乳酸乳球菌表面表达Brazzein甜味蛋白系统的建立

参照甜味蛋白Brazzein基因序列,结合乳酸乳球菌的密码子偏嗜性的相关分析,对甜味蛋白Brazzein基因进行改造,将第29位天冬氨酸、31位的组氨酸和第41位的谷氨酸分别突变为赖氨酸、丙氨酸和赖氨酸,以期提高目的蛋白的甜度。采用重叠PCR的方法合成目的基因,目的片段亚克隆到pMD18-T载体上。经序列测定分析后,目的片段克隆入分泌表达载体pNZ8112,电转化乳酸乳球菌中,构建成表面展示表达甜味蛋白Brazzein的乳酸乳球菌表达系统。     

电离辐射对有核红细胞表面腺三磷去焦磷酸酶活力的影响

(1)两栖类(黑斑蛙),爬行类(鳖),鸟类(家鸽)有核红细胞表面Apyrase活力具有显著差异,鳖最高,黑斑蛙次之,而以家鸽为最低。(2)经30,000或50,000 rads X射线离体照射后,家鸽红细胞表面Apyrase活力分别下降18%与27%,鳖则为7%及13%,而黑斑蛙红细胞表面的Apyrase却并未发生明显的变化。因此,不同动物有核红细胞表面Apyrase,对电离辐射的敏感程度似与动物系统上的高低有关,而与原来酶活的高低无关。     

花椰菜花叶病毒(新疆分离物)基因组DNA的全部核苷酸序列

用Maxam-Gilbert化学切断法,从含全长病毒DNA的克隆pCaMV C17中,测定了CaMV-XJ基因组的全部核苷酸序列。CaMV-XJ DNA含有8,060个碱基对。在不同的译读相位中,CaMV基因组含有6个主要ORF或可能的基因,与其他巳作全序列测定的三个CaMV分离物比较,有三个显著的差别;(1)ORFⅥ编码的氨基酸变化达16％,显著高于其他区域的变化和其他三个分离物之间的差别,(2)在ORFⅣ的近氨基末端有39bp的插入,它与被插入区的序列几乎是直接重复;(3)由于核苷酸置换而引入了终止信号,所以T.Hohn[2]推测,可能存在的ORFⅦ不可能编码有功能的蛋白。     

斯坦尼小体的摘取和保存

根据斯坦尼小体和性腺随季节更替而同步发育的规律选择摘取时间。摘取的步骤为：①断尾放血，剖开体腔，露出输尿管和肾脏；②将输尿管末端扯断，并把输尿管和肾脏翻向鱼体前部，或将左右输尿管分别向两侧分离；③在肾后部中线背侧的左右肾连接处、输尿管上或背侧体壁内侧（包括第一脉弓附近）找到圆形或卵圆形的斯坦尼小体，用尖头镊摘取。将摘取的小体放在丙酮中脱水后再置干燥器中保存，或直接保存在－６０℃－－７０℃的低温冰箱     

农杆菌介导的河北杨遗传转化体系的建立

以兼具生态和能源植物功能的木本模式植物——杨树(河北杨)为材料,研究了携带促生长基因(35S-DAS5)的根癌农杆菌载体介导的河北杨遗传转化若干因素对转化效果的影响。结果显示,较适宜的转化系统为预培养2-4 d,农杆菌菌液(OD600值为0.4)侵染20 min,共培养4 d,在含30 mg/L卡那霉素(Km)的培养基上诱导不定芽,生根培养基中Km的适宜浓度为10 mg/L。     

兔玻璃体腔注射Dn—MyD88腺病毒载体观察对PVR形态学的影响

目的：重组Dn—MyD88（Dominant negative myeloid differentiation factor88,Dn—MyD88）腺病毒载体观察对增殖性玻璃体视网膜病变形态学的影响。方法：向兔眼内注射富含血小板浓度为5×10^7～10×10^7／ml的血浆制作PVR模型,并对MyD88介导的NF—κB信号通路进行了分析。向兔眼玻璃体腔内转染腺病毒携带的无功能MyD88,运用眼B超,眼底照相等方法,于1,7,14,21,28天观察PVR形态学变化。结果：在增殖性玻璃体视网膜病变中通过转染腺病毒携带的无功能MyD88,与对照组相比发现增殖膜有减少趋势。结论：在兔眼PVR模型中转染腺病毒携带的无功能MyDS8可抑制PVR的发生发展,可为临床PVR的治疗提供有益的参考和借鉴。     

鸭胚成纤维细胞中鸭瘟强毒的增殖特性研究

通过细胞培养物光学显微观察、细胞超薄切片研究、定量PCR检测技术对鸭胚成纤维细胞中鸭瘟强毒的增殖特性进行了研究.结果表明:鸭瘟强毒接种鸭胚成纤维细胞后42 h,可使细胞培养物出现大量明显的蚀斑病变.细胞培养物的超薄切片电镜观察研究表明,病毒核酸在胞核内常集中分布,呈直径35～45 nm的圆形颗粒状;核衣壳在胞核和胞浆内都有分布,呈直径90～100 nm的网形颗粒状;成熟病毒位于胞浆空泡内,呈直径150～300 nm的圆形,有囊膜和皮层结构;病毒通过囊膜与胞膜融合入侵细胞,在核内生成核酸、装配核衣壳,在胞浆中得到皮层,出芽到胞浆空泡内获得囊膜,通过胞吐作用释放到胞外.定量PCR研究表明:鸭瘟强毒接种细胞后10 h开始明显复制,接毒后30 h时含量趋于稳定,接毒后22 h时开始向胞外释放,50 h时达最大值,细胞和上清中病毒含量的增幅均为103左右,病毒主要存在于细胞中,其含量为上清的102～103倍.     

施用芽孢杆菌对虾池底泥细菌群落的影响

对施用芽孢杆菌制剂后虾池底泥细菌群落的变化进行了研究。结果表明 ,芽孢杆菌制剂改变了虾池底泥细菌类群组成 ,增加了底泥好氧细菌的数量。利用Shannon Wiener指数进行生物多样性分析 ,发现试验池和对照池底泥细菌的多样性指数 (H)、丰度 (D)和均匀度 (J)在整个养殖过程的动态变化相似 ,前期较低 ,中期、后期和末期都有不同程度的升高。但是 ,与对照池相比 ,试验池的优势菌属发生了变化 ,黄杆菌属 (Flavobacterium)和粘纤维菌属 (Cytophaga)数量增加 ,而弧菌 (Vibrio)和发光细菌(Photobacterium)数量相对减少 ,且对虾的成活率、体重和产量提高。     

广谱高效抑菌物质产生菌的筛选及鉴定

本实验从营养丰富的土壤中经初筛分离到60株具有抑菌活性的细菌, 在此基础上通过琼脂打孔扩散法进行复筛, 获得一株具有广谱抑菌活性的菌株, 经理化指标及16S rDNA序列测定和同源分析鉴定为侧孢短芽孢杆菌, 命名为S62-9.