Rab23在皮肤鳞状细胞癌中的表达

目的：研究Rab23在皮肤鳞状细胞癌（SCC）中的表达及意义。方法：用免疫组化S-P法分别检测30例皮肤SCC、15例正常皮肤组织标本中Rab23的表达。结果：Rab23在皮肤SCC和正常皮肤中阳性率分别为90％和13.3％,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Rab23在皮肤SCC中高表达可能在皮肤SCC的发生发展过程中发挥作用。     

动物离心机中大鼠行为状态无线视频采集装置的研制

目的:研制一种在正加速度作用下能实时观测大鼠行为状态的实验视频采集装置,为研究正加速度导致脑损伤的病理生理机制和防治措施提供新的方法。方法:依据正加速度对大鼠体位的要求和离心机特殊的环境,通过特制的大鼠座舱和无线视频采集单元来实现对动物离心机中正加速度作用下大鼠行为状态的实时观测;固定大鼠的座舱主要由胸部固定圈、身长调节圈、头部运动限制框构成;无线视频采集单元由2.4 G无线摄像头、无线信号接收器、信号放大器、计算机以及视频采集软件组成。结果:座舱特殊的大鼠固定方式,既满足了正加速度对体位的要求,又不影响对大鼠行为状态的观测,2.4 G无线视频采集技术保证视频信号在离心机高速旋转环境下的实时传输和观测,视频画面清晰流畅,并且能保存视频供回放分析。结论:动物离心机无线视频采集装置可用于正加速度作用下大鼠行为状态的实时观测与研究。     

种子异型植物异子蓬的生殖分配和结实格局

选择能产生异型果实和种子的一年生盐生植物异子蓬(Suaeda aralocaspica)为研究对象, 研究其生殖分配和结实格局。结果表明, 异子蓬具有较高的生殖分配和规律性的“谨慎型”结实格局。异子蓬的生殖分配高达56%。在资源充裕时, 该植物对扁圆形棕色种子(采取机会主义的萌发策略)的投资多于双凸镜形黑色种子(采取谨慎的萌发策略)的投资。异子蓬的花序类型为二歧聚伞花序, 单个果序含果实(种子)的数目为1-15个, 最多可分为4级。果序内果实的分布具有一定的规律: 第一级1个果实, 第二级2个, 第三级4个, 第四级8个。异子蓬优先将资源供给黑色种子的果实, 利用不同类型种子的发育顺序, 首先保证黑色种子的产出。具有较高的生殖分配和采取“谨慎”的生殖策略是异子蓬与其所处盐漠环境长期适应的结果。     

植物功能基因组学研究的有效工具--RNAi技术

综述了RNA干扰的机制以及在生物体内的功能等方面的研究进展,并对在此基础上发展起来的RNA干扰技术在植物功能基因组学中的应用情况作了简要的介绍.     

犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用

根据GenBank报道的犬腺病毒(CAV)和犬细小病毒(CPV)序列,设计两对联合PCR引物,其中一对为CAV-1和CAV-2通用引物,另一对为CPV引物。在建立单项PCR基础上,通过优化Mg^2 离子浓度和循环参数等反应条件建立联合PCR,确定联合PCR条件为：96℃180s,96℃230s,56℃30s,72℃280s,30个循环。联合PCR结果显示：CAV—l扩增片段大小为497bp,CAV-2为l019hp,CPV为719hp;细胞和其它相关病毒对照均无扩增带。上述PCR产物经用限制性内切酶酶切和克隆测序,结果均与相应病毒的应有条带和序列相同。敏感性比较试验结果表明。联合PCR比用细胞培养分离病毒敏感。将联合PCR应用于15份CAV和CPV细胞培养物,5份CAV-1、1份CAV-2和3份CPV人工感染犬病料以及30份临床病料检测,并与电镜负染、HA／HI及病毒分离等方法的结果进行比较,结果显示,联合PCR的检出率和病毒分离结果一致,高于电镜负染和HA／HI试验。以上结果说明：CAV-1／12AV-2和CPV联合PCR不仅具有很好的特异性和敏感性,而且可以在短时间内(2．5h～3h)同时鉴定出上述三种病毒。因此具有良好的实验室诊断和临床应用价值。     

超高灵敏度荧光显微成像技术对光敏剂细胞内分布的初步研究

目的：探讨应用基于ICCD的超高灵敏度荧光显微成像系统研究光敏剂细胞内分布的可行性。方法：传代培养内皮细胞、食管癌细胞和肺癌细胞,将不同浓度血卟啉单甲醚(HMME)与细胞共同孵育不同时间。采用荧光显微镜及ICCD组成的荧光显微成像系统采集不同浓度及不同孵育时间条件下HMME的荧光图像,并采用计算机图像处理技术进行图像增强、滤波后计算其细胞浆与细胞核的平均荧光强度比值。同时应用激光共聚焦显微镜图像采集进行对比。结果：HMME浓度为5μg／ml时,荧光显微镜采集到HMME的荧光图像;HMME浓度升高到160μg／ml,激光共聚焦显微镜获得HMME的荧光图像。两组图像的特点都为胞浆中荧光强度较高,细胞核区荧光较弱;细胞浆与细胞核的比值约为2～3：1。结论：荧光显微镜和ICCD采集细胞内光敏剂的荧光图像灵敏度高,方法可靠、实用。HMME较多分布在细胞质中,细胞核吸收较少。     

犬2型腺病毒E3区表达载体的构建

利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白（GFP）基因和在犬病病毒糖蛋白（Rgp）基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCPgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36h即可观察到荧光,72～96h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48～96h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性的启动子可使外源基因获得良好表达。     

小黑杨环锌指蛋白基因的克隆与表达分析

用cDNA-AFLP技术从小黑杨中克隆与盐胁迫反应相关的cDNA片段,进一步应用RACE技术克隆出具有完整开放读码框的小黑杨环锌指蛋白基因（PsnRZF）,该基因全长1061bp,其中5非翻译区为184bp,3非翻译区为82bp,开放读码框为795bp,编码264个氨基酸,预测蛋白的分子量为30.25kDa,理论等电点为8.04。实时定量PCR检测的结果显示,正常生长条件下该基因在根、茎、叶中都表达;NaCl胁迫下,该基因在根、茎、叶中的表达量升高。在叶中的表达量随着处理时间的延长而逐渐升高,胁迫处理后第6天表达量达到最高。     

长期糖尿病大鼠心脏肾上腺素受体及其介导的功能的变化

目的:探讨长期糖尿病大鼠心脏肾上腺素受体(AR)的改变及其与心功能变化之间的关系.方法:采用链脲佐菌素(STZ)注射造成胰岛素依赖性糖尿病大鼠模型,放射配体结合实验和离体左心房收缩功能实验等方法观察心脏AR及功能的改变.结果:与同龄对照大鼠相比,糖尿病大鼠心脏β-AR的最大结合容量(Bmax)下降34%(P<0.05),KD值不变;心脏α1-AR Bmax无显著改变.糖尿病大鼠左心房β-AR介导的最大收缩反应(Rmax)较对照组下降64%(P<0.05);α1-AR介导的最大收缩反应增加36%(P<0.05),pD2值不变.结论:长期糖尿病大鼠心脏β-AR介导的最大收缩反应降低,其可能与β-AR数量减少有关.α1-AR介导的最大收缩反应代偿性增强,其可能与受体后信号转导效应增强有关.     

腹腔镜全结肠系膜切除术治疗老年结肠癌患者的近期疗效评价及对机体免疫力的影响

目的:研究腹腔镜全结肠系膜切除术对老年结肠癌患者的近期疗效评价及机体免疫力的影响,为临床治疗结肠癌提供依据。方法:选择2014年6月至2016年6月我院收治的136例老年结肠癌患者为研究对象,按照患者治疗意愿分为两组。治疗组57例行腹腔镜下全结肠系膜切除术,对照组79例行开腹手术。比较两组患者的手术时间、淋巴结清扫数量、术中出血量、肛门排气时间、下床活动时间、术后住院时间及术后并发症发生率。于术前1 d、术后1 d及术后3 d采用流式细胞仪检测两组患者外周血中T淋巴细胞亚群(CD3~+、CD4~+、CD8~+)及自然杀伤(NK)细胞;于术前1 d、术后1 d及术后3 d采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组患者血清C反应蛋白(CRP)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)浓度。结果:与对照组比较,治疗组术中出血量减少,肛门排气时间、下床活动时间及术后住院时间均缩短,差异均有统计学意义(P0.05)。两组患者淋巴结清扫数量及手术时间比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗组并发症发生率为7.02%,低于对照组的17.72%,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗组患者术后1 d和术后3 d外周血中T细胞亚群CD3~+、CD4~+和NK细胞所占比例及CD4~+/CD8~+的比值与术前1 d相比有所减小(P0.05),且术后1 d的CD4~+/CD8~+的比值和NK细胞低于术后3 d(P0.05);两组术后1 d及术后3 d外周血中CD8~+所占比例与术前1 d有所升高,但是差异无统计学意义(P0.05),且术后1 d的CD8~+所占比例与术后3d比较无明显差异(P0.05)。治疗组患者术后1 d和术后3天外周血中CD3~+、CD4~+与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),CD4~+/CD8~+的比值和NK细胞高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组术后1 d及术后3 d血清CRP、sIL-2R、IL-6、IL-8水平与均较术前1 d增高,术后3 d治疗组血清中CRP、sIL-2R、IL-6、IL-8水平低于术后1 d(P0.05),治疗组术后1 d及术后3 d血清中CRP、sIL-2R、IL-6、IL-8水平均低于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:腹腔镜全结肠系膜切除术与开腹手术相比,近期疗效更好,具有创口小、出血量少、术后恢复快、术后并发症发生率低及对机体免疫功能影响小等优点,可应用于老年结肠癌的治疗。