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62.
路易(小)体(Lewy body, LB)构成特征的蛋白质组份(protein content)在体外形成的路易(小)体样包含体(Lewy body-like inclusion)或聚集体(aggresome)中能够获得鉴定.通过蛋白质组学方法鉴定LB蛋白质组分是一种新的途径.10 µmol/L人工合成蛋白酶体抑制剂PSI(proteasomal inhibitor)作用PC12细胞48 h使其产生PSI诱导性包含体(PSI-induced inclusions). 为了在体外指明可能的LB蛋白质组分,通过生物化学分级分离、双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-D)和肽质量指纹鉴定(identification via peptide mass fingerprints,PMF)的蛋白质组学方法,鉴定了2个涉及突触递质合成的蛋白质、6个26 S蛋白酶体亚基、2个细胞骨架蛋白、2个线粒体蛋白、1个抗氧化蛋白和7个分子伴侣蛋白和(或)分子伴侣样蛋白等20个LB蛋白质组分.结果提示,当PC12细胞发生蛋白酶体抑制时,这20个LB蛋白质组分可能被富集到PSI诱导性包含体中. 相似文献
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阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)又称老年痴呆症,是一种中枢神经系统(central nervous system,CNS)退行性疾病。β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ42)被认为在阿尔茨海默病(AD)的发生、发展过程中起核心作用。Aβ42由APP经β-和γ-分泌酶相继切割产生。γ-分泌酶是一个蛋白酶复合体,早老素(presenilin,PS)是γ-分泌酶的催化组分。因此,抑制PS/γ分泌酶的活性是治疗AD的关键,因而PS/γ分泌酶也是治疗AD的主要靶点。根据这些理论,人们提出了一些治疗AD的新方法,其中PS/γ-分泌酶抑制剂和调节剂成为近年来人们关注的焦点。 相似文献
64.
建立了一种检测β-半乳糖苷酶活性的5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷(X-gal)试纸方法,其原理在于酶色原底物X-gal在β-半乳糖苷酶作用下产生蓝色5-溴-4-氯-吲哚.此方法X-gal用量少、操作简便、省时.适用于基因克隆的检定. 相似文献
65.
大肠杆菌D-木糖异构酶基因的序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
大肠杆菌D-木糖异构酶基因由含D-木糖操纵子的质粒px0100被克隆到pwRl3质粒上。以Bal31核酸酶逐步缩短DNA片段的方法,获得了若干个含有不同大小DNA片段的亚克隆,并在质粒上直接测定序列,从中获得了1.6kbDNA片段的核苷酸全序列。其中包括长度为1320bp编码440个氨基酸的蛋白质。此外,在其5’端尚有209个核苷酸和3’端82个核苷酸,它们分别含有核糖体结合位点SD序列和D-木糖异构酶基因转录终止区。 相似文献
66.
67.
68.
69.
HIV—1外膜蛋白在甲醇型醇母Pichia pastoris中的表达与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
为建立用甲醇型酵母Pichia pastoris表达HIV-2Rod gp105的新途径,用PCR方法获得HIV-2Rod gp105基因,并将其克隆到P.Pastoris分泌型表达载体pHILS1中,测序正确后将重组质粒pHILS1-gp105电转化GS115。用PCR法筛选阳性P.Pastoris重组子,并用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹结果表明,与HIV-1不同,HIV-2的外膜蛋白gp105能在甲醇型酵母Pichia Pastori中诱导表达,产物为-90kD的糖蛋白,具有良好的抗原特异性。 相似文献
70.
【目的】为揭示南美斑潜蝇Liriomyza huidobrensis (Blanchard)与其寄主相互作用的机理, 为利用诱导抗性控制南美斑潜蝇的发生为害奠定必要的基础。【方法】本文采用高效液相色谱法(HPLC)和超高效液相色谱法-质谱联用法(UPLC MS), 分别测定了南美斑潜蝇幼虫为害对黄瓜叶片中茉莉酸(jasmonic acid, JA)和水杨酸(salicylic acid, SA)的诱导作用。【结果】南美斑潜蝇幼虫持续为害1 d后, 受害黄瓜叶片内JA含量即显著高于健康对照, 轻度受害处理和重度受害处理分别在第3天和第5天上升幅度最大, 分别比健康对照增加2.01倍和1.62倍; 而SA含量在3 d后才显著高于健康对照, 轻度受害处理和重度受害处理在第9天上升幅度最大, 分别比健康对照增加4.66倍和1.67倍; 轻度受害对JA和SA的系统诱导作用不明显, 而重度受害对JA和SA具有明显的系统诱导作用。【结论】南美斑潜蝇幼虫为害对黄瓜叶片内JA和SA具有诱导作用。 相似文献