雪莲愈伤组织蛋白质提取及双向电泳分析

以产自西藏绵头雪莲为材料,分别采用TCA/丙酮法、尿素法和酚法,提取雪莲愈伤组织蛋白质并进行双向电泳,对蛋白产量和纯度以及电泳图谱进行比较。结果表明:(1)酚法较TCA/丙酮法和尿素法获得的蛋白质更纯,杂质少,蛋白点多且分辨率较高,在二维电泳图谱中背景清晰,横纹和纵纹较少。(2)对酚法提取的蛋白质样品进行上样量的比较结果显示,17cm胶条500μg上样量二维图谱的背景和蛋白点分布较好。(3)用0℃处理雪莲愈伤组织12h,利用建立的双向电泳体系分析结果发现,有33个蛋白点比常温(23℃)上调1.5倍表达,有5个蛋白点的表达下调2倍。(4)质谱鉴定结果表明,低温诱导的蛋白包括NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶、腺苷高半胱氨酸酶、抗性RPP8类蛋白、蛋白点gi|13129470、α-微管蛋白,分别与新陈代谢、植物防御、能量代谢、细胞的结构蛋白相关。     

我国古书籍中记载的鱼类

列举我国古籍中记载的32个"鱼"偏旁部首字。按生物学分类系统,对照列出它们的中文名、学名、所属的目和科,隶属鱼纲的1总目、8目、21种。     

水生生物的紫外防护剂——类菌胞素氨基酸

类菌胞素氨基酸(mycosporine-like amino acids, MAAs)是一大类以环己烯酮为基本骨架, 与不同类型氨基酸通过缩合作用形成的水溶性物质。它能在真菌、海洋细菌、蓝藻和真核藻类细胞中合成, 并在海生无脊椎动物和鱼类等生物体内积累, 广泛存在于多种水生生物中。它具有紫外光防护、渗透、繁殖调节及发育保护等功能。本文主要介绍有关类菌胞素氨基酸的分布、结构、生物合成和积累以及生理功能的研究进展。     

原子氧自由基阴离子对大肠杆菌细胞作用的研究

研究了原子氧自由基阴离子(O-)对大肠杆菌的失活作用和形貌变化的影响.实验所用的O-自由基由新研制的O-发生器制备,其中[Ca24Al28O64]4· 4O-(缩写为C12A7-O-)材料是O-发生器中发射O-的部分.实验结果表明,大肠杆菌的失活率随O-强度的变化而变化,在O-强度为1.5μA/cm2时,细胞的死亡率大大加强,作用120min后,细胞死亡率超过3个对数量级.通过场发射扫描电子显微镜观察发现O-对细胞结构具有破坏作用.通过丙二醛(MDA)的形成证实了O-诱导大肠杆菌发生脂质过氧化反应过程的存在,这可能是大肠杆菌死亡的潜在原因.当1.5μA/cm2的O-流通入到大肠杆菌悬浊液后,丙二醛浓度开始升高,15min后达到最高值1.2μmol/g,然后缓慢下降.结果显示,原子氧自由基阴离子能失活大肠杆菌,诱导脂质过氧化反应,这对发展一种新的净化微生物污染方法和研究微生物与原子氧自由基阴离子相互作用具有潜在的意义.     

矩叶蓝果树的订正

据笔者对采自云南勐腊的“矩叶蓝果树”模式标本及曾被定为该变种的标本研究,该变种具聚伞花序,花梗长3－5mm,雌花子房上位,核果果皮极薄,内具1种子,并非蓝果树属植物,与茶茱萸科粗丝术属之粗丝本完全同种。粗丝木产中国西南至东南部,印度、斯里兰卡、缅甸、泰国、印度支那也有分布。     

bmy基因敲除对解淀粉芽孢杆菌Q-426溶血性及抗菌活性的影响

Iturin家族环脂肽对于红色毛癣菌等病原真菌具有较强的抑菌活性,有潜力成为治疗皮肤疾病的新型抗真菌药物。解淀粉芽孢杆菌Q-426菌株能够产生环脂肽fengycins和iturin家族的bacillomycin D,但该菌株发酵液具有溶血活性。为确定bacillomycin D是否为引发溶血作用的主要物质,本文利用同源重组基因敲除技术,构建解淀粉芽孢杆菌bmy基因缺失菌株,抑制bacillomycin D的合成,研究对其溶血性及抗菌活性的影响。突变菌株发酵液中未检测到bacillomycin D产生,且发酵液的溶血性及抗菌活性明显减小,表明bacillomycin D与该菌的溶血活性及抑菌活性密切相关。     

人脂联素重组克隆载体构建

目的:构建含有人脂联素(adiponectin,ad)基因的重组克隆载体pEGFP-N1-AD,为进一步研究AD与脂质代谢及代谢综合征关系奠定基础。方法:根据Gene-Bank中已经公布的AD设计引物,从含有目的基因的质粒克隆模板中,利用PCR方法钓取目的基因。将AD基因克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。酶切、PCR、及测序鉴定。结果:PCR、酶切及测序鉴定证实目的基因正确克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,测序结果与Gene-Bank报道一致。结论:成功构建了AD重组克隆真核表达载体。     

大鼠HO-1表达质粒构建、活力检测及抗HUVEC凋亡的作用研究

异种移植排斥反应的主要特征为内皮细胞发生Ⅱ型激活,引起黏附分子、细胞因子和前促凝分子等基因高表达,造成血管收缩、白细胞黏附、激活、聚集和血栓形成,最终导致内皮细胞凋亡。保护基因HO-1通过抑制前炎症反应及免疫调抑作用以保护异种移植器官。因此,通过构建含剪切的野生型大鼠HO-1 cDNA的表达型质粒,用DOTAP包裹转入HUVEC中表达,测定表达量及表达产物活性;采用TNF-α诱导细胞凋亡,以及Heme和SnPP分别刺激细胞,诱导和抑制细胞内HO-1表达量,流式细胞仪测定细胞凋亡率,明确HO-1的抗细胞凋亡作用。结果显示HO-1在HUVEC中高度表达,活力为对照组5倍;TNF-α诱导细胞凋亡,但Heme处理后细胞凋亡率下降至20%以下,而SnPP处理后细胞凋亡率显著上升,最高达到95%以上,并且HO-1基因表达抑制时细胞凋亡率是诱导时的5-20倍。本实验表明Heme处理后HO-1表达上调,具有显著抗细胞凋亡作用,细胞凋亡率与HO-1表达量呈负相关,提示HO-1通过抑制细胞凋亡,对细胞有保护作用。