基于p38MAPK通路探讨银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道黏液高分泌及血管重塑的影响

摘要 目的：探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract, GBE）通过调控p38MAPK通路对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）大鼠气道黏液高分泌及肺血管重塑的影响。方法：将90只大鼠随机分为空白对照组、COPD模型组、GBE高剂量组、GBE中剂量组、GBE低剂量组、SB203580组。采用香烟烟雾熏吸联合气道内注入脂多糖（LPS）的方法建立COPD大鼠模型,造模结束后分组给药;通过维多利亚蓝+VG染色观察大鼠肺小动脉病理改变,测量血管壁厚度占血管外径百分比（WT%）、管壁面积占血管面积百分比（WA%）的变化;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠肺泡灌洗液（BALF）与血清中TNF-α、TGF-β的表达;实时荧光定量法（RT-PCR）检测肺组织表皮生长因子受体（EGFR）、黏蛋白5AC（MUC5AC）mRNA表达;蛋白质印迹法（Western Blot）检测肺组织EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达。结果：与空白对照组比较,COPD模型组WT%、WA%明显升高（P＜0.05）;与COPD模型组比较,各药物干预组WT%、WA%明显降低（P＜0.05）;COPD模型组大鼠BALF及血清中TNF-α、TGF-β水平较空白对照组明显升高（P＜0.05）,各药物干预组TNF-α、TGF-β水平较COPD模型组明显下降（P＜0.05）;COPD模型组大鼠肺组织EGFR、MUC5AC mRNA与空白对照组相比明显升高（P＜0.05）,各药物干预组大鼠肺组织EGFR、MUC5AC mRNA与COPD模型组相比显著降低（P＜0.05）;COPD模型组大鼠肺组织中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达与空白对照组相比明显升高（P＜0.05）,各药物干预组大鼠肺组织中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达与COPD模型组相比明显降低（P＜0.05）,不同GBE剂量干预组中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达量随着给药剂量增加而减少。结论：GBE能够抑制COPD大鼠气道黏液分泌、改善肺血管重塑,其机制可能与抑制p38MAPK通路有关。     

伤寒沙门菌质粒对巨噬细胞自噬过程的影响

为研究伤寒沙门菌质粒pR_ST98对人巨噬细胞THP-1自噬过程的影响,以携带伤寒沙门菌质粒pR_ST98的野生株ST6、消除pR_ST98的突变株ST6-ΔpR_ST98和将pR_ST98经接合转移的回补株ST6-c-pR_ST98为受试菌,与THP-1共培养建立感染模型,并加入自噬作用阻断剂氯喹（CQ）进行干预。首先测定CQ单独作用对细胞及细菌的影响,确定CQ最适浓度;在细菌和细胞共作用后的不同时间点收集细胞,通过蛋白免疫印迹法(WB)和mRFP-GFP-LC3 质粒转染法检测细胞LC3Ⅱ蛋白、p62蛋白、自噬体及自噬溶酶体的变化。结果显示,30 μmol/L CQ对细胞自噬的阻断效果明显,且细胞存活率超过50%,对细菌也无明显影响。WB结果显示,用该浓度CQ干预后,ST6-ΔpR_ST98感染组细胞的LC3Ⅱ及p62表达量上升程度显著高于野生株ST6及回补株ST6-c-pR_ST98;CQ干预组3株受试菌感染细胞LC3点状结构数量均高于未加CQ组,且ST6-ΔpR_ST98感染细胞的点状结构数量明显增加。以上结果提示,伤寒沙门菌质粒pR_ST98在自噬前期发挥作用,早于溶酶体降解的过程。     

基于格网的南昌市生态环境脆弱性评价

科学评价生态环境的脆弱性,对合理利用土地资源和促进区域生态安全具有重要意义。以公里格网为基本评价单元,以快速城市化区域典型代表南昌市为研究区,通过SRP概念模型构建评价指标体系并选取17个评价指标,基于空间主成分分析法、全局Moran′s I指数以及LISA聚类图,量化分析了2000—2015年南昌市生态环境脆弱性的时空分布特征及驱动力。结果表明:(1)2000—2015年南昌市生态环境脆弱性呈现由轻度脆弱向中度脆弱演变的趋势;(2)2000—2015年南昌市各县(区)生态环境脆弱性差异明显,东湖区、西湖区、青山湖区、青云谱区、湾里区脆弱性程度最高,其他县(区)脆弱性增幅较大;(3)2000和2015年南昌市生态环境脆弱性具有明显的空间自相关性,且为正相关,高高聚集区主要分布在极度脆弱区,低低聚集区与微度和轻度脆弱区相关;(4)研究时段内,南昌市生态环境脆弱性主要驱动力为人口密度、人均GDP、人均耕地、坡度、地形起伏度、年均气温、极端最高温、极端最低温、年均降水量。