来源于泗阳鞘氨醇杆菌的聚磷酸激酶的克隆表达及在ATP再生系统中的应用

聚磷酸激酶(polyphosphate kinase,PPK)在体外催化合成ATP的反应中有着重要作用。为寻找能利用短链聚磷酸盐(polyphosphate,polyP)为底物高效合成ATP的聚磷酸激酶,本文以来源于泗阳鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium siyangensis)的聚磷酸激酶(PPK2)为研究目标,利用pET-29a构建重组质粒,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,并将其作为ATP再生系统的关键酶与l-氨基酸连接酶(YwfE)联用生产丙谷二肽(Ala-Gln)。ppk2长度为810bp,编码270个氨基酸;SDS-PAGE结果表明PPK2为可溶性表达,分子量为29.7kDa。对PPK2的最适反应条件进行了优化,结果发现其在22–42℃、pH7–10的范围内均可以保持较好活性,且在37℃、pH为7、镁离子(Mg²⁺)浓度为30mmol/L、底物ADP与六偏磷酸钠浓度分别为5mmol/L和10mmol/L时酶活最大,在0.5h时ATP产率可以达到理论值的60%以上。作为模式反应体系,当PPK2与YwfE联用生产Ala-Gln时,达到与直接添加ATP相同的效果。此聚磷酸激酶作为ATP再生系统具有较好的适用性,适用的温度和pH范围广,且能以廉价易得的短链polyP为底物高效合成ATP,为依赖ATP的催化反应体系的能量再生提供了新酶的来源。     

血管生成素样蛋白4和Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6与急性呼吸窘迫综合征严重程度的关系及对预后的评估效能研究

摘要 目的：分析血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)和Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6(KL-6)与急性呼吸窘迫综合征严重程度的关系及对预后的评估效能。方法：选择我院自2020年1月至2022年12月收治的120例急性呼吸窘迫综合征患者作为研究对象（观察组）,根据氧合指数（PaO₂/FiO₂）分为轻度组、中度组和重度组;另选120例非急性呼吸窘迫综合征患者作为对照组。检测所有患者血清ANGPTL4和KL-6的表达水平,分析血清ANGPTL4和KL-6与APACHE Ⅱ评分、PaO₂/FiO₂的关系,使用受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）评价血清ANGPTL4联合KL-6对急性呼吸窘迫综合征预后的评估效能。结果：对比对照组,观察组血清ANGPTL4、KL-6的表达水平均明显升高（P＜0.05）;血清ANGPTL4、KL-6的表达水平在轻度组、中度组和重度组中差异有统计学意义,且急性呼吸窘迫综合征越严重,升高越明显（P＜0.05）;经Pearson相关性分析,急性呼吸窘迫综合征患者血清ANGPTL4、KL-6的表达水平与PaO₂/FiO₂呈负相关,与APACHE Ⅱ评分呈正相关（P＜0.05）;经ROC曲线分析,血清ANGPTL4联合KL-6预测急性呼吸窘迫综合征患者入院28d内死亡的敏感度为90.14%、特异度为65.74%,AUC为0.900。结论：血清ANGPTL4、KL-6表达水平升高与急性呼吸窘迫综合征严重程度增大密切相关,两者联合在患者预后评估中具有一定价值,可作为判断病情及预后的辅助指标。     

黄秋葵组培快繁的研究

黄秋葵 (ＨｉｂｉｓｃｕｓｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓＬ .)为锦葵科一年生草本植物 ,别名羊角豆、秋葵。原产非洲 ,欧美及东南亚热带地区广泛栽培 (马传先 ,1999;李正应 ,1993;翁文 ,1997;雪珍等 ,1999)。黄秋葵是一种营养保健型蔬菜 ,其花、叶、芽、果均可食用 ,种子富含油脂、蛋白质及钾、钙、铁、锌、锰等矿物质 ,晒干后既可用于提取油脂和蛋白质 ,还可作为咖啡的添加剂或代用品。花、种子和根均可入药 ,对恶疮、痛疖有疗效。黄秋葵的愈伤组织在一定条件下比较容易产生体细胞胚并再生成完整植株 ,故黄秋葵的组培快繁研究也可为胚胎学研究和人…     

灭活的双歧杆菌对肠上皮细胞粘附及其影响因素的研究

目的 观察灭活的青春双歧杆菌对人大肠癌细胞系ＣＣＬ－２２９的粘附以及影响粘附的因素。方法 通过与双歧杆菌活菌比较,灭活的双歧杆菌同样能粘附于肠上皮细胞,并且耗尽培养上清有利于双歧杆菌粘附。结果 粘附具有显著的浓度效应;粘附效果与孵育环境的ｐＨ值有关;高温处理耗尽培养上清对粘附无明显影响。结论 灭活的双歧杆菌可能具有与活菌相同的生态效应。     

北海涠洲岛潮间带底栖贝类调查

１９９７年６月,我们带领学生赴广西北海进行动物学临海实习,对北海市海滨和涠洲岛的潮间带贝类进行了采集、调查。北海市位于广西壮族自治区南部、北部湾的东北岸、南流江的出海口附近,其西部紧靠洲湾,南部海面１８ｋｍ区有涠洲岛,地处亚热带海洋性季风气候区。年均...     

大叶黄杨长毛斑蛾生活习性观察

大叶黄杨长毛斑蛾PryeriasinicaMoore属鳞翅目,斑蛾科,又称冬青卫矛斑蛾。该虫过去是我地城镇庭院绿化观赏植物——大叶黄杨上的次要害虫。近几年突然暴发成灾,对街道、小区、单位庭院的大叶黄杨（俗称冬青）危害很重。为解决城镇绿化工程中的这一问题,1993～1995年作者对其生物学特性及防治进行了试验研究,现报道如下。1危害情况该虫食性较单一,主要危害大叶黄杨。据1992年在薛城区大叶黄杨上调查,很少见到危害症状。1993年同地调查发现危害株率在5％左右,1995年迅速发展到80％以上,造成大片植株叶片被食光,有的因此而枯死。它…     

化学脱色法在制备乳果糖中的应用

化学脱色法在制备乳果糖中的应用大连医科大学科达药业微生态研究所大连１１６０２４温朗聪袁杰利王红大连三株生态化妆品有限公司大连１１６０２４王崇霞乳果糖是一重要的双歧杆菌促生长因子,目前主要通过化学合成法获得。乳果糖广泛用于临床医药、保健品和食品添加剂等...     

油菜(Brassica napus L)收获指数的变异

本文首次采用田间试验的方法对国内油菜收获指数的变异进行了研究．结果表明不同油菜品种的收获指数存在变异,其变异规律大致是：１）中熟品种的收获指数高于早熟品种及晚熟品种;２）中长角果的品种较长角品种具有更高的收获指数;３）高产的新品种具有较高的收获指数;４）油菜粒壳比,角杆比及千粒重与收获指数呈正相关,杆重与收获指数呈负相关．     

油菜（Brassica napusL）的收获系数的变异

本文首次采用田间试验的方法对国同油菜收获指数的变异进行了研究。结果表明不同油菜品种的收获指数存在变异,其变异规律大致是：１）中熟品种的收获指数高于早熟品种及晚熟品种;２）中长角果的品种较长角品种具有更高的收获指数;３）高产的新品种具有较高的收获指数;４）油菜粒壳比,角杆比及千粒重与收获指数呈正相关,杆重与收获指数呈负相关。     

华生关怀理论对老年痴呆症患者的临床干预效果

目的:探索华生关怀理论在老年痴呆症患者临床护理中的应用效果,为临床护理提供参考。方法:选择2012年3月至2014年3月我院收治的老年痴呆患者200例,随机分为治疗组和对照组。对照组采用常规护理措施,治疗组采用华生关怀理论进行干预。分别于干预前后采用简易智能量表(MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(MOCA)、AD评定量表认知部分(ADAS-Cog)、日常生活活动量表(ADL)、中医症状积分量表对两组患者进行测评。结果:与干预前比较,两组患者干预后的MMSE和MOCA评分显著升高,ADAS-Cog、ADL和中医症状积分明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组比较,治疗组患者变化更明显(P0.01)。两组患者干预前后的血尿常规、肝肾功能及心电图等指标无显著差异(P0.05)。结论:利用华生关怀理论护理老年痴呆症患者,不仅能改善患者的病情,缓解心理压力,而且有利于减轻家庭和社会负担。