 观察粪便菌群移植（fecal microbiota transplantation,FMT）治疗腹泻型肠易激综合征（diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D）的疗效。方法 2015年4月至2016年9月南京大学医学院附属金陵医院普通外科肠道微生态治疗中心的12例符合罗马Ⅲ诊断标准的IBS-D患者,均给予FMT治疗,记录移植治疗前后患者腹部疼痛评分、排便次数、大便性状Bristol粪便评分、全球IBS评分和IBS-QOL评分及相关不良反应。治疗后随访12周。结果 采用Cochran's Q秩和检验比较FMT治疗前与治疗后第12周状况（P50,P25~P75）：腹部疼痛明显缓解[（5.00,4.25~6.75）vs（3.00,2.25~3.00）,P=0.003];粪便性状改善[（6.00,5.00~7.00）vs（4.00,3.25~5.00）,P=0.003];排便次数下降[（3.50,3.00~5.00）vs（2.00,1.00~3.00）,P=0.003],差异均具有统计学意义（P<0.05）。随访期间疗效稳定,患者未发生严重不良反应。结论 FMT能够改善IBS-D患者腹泻症状,缓解腹部症状,12周内治疗效果良好。     

零膨胀模型在珍稀鱼类资源时空分布预测中的应用——以长江口刀鲚为例

物种分布模型在估计渔业资源栖息分布中已有广泛应用,但在珍稀鱼类资源的时空分布预测方面,数据零值过多的情况是模型选择时应考虑的重要问题,零膨胀模型是解决此类问题的有效手段。根据2009—2016年每个季度在长江口采集的刀鲚资源量与环境调查数据,运用零膨胀泊松(zero-inflated Poisson,ZIP)模型和零膨胀负二项(zero-inflated negative binomial,ZINB)模型建立了长江口刀鲚资源密度与水温等环境因子之间的关系,并运用最优模型对2017年各季节长江口刀鲚资源密度分布进行预测。结果表明:在零膨胀模型结果的第一部分,水温对刀鲚资源密度非零值的发生有显著正向影响;零膨胀模型结果的第二部分显示,经度与刀鲚资源密度的大小呈显著负相关,水温对刀鲚资源密度的大小有显著正向影响;相比最优ZIP模型,最优ZINB模型对数据拟合较好,并具有较好的预测能力;最优模型显示,刀鲚资源密度的预测值在空间上呈现自西向东逐渐减小的趋势,预测结果与实际观测值存在空间分布的一致性;在时间上呈现夏季>春季>秋季>冬季的分布格局,这与水温的季节变化趋势一致。本研究...     

外来入侵植物反枝苋的研究进展

本文对反枝苋生物学特性、入侵过程及可能分布区域与影响其分布的相关因子、除防、应用的相关研究进行了综述。结果发现:反枝苋种子能够适应较广的萌发条件,特别是在高温条件下具有高萌发率;反枝苋能够调整生物量及生理生化过程来应对环境变化,具有很强的可塑性;随着气候环境的变化,反枝苋的入侵持续进行,下一步将会向中国西南地区入侵;研制、筛选新型除草剂及探索除草剂的施用方法是目前针对反枝苋产生抗药性的解决途径;反枝苋具有较高的营养价值及药用价值,且在植物修复方面具有潜在前景。目前对反枝苋的研究还存在不足,应在以下方面进行加强:(1)在环境压力下的适应性进化机制及快速适应性的分子基础;(2)对入侵地土壤微生物群落、植物群落及动物的影响及其机制的研究;(3)平衡应用与防御之间的矛盾。