一株拮抗立枯丝核菌的放线菌筛选、鉴定及生理特性

通过对峙实验,从采集自黄渤海海域的双齿围沙蚕(Perinereis aibuhitensis)中分离到一株内生放线菌SCF-18,并对其抑菌活性进行分析。SCF-18对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)都具有拮抗作用,且对立枯丝核菌生长的拮抗效果最为明显,生长抑制率为89.78%。抑菌试验结果表明:菌株SCF-18发酵滤液可以抑制立枯丝核菌丝的生长,发酵液浓度越高,抑制力越强;当发酵液浓度达到50%时,对两种病原菌的抑制率分别为89.78%和80.26%。菌株SCF-18生长特性试验结果表明:菌株SCF-18生长最适温度为30℃,最适pH值为7;放线菌SCF-18耐盐度可达5%。根据形态特征、培养特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析,将放线菌SCF-18初步鉴定为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。本研究发现,SCF-18菌株是防治立枯丝核菌等病原菌的潜在优良生防菌株,具有潜在的开发应用价值。     

受油菜素内酯调控的水稻幼苗地上部膜蛋白的鉴定及功能分析

油菜素内酯(brassinosteroids,BRs)对水稻株高、叶夹角等重要农艺性状具有明显的调控作用,鉴定水稻中受BR调控的蛋白质对揭示BR调控水稻生长发育特定生化过程的潜在机制具有重要的意义。该研究以日本晴水稻(Oryza sativa L.ssp.japanica cv.Nipponbare)为研究材料,用明显影响水稻地上部生长的BR浓度处理,提取地上部膜蛋白,经双向电泳及质谱分析,鉴定到7个受BR调控的蛋白质:光系统II稳定因子HCF136、PMRP(putative membrane related protein,gi|113565516)、ATP synthase(gi|113611230)、gi|113594641、gi|22831029、gi|47497322和gi|56784135,对这些蛋白的功能鉴定可以为阐明BR调控水稻生长发育的机理提供新的思路和途径。其中功能未知的膜蛋白PMRP受BR下调,经亚细胞定位,PMRP定位在细胞质膜上,经生物信息学分析,PMRP具有磷脂酰胆碱结合位点,可能影响膜的组分进而参与水稻抗逆性调控;PMRP RNAi转基因拟南芥对冷害的抵抗能力增强,说明BR可通过调控PMRP的表达提高植物的抗冷性。     

质控血清09CS中13个肺炎球菌荚膜多糖抗体IgG含量检测范围的确定

目的 建立09CS作为质控血清用于13价肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗(13PCV)临床血清样本检测中的检测值范围。方法 用WHO推荐的检测人血清中抗肺炎球菌荚膜多糖抗体IgG的定量ELISA,以国际人肺炎球菌标准血清007sp为标准,将09CS作为待测血清,检测其在13个血清型(1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型)中抗荚膜多糖抗体IgG含量的值。连续检测09CS血清100余次,计算99%置信区间的各血清型几何平均抗体浓度、标准偏差(SD)和变异系数(CV)。结果 检测得到09C中13个血清型抗荚膜多糖IgG抗体含量以及在99%置信区间(CI)下±2.58倍SD的检测值范围;13个血清型检测结果的CV分别为10.86%、12.52%、13.96%、14.98%、28.77%、11.16%、14.96%、9.31%、10.43%、7.28%、10.86%、12.52%、13.96%,除6A型外,各型CV均低于15%,表明试验间精密度良好;检测次数异常率低于10%。结论 09CS可作为质控血清,用于13价肺炎球菌结合疫苗临床血清中抗荚膜多糖抗体IgG含量的ELISA检测。     

微生态活菌片剂生产中干法制粒粒度分布对产品质量的影响

目的探讨干法制粒工艺中粒度分布对微生态活菌片剂质量的影响。方法应用干法制粒工艺制造粉料,通过对不同粒径的片重、硬度和脆碎度进行测定,确定出压制素片的颗粒最佳粒径范围,然后对工艺参数压辊压力、加料速度和压辊转速进行正交试验,选择所制颗粒的粒径与最佳粒径一致的工艺为最优工艺,再通过对最佳工艺压制出的片剂进行稳定性研究,从而验证粒径对产品质量的影响。结果粒径分布在20~80目时,片剂重量、硬度和脆碎度的结果不仅符合标准还较稳定。工艺参数中压辊压力为110KN、加料转速为70rpm、压辊转速为9.0rpm时所压制片剂的粒径范围在20~80目时所占最大,约97.82%。对产品中长双歧杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的6个月稳定性检测再次确定粒径分布在20~80目时,产品质量最优。结论干法制粒工艺粉料粒径分布在20~80目时,微生态活菌片剂质量为最优。     

家庭心理干预对精神分裂症患者自知力及复发的影响

目的:探讨家庭心理干预对精神分裂症(SZ)患者自知力的影响,并观察患者的复发情况,为未来SZ家庭干预计划的合理制定提供一定的指导。方法:回顾性分析2017年1月-2017年12月、2018年1月-2018年12月在我院完成治疗及随访的68例、64例SZ患者的临床资料,分别将其设为对照组(常规药物治疗)及观察组(药物治疗基础上联合家庭心理干预)。干预3个月后,评估两组干预效果。于干预前、干预3个月后采用住院精神病人社会功能评定量表(SSPI)、贝克认知自知力量表(BCIS)分别评估两组社会功能、自知力。全部患者均获得1年随访,记录并比较两组复发率。对两组患者的生活质量评分进行评估对比。结果:观察组干预总有效率为95.31%,高于对照组的83.82%,且观察组复发率(3.13%)低于对照组(13.24%),差异均有统计学意义(P0.05)。干预3个月后,观察组SSPI评分、BCIS各因子评分较对照组更优,差异有统计学意义(P0.05)。观察组干预3个月后患者的生活质量综合评定问卷-74(GQOLI-74)的各项评分包括物质生活、心理健康、躯体健康、社交功能评分均高于对照组患者相应评分,组间对比差异有统计学意义(P0.05)。结论:给予SZ患者家庭心理干预,可提高治疗效果及患者的自知力,有利于改善患者的社会功能,降低复发率,提高患者的生活质量,应用价值较高,可进一步在临床推广应用。     

放射治疗联合参一胶囊治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床研究

目的：探讨适形放射治疗联合参一胶囊在Ⅲ期非小细胞肺癌治疗中的临床疗效。方法：选取本院自2011 年4 月至2014 年6 月经病理及影像学资料明确证实的Ⅲ期非小细胞肺癌患者60 例，随机分为两组，即对照组和治疗组。对照组行单纯适形放射治 疗；治疗组在适形放射治疗的同时，给予口服参一胶囊8 周。治疗期间观察患者有无乏力症状，定期行血液学检查，完成治疗后4 周行胸部CT检查。结果：治疗组出现不同程度乏力的患者数明显少于对照组，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)；定期血常规检 验，治疗组出现白细胞、血红蛋白减低的患者比率明显低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；两组近期治疗效果相近，差异 无统计学意义(P>0.05)。结论：放射治疗联合参一胶囊治疗可以改善患者乏力状况，降低放射治疗引起的血液不良反应的发生几 率。     

芥菜型油菜黄化突变体叶片叶绿素合成代谢变化

以芥菜型油菜黄化突变体(L638-y)及其野生型(L638-g)为材料,测定了叶片叶绿素(Chl)、类胡萝卜素(Caro)、Chl合成代谢中间产物含量变化,及叶绿素分解代谢的关键酶叶绿素酶(Chlase)和叶绿素合成代谢相关的氨基乙酰脱氢酶(ALAD)、胆色素原脱氨酶(PBGD)、粪卟啉原Ⅲ氧化酶(CPOX)和原卟啉原Ⅸ氧化酶(PPOX)的活性变化,以揭示芥菜型油菜黄化突变体L638-y叶片缺绿的生化机制.结果显示:(1)从油菜苗期到现蕾期,L638-y叶片总Chl和Caro含量均显著低于L638-g,且Chl b含量降低程度大于Chl a,总Chl含量降低程度大于Caro;(2)L638-y叶片Chlase活性在3～5叶期显著低于L638-g, 其它各生长时期二者Chlase活性均无显著差异;(3)L638-y叶片叶绿素合成代谢中间产物氨基乙酰丙酸(ALA)、胆色素原(BPG)、尿卟啉原Ⅲ(Urogen Ⅲ)和粪卟啉原Ⅲ(Coprogen Ⅲ)含量均显著大于L638-g,而原卟啉Ⅸ(Proto Ⅸ)、镁原卟啉(Mg-Proto)、原脱植基叶绿素(Pchlide)的含量却显著低于L638-g;与L638-g相比,L638-y叶片ALAD活性无显著差异,BPGD活性显著增加,而COPX和PPOX活性却显著降低.研究表明,L638-y叶片叶绿素缺乏的主要原因是叶绿素合成代谢受阻,而并非其叶绿素降解所致,受阻位点在由Coprogen Ⅲ-Proto Ⅸ的反应.这是一种不同于前人报道的新型缺绿突变体.     

RGD-葡激酶突变体(K130T,K135R)的制备与活性分析

以葡激酶突变体质粒mSAK(K130T ,K135R)-pBV220为模板,PCR重叠引物延伸法引入突变位点,并将该片段克隆至载体pBV220 ,构建了RGD-mSAK-pBV220质粒,转化大肠杆菌后热激诱导获得了高效表达,表达产物占菌体总蛋白的50%以上,且主要以可溶性形式存在,所获蛋白依次用Q SepharoseHP柱、SephaycrylS200HR柱和SP柱进行纯化,纯化的蛋白的纯度可达98%以上,纤维蛋白溶圈法体外溶栓活性测定结果表明,所获RGD-mSAK蛋白溶栓活性与野生型葡激酶相当,豚鼠体内免疫试验证明突变体的免疫原性也有所降低,血小板聚集试验分析突变体蛋白的抗血小板聚集能力,RGD 葡激酶突变体具有一定的抗血小板聚集能力。     

高产菊粉酶酵母筛选、发酵和酶学性质研究

筛选到1株菊粉酶高产克鲁维酵母菌株,采用酵母高密度细胞发酵方法,最高菊粉酶产量达到288.78u/mL,比80～90年代国际上报道的克鲁维酵母菊粉酶最高产量高6.8倍。该酶的菊粉酶/转化酶活性比为1/24.72;菊糖m=13.3mmol/L,蔗糖Km=62.6mmol/L;最适反应pH值为4.4,但在pH3.8～5.6的范围内均保持了较高的活性,相当于最适pH值下活性的90%;最适反应温度为55℃,在50～575℃范围内能够保持较高活性,50℃下酶的半衰期约为16h;外加Mg2+提高酶活性11.28%。