家蚕LongSAGE文库鉴定及延长标签的改进GLGI方法

结合标签的基因序列延伸(GLGI)是随着基因表达序列标签(SAGE)应运而生的一种鉴定新标签的技术。为了克服该技术操作繁琐、成本高的弊端,根据已经构建的家蚕限性茧色品种的2个LongSAGE文库,选择30个差异表达的标签(tag)进行GLGI延伸。尝试了几个简化,(1)用totalRNA代替mRNA进行dsDNA的合成;(2)调整磁珠吸附DNA的顺序;(3)在PCR反应中用普通的DNA聚合酶代替高保真酶(Pfu)。结果显示,30个标签有27个获得有效扩增,扩增序列真实包括了SAGE标签的17bp序列,3个标签的结果符合NCBI的家蚕数据库已有注释,13个未注释标签经过延长后得到了注释,11个标签序列为待确定的新基因序列。这种简化能够作为家蚕SAGE文库其他tag和新基因研究的有效简化操作体系。与传统的方法相比,可减少成本30%以上,缩短操作时间20%。     

顶鼻康吉鳗嗅囊形态的光镜与扫描电镜观察

用光学显微镜和扫描电镜观察了5尾不同体长顶鼻康吉鳗标本嗅囊的形态结构。结果表明：顶鼻康吉鳗嗅囊近卵圆型;嗅囊长径与眼径的比值为1．3～1．6;单个嗅囊的嗅板数为82～122片;嗅板厚度约100μm;嗅板垂直对称地排列于嗅轴两侧,不同部位的嗅板大小和形状不一致;嗅板从嗅轴向两侧分出,至嗅囊腔顶部几乎相互接触;嗅板远离嗅轴端和向嗅囊腔一侧游离,其余部分与嗅囊膜相连;嗅板向嗅囊腔的游离缘分布有许多嗅孔;未观察到次级嗅板,但在嗅板的表面具有脊状隆起和凹陷;嗅板表面密被纤毛,包括非感觉纤毛、感觉纤毛和微绒毛,嗅板远离嗅轴的端部还观察到一种大型的杆状纤毛。嗅板表面存在大量纤毛表明,顶鼻康吉鳗嗅囊的水动力机制应属纤毛摆动型（isosmates）。     

饲料膨化加工方法对其营养成分的影响

目的观察饲料生产过程中的膨化处理对各种营养素的影响情况。方法随机选取不同批次的膨化饲料按GB/T14924.9-2001标准,进行水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、氨基酸、维生素及矿物质的测定,得出膨化前后理化检测数据并进行分析。结果饲料中粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、氨基酸、维生素经过膨化处理后,均出现了不同程度的损失,其中维生素损失较大,致使维生素B1、维生素B2、维生素B6、叶酸大部分损失。结论膨化加工方法对于饲料中的常规营养成分、氨基酸、维生素水平有较大程度的影响,为满足动物生长、发育、繁殖等需要,应采取添补措施,以保证其营养成分。     

青阳参组织培养及愈伤组织的成分分析

用青阳参(Cynanchum otophyllum)的嫩枝和芽在Ms 2．0mg／L2,4-D 0．1mg／L KIN的培养基上诱导愈伤组织。通过不同的培养基和激素配比实验,发现6,7-V 2．0mg／L2,4．D 0．3mg／LKIN最适合愈伤组织的生长。但在6,7-V 1．0mg／L2,4．D 0．1mg／L KIN培养基中的愈伤组织次生代谢物含量最高。愈伤组织的生长周期为27d,但在33d时次生代谢产物的含量最高。从愈伤组织中分离到7个化合物：(1)9,10,11-三羟基-十八碳-12(Z)-烯酸甲酯(methyl9,10,11-trihydroxy-12-octadecencate),(2)胡萝卜甙(daucosterol),(3)β-谷甾醇(β-sitoster01),(4)华木酸(betuliniic acid),(5)齐端果酸(oleamlic acid),(6)棕榈酸(hexadecanoic acid),(7)十八碳-9-烯酸(9-octadecenoic acid)。首次报道从植物愈伤组织中分离到多羟基十八碳烯酸,并讨论了化合物（1）对植物细胞生长的可能影响。     

云南美登木悬浮培养细胞的化学成分(英)

利用组织培养方法以云南美登木 (MaytenushookeriLose .)未木质化的茎和嫩叶为材料诱导出愈伤组织 ,经过继代培养建立了悬浮细胞培养系。培养物的乙酸乙酯提取物显示抗橙色青霉 (PenicilliumavellaneumUC_4 376 )生长的生物活性。对培养物进行化学成分研究 ,分离鉴定了 9个化合物 :2 ,3_diacetoxylmaytenusone (1)、角鲨烯 (squa lene ,2 )、β_谷甾醇 (β_sitosterol,3)、2′ ,3′,4′_triacetylsitoindosideⅠ (4)、salaspermicacid (5 )、美登酮酸 (maytenonicacid ,6 )、2α_羟基美登酮酸 (2α_hydroxy_maytenonicacid ,7)、6 ,11,12_trihydroxy_8,11,13_abietrien_7_one (8)和 11,12_dihydroxy_8,11,13_abietrien_7_one (9) ,其中化合物 1为新化合物。通过 2DNMR对化合物 5 - 7的NMR数据进行了全指定 ,并修正了化合物 5和 6的部分碳谱数据指定。     

青阳参组织培养及愈伤组织的成分分析

用青阳参（Cynanchum otophyllum）的嫩枝和芽在MS + 2.0 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L KIN的培养基上诱导愈伤组织。通过不同的培养基和激素配比实验,发现 6,7-V + 2.0 mg/L 2,4-D + 0.3 mg/L KIN 最适合愈伤组织的生长。但在6,7-V + 1.0 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L KIN 培养基中的愈伤组织次生代谢物含量最高。愈伤组织的生长周期为27 d,但在33 d时次生代谢产物的含量最高。从愈伤组织中分离到7个化合物：⑴9,10,11-三羟基-十八碳-12(Z)-烯酸甲酯 (methyl 9,10,11-trihydroxy-12-octadecenoate),(2) 胡萝卜甙 (daucosterol),(3)β 谷甾醇 (β sitosterol),（4） 华木酸 (betulinic acid),（5）齐端果酸 (oleanolic acid),（6）棕榈酸 (hexadecanoic acid),（7）十八碳-9-烯酸 (9-octadecenoic acid)。首次报道从植物愈伤组织中分离到多羟基十八碳烯酸,并讨论了化合物（1）对植物细胞生长的可能影响。     

小麦叶绿素酶生化动力学特性研究

采用分光光度法对小麦Chlase的生化性质及其动力学特征进行了部分研究.结果表明:Chlase的Km值为11.6μmol/L,Vmax为1.14μmol·min-1·g-1FW;最适pH为7.5,pH在7～8的范围内,Chlase催化Chl脱植基反应的活性较高;最适温度为45℃,在60℃、70℃、80℃保温时,该酶活力丧失50%所需的时间分别为27min、22min、18min;研究发现不同的金属离子及络合剂对该酶活性有影响,低浓度的Ca2+、Zn2+和较高浓度的Mg2+对Chlase有激活作用,而Fe3+、EDTA则较明显地抑制了Chlase活性;Chlase可催化Chla、b的脱植基反应,对Chlb的亲和性较高.     

云南美登木悬浮培养细胞的化学成分

利用组织培养方法以云南美登木(Maytenus hookeri Lose.)未木质化的茎和嫩叶为材料诱导出愈伤组织,经过继代培养建立了悬浮细胞培养系.培养物的乙酸乙酯提取物显示抗橙色青霉(Penicillium avellaneum UC-4376)生长的生物活性.对培养物进行化学成分研究,分离鉴定了9个化合物:2,3-diacetoxyl maytenusone (1)、角鲨烯 (squalene,2)、β-谷甾醇 (β-sitosterol,3)、2′,3′,4′-triacetylsitoindoside Ⅰ (4)、salaspermic acid (5)、美登酮酸 (maytenonic acid,6)、2α-羟基美登酮酸(2α-hydroxy-maytenonic acid,7)、6,11,12-trihydroxy-8,11,13-abietrien-7-one (8)和11,12-dihydroxy-8,11,13-abietrien-7-one (9),其中化合物1为新化合物.通过2D NMR对化合物5-7的NMR数据进行了全指定,并修正了化合物5和6的部分碳谱数据指定.     

蓖麻蚕对鼠生殖系统雌激素样效应的研究

目的研究蓖麻蚕雌蛾乙醇提取物(EEFM)的雌激素效应,以寻找理想的ERT药源并提高蓖麻蚕的综合利用价值.方法根据每日药物及剂量处理,将雌性小鼠随机分为模型对照组,正常对照组,乙烯雌酚组,EEFM低剂量(EEFM-L,0.2 g/kg·d-1)组,EEFM高剂量(EEFM-H,0.4 g/kg·d-1)组.测定实验鼠的子宫、免疫器官脏器指数、阴道角化细胞发生率及POD活性.结果EEFM两个剂量对未成年雌性小鼠、成年去势雌性小鼠子宫作用效应均达到显著或极显著.EEFM对去势成年雌性小鼠角化细胞发生率的影响约为乙烯雌酚(DES)组的2/3(EEFM-H77.20%,DES95.7%),效果极显著.结论EEFM对实验鼠具有显著的雌激素效应,对免疫器官元不良影响(DES组显著降低实验鼠胸腺重量),有可能成为雌激素替代疗法(ERT)的理想药源物质.     

椭圆叶绣线菊的组织培养

1植物名称椭圆叶绣线菊(Spiraeajaponica var.ovalifolia). 2材料类别幼茎和嫩芽. 3培养条件(1)诱导培养基:MS 6-BA 1.0mg·L-1(单位下同);(2)增殖培养基:MS 6-BA 2.0 NAA 0.1;(3)壮苗培养基:MS NAA 0.1;(4)生根培养基:MS NAA 1.0.所有培养基均加0.7%琼脂和3%的蔗糖,在高温灭菌前pH均为5.8.培养温度24℃,光照10 h·d-1,光照度为1 500～2 000 lx.